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DOI: 10.3791/66860-v
Gabriel S. Oliveira1,2, Clara M. Bento1,3,4, António Pombinho1,3, Rita Reis1,3, Kevin Van Calster5,6, Linda De Vooght5, André F. Maia1,3, Paul Cos5, Maria Salomé Gomes1,2, Tânia Silva1,2
1i3S – Instituto de Investigação e Inovação em Saúde da Universidade do Porto, 2ICBAS – Instituto de Ciências Biomédicas Abel Salazar, Universidade do Porto, 3IBMC - Instituto de Biologia Molecular e Celular, Universidade do Porto, 4Programa Doutoral em Biologia Molecular e Celular (MCBiology),Instituto de Ciências Biomédicas Abel Salazar da Universidade do Porto, 5Laboratory for Microbiology,Parasitology and Hygiene (LMPH), 6Department of Infectious Diseases in Humans, Immune Response,Sciensano
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Cette étude a mis au point un test de criblage à haut débit contre Mycobacterium abscessus avec une souche à double rapporteur récemment créée, en utilisant la fluorescence et la luminescence pour évaluer rapidement la viabilité bactérienne. Ce protocole sera pertinent pour les chercheurs qui souhaitent cribler de nouveaux médicaments contre cette bactérie résistante aux médicaments.
Mycobacterium abscessus est très résistant aux antibiotiques, comparable seulement à la tuberculose multirésistante sans traitement approuvé. Nos recherches portent sur le développement d’un protocole de dépistage de drogues évolutif utilisant des souches à double rapporteur et la technologie I3S. Cette approche vise à améliorer l’efficacité des tests, à accélérer la découverte de médicaments efficaces et moins toxiques et à rationaliser les traitements potentiels contre mycobacterium abscessus.
Le développement de médicaments pour les infections à M. abscessus repose sur des méthodes traditionnelles qui prennent du temps, comme les unités de formation de colonies, qui nécessitent beaucoup de main-d’œuvre, un faible débit et sont sujettes aux biais humains. En raison de la grande résistance de la bactérie, moins de coups sont trouvés. Ainsi, pour trouver de nouveaux traitements, le criblage à haut débit de milliers de composés est essentiel.
Cependant, les méthodes traditionnelles rendent cela peu pratique. Notre protocole utilise une souche double rapporteure de mycobacterium abscessus développée en interne, émettant à la fois de la luminescence et de la fluorescence. Il permet aux chercheurs d’évaluer l’efficacité thérapeutique d’un composé sans ajouter de réactifs ou d’étapes supplémentaires, ce qui améliore la vitesse et la reproductibilité.
De plus, la plate-forme de criblage d’I3S Biosciences utilise l’automatisation robotique pour les tests de criblage à haut débit, manipulant 105 microplaques sans aucune intervention humaine, augmentant ainsi l’efficacité tout en réduisant les erreurs. Ce protocole permet un criblage plus rapide et plus reproductible de médicaments contre mycobacterium abscessus, ce qui permet d’identifier de nouveaux résultats. Il peut révéler des cibles bactériennes clés ou des groupes fonctionnels de composés, fournissant des informations sur les candidats réussis et non retenus.
Cette approche rationalise le pipeline de développement de médicaments, oriente les recherches futures et accélère l’identification des résultats potentiels contre Mycobacterium abscessus.
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