Name: Ischémie artérielle viscérale réversible contrôlée, congestion veineuse et malperfusion combinée par laparotomie médiane chez le rat (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-07-05T14:50:00.000+00:00
Duration: 4 min 57 s
Description: Découvrez une méthode standardisée pour induire une malperfusion viscérale réversible contrôlée chez le rat par laparotomie médiane et clampage microvasculaire. Cette technique permet d'étudier l'ischémie artérielle, la congestion veineuse et leurs effets combinés sur les organes.

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Toutes les activités animales décrites ici ont été menées dans des installations accréditées et approuvées par le Comité institutionnel de protection et d’utilisation des animaux (IACUC) du Conseil régional du Bade-Wurtemberg à Karlsruhe, en Allemagne (35-9185.81/G-62/23). Les animaux d’expérimentation ont été gérés conformément aux normes institutionnelles, aux lois allemandes sur l’utilisation et le soin des animaux, aux directives du Conseil de la Communauté européenne (2010/63/UE) et aux directives ARRIVE. Des rats Sprague Dawley mâles d’un poids de 400 grammes ont été utilisés après avoir été acclimatés pendant une semaine. Les détails des réactifs et de l’équipement utilisés dans cette étude sont énumérés dans la table des matériaux.
1. Anesthésie et analgésie
<ol><li>Anesthésier le rat avec le médicament en suivant les protocoles de l’établissement. L’isoflurane est recommandé pour l’induction d’une sédation suivie d’une injection intraveineuse de 100 mg/kg de kétamine et de 4 mg/kg de xylazine en poids corporel. Une analgésie supplémentaire peut être obtenue avec une injection sous-cutanée de 5 mg/kg de carprofène de poids corporel. Pour plus de détails, veuillez vous référer à Studier-Fischer et al.13.</li>
	<li>Appliquez une pommade ophtalmique sur les yeux pour prévenir la sécheresse.</li>
	<li>Garantissez une profondeur d’analgésique appropriée à l’aide du test de pincement des orteils avec une pince chirurgicale.</li>
	<li>Réévaluez et ajustez régulièrement la profondeur de l’anesthésie pendant la chirurgie.</li>
</ol>2. Préparation de la procédure
<ol><li>Préparez la table de récurage avec tout le matériel et les instruments nécessaires, y compris les pinces microvasculaires amovibles et l’applicateur (figures 2A-C), la pince à émoussée, les ciseaux de préparation fine et les pinces.<ol><li>Préparez les crochets de préparation chirurgicale en pliant les canules à un angle de 135° à 1 cm par rapport à l’extrémité et reliez-les à des tubes de perfusion en plastique via Luer-lock, prêts à appliquer une tension à l’aide d’une pince anti-moustiques chirurgicale (Figure 2D,E).</li>
	</ol></li>
	<li>Préparez un appareil d’exposition chirurgicale pour rongeurs, y compris des tiges de fixation en forme de Y et un coussin chauffant, comme spécifié dans Studier-Fischer et al.13.</li>
	<li>Assurez-vous qu’une bonne oxygénation est obtenue en inhalant 100 % d’oxygène à l’aide d’un masque facial néonatal (figure 2F).</li>
</ol><img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67171/67171fig02.jpg"> Figure 2 : Dispositif expérimental et animal. (A) Instruments et matériaux chirurgicaux nécessaires. (B, C) Pince microvasculaire et applicateur amovibles. (D, E) Une canule pliée reliée à un tube de perfusion sert de crochet de préparation chirurgicale. (F,G) Modèle de rat oxygéné avec un masque facial et rasé. (H) Incision cutanée sur toute la longueur abdominale. (I-M) résection de la xiphoïde et hémostase. (N-Q) Mobilisation hépatique et dissection du ligament falciforme (flèche 1). (R) Application de crochets de préparation et de supports métalliques pour l’exposition des organes après laparotomie. (S) Exposition viscérale complète des principaux vaisseaux abdominaux à l’aide de crochets émoussés (flèche 2), de boucles vasculaires en silicone (flèche 3) et d’une compresse chirurgicale (flèche 4). (T,U) Aorte abdominale et veine cavale. (V) Instruments de préparation atraumatique. (W) Tampon de coton humidifié (flèche 5). (X) Compresse humidifiée à l’aide d’une pince (flèche 6) et de pinces à émoussé (flèche 7). