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Étude de l’angiogenèse aux niveaux fonctionnel et moléculaire en exploitant le test de migration ...
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JoVE Journal Medicine
Investigating Angiogenesis on a Functional and Molecular Level by Leveraging the Scratch Wound Migration Assay and the Spheroid Sprouting Assay

Étude de l’angiogenèse aux niveaux fonctionnel et moléculaire en exploitant le test de migration des plaies par égratignures et le test de germination des sphéroïdes

Full Text
2,101 Views
09:16 min
May 31, 2024

DOI: 10.3791/66954-v

Julian Rapp*1,2, Jan Ness*1,3, Paula Liang1, Martin J. Hug4, Hansjürgen Agostini1, Günther Schlunck1, Clemens Lange5, Felicitas Bucher1

1Eye Center, Medical Center - University of Freiburg, Faculty of Medicine,University of Freiburg, 2Department of Medicine I, Medical Center - University of Freiburg, Faculty of Medicine,University of Freiburg, 3Institute of Pharmaceutical Sciences, Faculty of Chemistry and Pharmacy,University of Freiburg, 4Pharmacy, Medical Center - University of Freiburg, Faculty of Medicine,University of Freiburg, 5Ophtha-Lab, Department of Ophthalmology,St. Franziskus Hospital Muenster

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Cette étude présente le test de migration bidimensionnel (2D) et le test de germination de sphéroïdes tridimensionnel (3D), ainsi que leurs méthodes d’analyse respectives en aval, y compris l’extraction d’ARN et l’immunocytochimie, comme des tests appropriés pour étudier l’angiogenèse in vitro.

L’angiogenèse est un processus caractéristique impliqué dans l’embryologie et dans le développement de maladies, y compris la croissance tumorale et les maladies oculaires vasoprolifératives. Dans ce projet, nous visons à présenter un cadre complet de techniques in vitro qui peuvent être utilisées pour étudier l’angiogenèse au niveau moléculaire dans un cadre très contrôlé, et pour dépister des options thérapeutiques potentielles. La traduction in vitro en in vivo et, en fin de compte, en milieu clinique est difficile en raison du risque de résultats faussement positifs ou faussement négatifs.

Il est donc crucial de choisir le bon test d’angiogenèse et d’en connaître les limites. Cette étude vise à offrir des lignes directrices sur la façon d’interpréter et d’établir deux tests d’angiogenèse courants. Récemment, nous avons comparé un test de migration de blessure par égratignure 2D avec un test de germination de sphéroïde 3D.

Bien que le test 2D soit facilement évolutif, le test 3D capture l’angiogenèse plus en détail, y compris la formation des cellules de la tige de pointe, l’interaction matricielle et le commutateur glycolytique. Ces données offrent aux scientifiques des lignes directrices sur le prochain test à choisir dans leurs projets. Notre laboratoire continuera de caractériser les aspects clés des essais in vitro présentés en les comparant directement à des environnements in vivo afin de faciliter l’application des résultats in vitro aux applications cliniques.

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Mots-clés : Angiogenèse Essai de migration de plaie par égratignure Essai de germination de sphéroïde HUVEC 2D 3D Migration des cellules endothéliales Germination des cellules endothéliales Transcriptomique Immunocytochimie

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