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67171/67171fig02large.jpg" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.</a>
3. Préparation chirurgicale
<ol><li>Rasez le site d’accès chirurgical pour une laparotomie médiane (Figure 2G). Effectuez une incision cutanée sur la longueur abdominale souhaitée, c’est-à-dire environ 7 cm (Figure 2H), avancez avec la laparotomie en disséquant le fascia et cousez les crochets de préparation chirurgicale avec des tubes en plastique attachés et des pinces anti-moustiques chirurgicales à travers la peau. Exposez le situs chirurgical à l’aide des crochets de préparation chirurgicale, en appliquant une tension sur le tissu.</li>
	<li>Assurez-vous que le péritoine est disséqué crânien uniquement jusqu’à quelques millimètres sous le début du sternum, en laissant une partie du péritoine intacte. Placez une partie d’une compresse chirurgicale sous le sternum (Figure 2I) et réséquez le xiphoïde avec des ciseaux à matériau puissant. Appliquez une pression sur la zone de résection à l’aide de la compresse chirurgicale pour obtenir une hémostase suffisante de cette région bien irriguée (Figure 2I-M).</li>
	<li>Mobiliser le foie dorso-caudalement pour exposer le ligament falciforme (Figure 2N) et disséquer le ligament (Figure 2O-Q).</li>
	<li>Pour le contrôle hémostatique, en fonction de l’endroit où le clampage des principaux vaisseaux doit être effectué, effectuez une exposition viscérale complète des principaux vaisseaux abdominaux (Figure 2R) et des vaisseaux suspendus avec des boucles de vaisseaux en silicone (Figure 2S-U). Seuls des instruments de préparation atraumatique doivent être utilisés (figure 2V), tels que des tampons de coton humidifiés (figure 2W), des compresses humidifiées dans des pinces et des pinces à surplomb émoussées (figure 2X).</li>
</ol>4. Préparation et clampage de l’aorte abdominale pour l’ischémie artérielle
<ol><li>Effectuer une médialisation gauche des organes abdominaux supérieurs à l’aide d’instruments de préparation atraumatique pour accéder à l’artère surrénale gauche (Figure 3A-D).</li>
	<li>Identifiez le site pulsatoire généralement médial à l’extension crânienne de l’artère surrénale gauche, indiquant le trajet de l’aorte (Figure 3E). Avancez à travers les tissus mous à l’aide de pinces superposées pour une dissection contondante afin d’accéder à l’aorte abdominale (figures 3F, G).</li>
	<li>Creusez un tunnel dans l’aorte abdominale à l’extrémité la plus crânienne à l’aide de pinces émoussées (figure 3H-L) et élinguez l’aorte à l’aide d’une boucle vasculaire en silicone (figure 3M-T).</li>
	<li>Appliquez une pince microvasculaire d’anévrisme appropriée à l’aide de la boucle en silicone pour luxer légèrement l’aorte ventralement et guidez la pince microvasculaire d’anévrisme le long de la boucle en silicone pour garantir un clampage aortique isolé (Figure 3U). En fonction de la question de recherche, la pince microvasculaire peut être relâchée.</li>
</ol><img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67171/67171fig03.jpg"> Figure 3 : Préparation et clampage de l’aorte abdominale. (A) Exposition des organes viscéraux. (B-E) Medialisation gauche des organes abdominaux supérieurs à l’aide d’instruments de préparation atraumatique pour accéder à l’artère surrénale gauche. (F,G) Dissection contondante médiale de l’artère surrénale gauche au site pulsant (flèche grise) afin d’accéder à l’aorte abdominale. (H-L) Tunnellisation de l’aorte abdominale à l’aide de pinces émoussées. (M-T) Élingage de l’aorte à l’aide d’une boucle vasculaire en silicone. (U) Application d’une pince microvasculaire d’anévrisme amovible en utilisant la boucle en silicone comme guide. (V-Z) Visualisation de l’artère cœliaque (orange) en référence à l’aorte (rouge) et à l’anse du vaisseau en silicone. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67171/67171fig03large.jpg" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.</a>
5. Préparation et clampage de la veine cave abdominale sus-hépatique pour la congestion veineuse
<ol><li>Mobiliser le foie vers la droite à l’aide d’instruments de préparation atraumatique, disséquer nettement les ligaments hépatiques et latéraliser davantage le foie (Figure 4A-C).</li>
	<li>Ouvrez l’espace rétrohépatique au niveau de la partie gauche du diaphragme à l’aide de pinces à émoussé (Figure 4D-G).</li>
	<li>Creusez un tunnel dans la veine cave à l’aide de pinces émoussées (figure 4H-K) et élinguez la veine cave à l’aide de boucles vasculaires en silicone (figure 4L-O).</li>
	<li>Appliquer une pince microvasculaire d’anévrisme appropriée à l’aide de la boucle en silicone pour luxer légèrement la veine cave ventralement et guider la pince microvasculaire d’anévrisme le long de la boucle en silicone pour garantir un clampage isolé de la veine cave (Figure 4R).</li>
</ol><img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67171/67171fig04.jpg"> Figure 4 : Préparation et clampage de la veine cave abdominale sus-hépatique. (A) Exposition des organes viscéraux crâniens. (B) Mobilisation protectrice tissulaire du foie et dissection nette des ligaments hépatiques à l’aide d’instruments de préparation atraumatique. (C) Latéralisation du foie. (D-G) L’ouverture de l’espace rétrohépatique et la préparation au niveau des crus gauches du diaphragme. (H-K) Creusement tunnel de la veine cave (bleu) à l’aide de pinces à overholt émoussées. (De gauche à droite) Élingage de la veine cave à l’aide de boucles vasculaires en silicone. (P,Q) Exercice de la tension pour restreindre provisoirement le flux sanguin caveal. (R) Application d’une pince microvasculaire d’anévrisme amovible en utilisant la boucle en silicone comme guide. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67171/67171fig04large.jpg" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.</a>
6. Clampage de l’aorte abdominale et de la veine cave abdominale suprahépatique pour malperfusion combinée
<ol><li>Effectuez les étapes ci-dessus jusqu’à ce que l’aorte et la veine cave soient suspendues avec des boucles de vaisseau en silicone. Passez à l’application de la pince microvasculaire d’anévrisme pour les deux vaisseaux, à nouveau en utilisant la boucle en silicone pour le guidage. Il est recommandé de serrer d’abord l’aorte et de minimiser le temps nécessaire jusqu’au serrage ultérieur de la cavité à seulement quelques secondes. REMARQUE : Selon le scénario souhaité et l’objectif de la recherche, la malperfusion peut être poursuivie ou libérée après une période de temps définie, et les animaux peuvent soit être euthanasiés par cardectomie tranchante (selon les protocoles approuvés par l’institution) pour des applications non de survie, soit recevoir une fermeture abdominale progressive à l’aide de sutures chirurgicales en cas de suivis planifiés et d’expériences de survie. Pour la présente étude, les animaux ont été euthanasiés.</li>
</ol>

<meta charset="utf8"></head><body>Modèle de rat pour les études de malperfusion d’organes viscéraux

<ol><li>Carden, D. L., Granger, D. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathophysiology+of+ischemia-reperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pathol%22%5BJournal%5D)">Pathophysiology of ischemia-reperfusion injury.</a> J Pathol. 190 (3), 255-266 (2000).</li>
<li>Balkwill, F., Mantovani, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inflammation+and+cancer%3A+Back+to+Virchow%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Inflammation and cancer: Back to Virchow.</a> Lancet. 357 (9255), 539-545 (2001).</li>
<li>Cruz, R. J., Garrido, A. G., Ribeiro, C. M., Harada, T., Rocha-E-Silva, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regional+blood+flow+distribution+and+oxygen+metabolism+during+mesenteric+ischemia+and+congestion%5BTitle%5D)+AND+%22J+Surg+Res%22%5BJournal%5D)">Regional blood flow distribution and oxygen metabolism during mesenteric ischemia and congestion.</a> J Surg Res. 161 (1), 54-61 (2010).</li>
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<li>Napp, L. C., Kühn, C., Bauersachs, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ECMO+in+cardiac+arrest+and+cardiogenic%5BTitle%5D)+AND+%22Herz%22%5BJournal%5D)">ECMO in cardiac arrest and cardiogenic.</a> Herz. 42 (1), 27-44 (2017).</li>
<li>Sousa Da Silva, R. X., Weber, A., Dutkowski, P., Clavien, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Machine+perfusion+in+liver+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatology%22%5BJournal%5D)">Machine perfusion in liver transplantation.</a> Hepatology. 76 (5), 1531-1549 (2022).</li>
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<li>Lu, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intramuscular+microvascular+flow+sensing+for+flap+monitoring+in+a+porcine+model+of+arterial+and+venous+occlusion%5BTitle%5D)+AND+%22J+Reconstr+Microsurg%22%5BJournal%5D)">Intramuscular microvascular flow sensing for flap monitoring in a porcine model of arterial and venous occlusion.</a> J Reconstr Microsurg. 39 (3), 231-237 (2023).</li>
<li>Nguyen, G. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+biomarkers+of+arterial+and+venous+ischemia+in+microvascular+flaps%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Novel biomarkers of arterial and venous ischemia in microvascular flaps.</a> PLoS One. 8 (8), e71628(2013).</li>
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<li>Criqui, M. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lower+extremity+peripheral+artery+disease%3A+Contemporary+epidemiology%2C+management+gaps%2C+and+future+directions%3A+A+scientific+statement+from+the+American+Heart+Association%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Lower extremity peripheral artery disease: Contemporary epidemiology, management gaps, and future directions: A scientific statement from the American Heart Association.</a> Circulation. 144 (9), e171-e191 (2021).</li>
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<li>Chang, M. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sitagliptin+protects+rat+kidneys+from+acute+ischemia-reperfusion+injury+via+upregulation+of+GLP-1+and+GLP-1+receptors%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Pharmacol+Sin%22%5BJournal%5D)">Sitagliptin protects rat kidneys from acute ischemia-reperfusion injury via upregulation of GLP-1 and GLP-1 receptors.</a> Acta Pharmacol Sin. 36 (1), 119-130 (2015).</li>
<li>Boys, J. A., Toledo, A. H., Anaya-Prado, R., Lopez-Neblina, F., Toledo-Pereyra, L. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+dantrolene+on+ischemia-reperfusion+injury+in+animal+models%3A+A+review+of+outcomes+in+heart%2C+brain%2C+liver%2C+and+kidney%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Investig+Med%22%5BJournal%5D)">Effects of dantrolene on ischemia-reperfusion injury in animal models: A review of outcomes in heart, brain, liver, and kidney.</a> J. Investig Med. 58 (7), 875-882 (2010).</li>
<li>Orihashi, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mesenteric+ischemia+in+acute+aortic+dissection%5BTitle%5D)+AND+%22Surg+Today%22%5BJournal%5D)">Mesenteric ischemia in acute aortic dissection.</a> Surg Today. 46 (5), 509-516 (2016).</li>
<li>Byard, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+mesenteric+ischemia+and+unexpected+death%5BTitle%5D)+AND+%22J+Forensic+Leg+Med%22%5BJournal%5D)">Acute mesenteric ischemia and unexpected death.</a> J Forensic Leg Med. 19 (4), 185-190 (2012).</li>
<li>Łagosz, P., Sokolski, M., Biegus, J., Tycinska, A., Zymlinski, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Elevated+intra-abdominal+pressure%3A+A+review+of+current+knowledge%5BTitle%5D)+AND+%22World+J+Clin+Cases%22%5BJournal%5D)">Elevated intra-abdominal pressure: A review of current knowledge.</a> World J Clin Cases. 10 (10), 3005-3013 (2022).</li>
</ol>

Bien que les implications de la privation de perfusion tissulaire sous la forme de malperfusions tissulaires locales ou systémiques soient reconnues depuis longtemps, elles persistent comme l’une des principales causes de morbidité et de mortalité aux États-Unis et en Europe1. Ces conditions de malperfusion sont la troisième cause de dégradation des tissus, après la malignité et l’inflammation septique, mais ont un spectre d’origines beaucoup plus large par rapport aux deux dernières2.
Ce spectre s’étend de mécanismes locaux tels que la fibrillation auriculaire avec occlusion thromboembolique, la vasoconstriction et la dissection iatrogène ou traumatique, à des mécanismes systémiques tels que l’insuffisance ou le choc cardiaque, la septicémie, l’hypovolémie et les phénomènes de vol. Ces divers mécanismes sous-tendent une variété de conditions médicales et chirurgicales. La morbidité et la mortalité importantes associées à ces affections ont orienté l’attention médicale vers les procédures visant à rétablir le flux sanguin vers les tissus malperfusés afin de prévenir la nécrose et de restaurer la fonction des organes au cours des décennies3.
Cet effort de recherche a abouti à une variété de solutions pharmaceutiques, médicales et chirurgicales pour restaurer la perfusion physiologique des organes, y compris des progrès dans la chirurgie de pontage4, les procédures endovasculaires5, l’oxygénation par membrane extracorporelle 6,7, la perfusion de machines d’organes lors de la transplantation8 et les substituts sanguins artificiels9.
Pourtant, malgré ces développements significatifs, la malperfusion, en particulier des organes viscéraux, reste un problème pressant dans les soins aux patients, et la demande de recherches supplémentaires sur les processus biomédicaux et les stratégies de sauvetage est élevée. Des modèles biologiques valides sont de la plus haute importance pour permettre ce type de recherche. En raison des aspects multifactoriels de la recherche sur la perfusion tissulaire, qui incluent non seulement la biologie cellulaire, mais aussi la microanatomie vasculaire et la rhéologie, un modèle approprié nécessite un degré de complexité biologique que seul un organisme modèle complet peut fournir, ce qui fait des rongeurs le modèle de choix évident.
La malperfusion tissulaire peut être différenciée en trois conditions distinctes : l’ischémie artérielle isolée, la congestion veineuse isolée et la malperfusion combinée10. Les scénarios cliniquement pertinents pour ces affections comprennent (1) l’ischémie artérielle : fibrillation auriculaire avec occlusion thromboembolique, embolie septique, vasoconstriction, dissection ou clampage vasculaire iatrogène ou traumatique, insuffisance ou choc cardiaque, dissection aortique, septicémie et hypovolémie, obstruction artérielle extrême due à une constriction externe, embolie artérielle pulmonaire, maladies oculaires artérielles chroniques ou phénomènes de vol ; (2) Congestion veineuse : dissection ou clampage vasculaire iatrogène ou traumatique, insuffisance cardiaque, fibrose hépatique ou cirrhose, obstruction veineuse due à une constriction externe, thrombose veineuse, insuffisance veineuse et syndrome de Budd-Chiari ; (3) Malperfusion combinée : Combinaisons des affections ci-dessus et des stades avancés des affections susmentionnées, telles que la congestion veineuse secondaire due à une fibrose induite par l’ischémie ou l’ischémie artérielle secondaire due à la rétention induite par la congestion, ainsi que des affections organiques spécifiques comme l’inflammation ischémique (par exemple, la colite ischémique)11,12.
Cet article vise donc à fournir un modèle étape par étape pour induire une ischémie artérielle viscérale contrôlée et réversible, une congestion veineuse et une malperfusion combinée par laparotomie médiane chez le rat pour des applications de survie et de non-survie, comme illustré à la figure 1. Le modèle expérimental offre un environnement contrôlé pour l’étude de la dynamique multidimensionnelle de l’ischémie artérielle, de la congestion veineuse et de leurs séquelles combinées, imitant des scénarios cliniquement pertinents rencontrés dans diverses conditions.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67171/67171fig01.jpg"> Figure 1 : Vue d’ensemble du protocole. Représentation schématique de l’anatomie vasculaire du rat et représentation du site de serrage (flèche grise). (A) Perfusion physiologique. (B) Ischémie artérielle. (C) la congestion veineuse. (D) Malperfusion combinée. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67171/67171fig01large.jpg" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.</a>

<table><tbody><tr><td>Pince de préparation atraumatique</td><td>Aesculap</td><td>FB395R</td><td>DE BAKEY ATRAUMATA pince atraumatique, droite</td></tr><tr><td>Pince de fixation</td><td>Aesculap</td><td>BJ012R</td><td>Baby-Mixer Pince de préparation et de ligature, coudée, 180 mm</td></tr><tr><td>Canule</td><td>BD (Beckton, Dickinson)</td><td>301300</td><td>BD Microlance 3 canule 20 G</td></tr><tr><td>Tiges de fixation</td><td>legefirm</td><td>500343896</td><td>diapasons utilisés comme tiges de fixation métalliques en forme de Y</td></tr><tr><td>Coussin chauffant</td><td>Royal Gardineer</td><td>IP67</td><td>Royal Gardineer Coussin chauffant Taille S, 20 Watt</td></tr><tr><td>Tube perfuseur en plastique</td><td>M. Schilling GmbH</td><td>S702NC150</td><td>tube de raccordement COEX 150 cm</td></tr><tr><td>Attache de boucle de cuve en silicone</td><td>SERAG WIESSNER</td><td>SL26</td><td>attache de boucle de cuve en silicone 2,5 mm rouge</td></tr><tr><td>Spraque Dawley rat</td><td>Janvier Labs</td><td>RN-SD-M</td><td>Spraque Dawley rat</td></tr><tr><td>Plaque d’acier</td><td>Maschinenbau Feld GmbH</td><td>C010206</td><td>Plaque en tôle galvanisée, 40 x 50 cm, épaisseur 4,0 mm</td></tr><tr><td>Yasargil clip</td><td>Aesculap</td><td>FE795K</td><td>YASARGIL Aneurysm Clip System Phynox Temporary (Standard)</td></tr><tr><td>Yasargil Clip Applicateur de clip</td><td>Aesculap</td><td>FE558K</td><td>YASARGIL Aneurysm Clip Applicator Phynox (Standard)</td></tr></tbody></table>

ischémie artérielle viscérale réversible contrôlée, congestion veineuse et malperfusion combinée par laparotomie médiane chez le rat

Controlled Reversible Visceral Arterial Ischemia, Venous Congestion and Combined Malperfusion via Midline Laparotomy in Rats

Ce protocole a été réalisé chez 10 rats mâles (poids moyen 403 g ± 26 g) dans un contexte de non-survie. Le taux de réussite a été défini par la survie plus de 20 minutes après le clampage artériel, le clampage veineux et le clampage combiné pendant 5 min avec 10 min de reperfusion, chacun étant de 100 %. La durée moyenne de la préparation, de l’incision cutanée jusqu’à ce que les deux vaisseaux soient suspendus avec des boucles en silicone, était de 11 min 45 s ± 3 min 23 s.
Pour valider les 4 états de malperfusion différents, les paramètres d’indice d’oxygénation (StO2) et de perfusion (NIR) ont été mesurés à l’aide de l’imagerie hyperspectrale (HSI) sur 5 organes viscéraux (Figure 5).
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67171/67171fig05.jpg"> Figure 5 : Validation du modèle de malperfusion. (A,B) Quantification des valeurs d’oxygénation et de perfusion HSI à travers quatre états de perfusion différents et cinq organes viscéraux différents avec n = 10 animaux. (C-F) Images d’index RVB et à code couleur des enregistrements HSI contenant des organes viscéraux dans 4 états de perfusion différents. Les barres d’erreur indiquent l’écart-type. La barre d’échelle représente 5 cm. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67171/67171fig05large.jpg" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.</a>
Les valeurs ont été fournies en unités arbitraires et ont montré une diminution significative des états de malperfusion par rapport à l’état physiologique des organes (tableau 1). Les résultats hyperspectraux étaient conformes aux publications récentes indiquant que la viabilité et la perfusion des tissus peuvent être évaluées à l’aide de valeurs seuils HSI StO2 spécifiques à un organe qui correspondaient aux valeurs observées dans cette étude14,15. De manière exemplaire pour l’estomac, il s’agissait de 64,1 % (±9,4 %) pour la perfusion physiologique, 43,1 % (±7,4 %) pour l’ischémie artérielle, 40,5 % (±5,4 %) pour la congestion veineuse et 39,3 % (±4,5 %) pour la malperfusion combinée.
Comme il s’agissait d’expériences de non-survie, il n’existe pas de données expérimentales sur les résultats à long terme des animaux. Cependant, d’autres études rapportent une survie de 100% et 57% sur 24 heures pour des rats qui ont subi 30 minutes et 60 minutes de clampage supérieur de l’artère mésentérique16,17 et l’ont corrélé avec succès avec les niveaux sériques de Heat Shock Protein 70. Par conséquent, il pourrait s’agir d’une méthode possible pour évaluer les résultats dans les futures études de survie en fonction de différents temps de serrage.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td>paramètre</td>
			<td>organe</td>
			<td>ligne de base</td>
			<td>ischémie artérielle</td>
			<td>congestion veineuse</td>
			<td>Malperfusion combinée</td>
		</tr><tr><td rowspan="5">StO2</td>
			<td>estomac</td>
			<td>64,1 % (±9,4 %)</td>
			<td>43,1 % (±7,4 %)</td>
			<td>40,5 % (±5,4 %)</td>
			<td>39,3 % (±4,5 %)</td>
		</tr><tr><td>intestin grêle</td>
			<td>78,4 % (±5,1 %)</td>
			<td>44,8 % (±5,5 %)</td>
			<td>38,0 % (±7,9 %)</td>
			<td>41,9 % (±6,9 %)</td>
		</tr><tr><td>côlon</td>
			<td>74,6 % (±5,0 %)</td>
			<td>56,0 % (±6,3 %)</td>
			<td>51,3 % (±4,1 %)</td>
			<td>51,8 % (±2,9 %)</td>
		</tr><tr><td>foie</td>
			<td>39,5 % (±9,7 %)</td>
			<td>16,9 % (±2,6 %)</td>
			<td>9,5 % (±0,8 %)</td>
			<td>9,3 % (±1,1 %)</td>
		</tr><tr><td>rein</td>
			<td>71,0 % (±3,8 %)</td>
			<td>26,3 % (±3,0 %)</td>
			<td>18,6 % (±2,5 %)</td>
			<td>21,2 % (±2,6 %)</td>
		</tr><tr><td rowspan="5">NIR</td>
			<td>estomac</td>
			<td>20,0 % (±9,3 %)</td>
			<td>8,3 % (±6,7 %)</td>
			<td>6,8 % (±5,1 %)</td>
			<td>7,5 % (±8,1 %)</td>
		</tr><tr><td>intestin grêle</td>
			<td>38,6 % (±17,4 %)</td>
			<td>12,9 % (±11,0 %)</td>
			<td>6,3 % (±6,5 %)</td>
			<td>5,7 % (±5,9 %)</td>
		</tr><tr><td>côlon</td>
			<td>12,6 % (±13,7 %)</td>
			<td>5,3 % (±8,7 %)</td>
			<td>3,8 % (±7,5 %)</td>
			<td>2,6 % (±4,7 %)</td>
		</tr><tr><td>foie</td>
			<td>40,4 % (±13,1 %)</td>
			<td>0,3 % (±0,7 %)</td>
			<td>0,0 % (±0,1 %)</td>
			<td>0,0 % (±0,0 %)</td>
		</tr><tr><td>rein</td>
			<td>10,4 % (±5,2 %)</td>
			<td>0,0 % (±0,0 %)</td>
			<td>0,0 % (±0,1 %)</td>
			<td>0,0 % (±0,0 %)</td>
		</tr></tbody></table>Tableau 1 : Paramètres tissulaires. Valeurs d’oxygénation et de perfusion NIR de HIS StO2 en unités arbitraires dans 5 organes viscéraux et 4 états de perfusion différents.

Ischémie artérielle viscérale réversible contrôlée, congestion veineuse et malperfusion combinée par laparotomie médiane chez le rat

Besides sepsis and malignancy, malperfusion is the third leading cause of tissue degradation and a major pathomechanism for various medical and surgical ...

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Ischémie artérielle viscérale réversible contrôlée, congestion veineuse et malperfusion combinée par laparotomie médiane chez le rat (Vidéo) | JoVE Journal

Ischémie artérielle viscérale réversible contrôlée, congestion veineuse et malperfusion combinée par laparotomie médiane chez le rat

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