Name: 5/6 Néphrectomie par bipolectomie aiguë par laparotomie médiane chez le rat (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-04-04T13:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 34 s
Description: Apprenez la néphrectomie partielle 5/6 par bipolectomie aiguë chez le rat via laparotomie médiane. Ce protocole standardisé permet d'induire une insuffisance rénale contrôlée pour la recherche en néphrologie.

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Toutes les procédures relatives aux animaux décrites dans ce document ont été effectuées dans des installations accréditées et ont reçu l’approbation du comité institutionnel de soin et d’utilisation des animaux (IACUC) du Conseil régional du Bade-Wurtemberg à Karlsruhe, en Allemagne (35-9185.81/G-62/23). Les animaux de laboratoire ont été manipulés conformément aux protocoles institutionnels et à la législation allemande régissant le bien-être animal, ainsi qu’aux directives établies par le Conseil de la Communauté européenne (2010/63/UE) et aux directives ARRIVE. Des rats Sprague Dawley mâles d’un poids initial de 400 g ont été utilisés après une période d’acclimatation d’une semaine.
1. Anesthésie et analgésie
<ol>
	<li>Narcotiser le modèle du rat avec les produits pharmaceutiques de son choix. Pour suivre ce protocole, effectuez l’induction volatile de la sédation avec de l’isoflurane suivie d’une injection intrapéritonéale de 100 mg/kg de kétamine en poids corporel pour l’anesthésie dissociative et de 4 mg/kg de xylazine en poids corporel. Obtenir une analgésie avec des injections sous-cutanées de 5 mg/kg de poids corporel de carprofène. REMARQUE : Un protocole détaillé se trouve dans la littérature citée25.</li>
	<li>Assurez-vous d’une profondeur d’analgésique adéquate en recherchant les réflexes de douleur lors du test de pincement des orteils avec une pince chirurgicale et réévaluez régulièrement la profondeur de l’anesthésie pendant la procédure.</li>
	<li>Appliquez un lubrifiant ophtalmique sur les yeux pour prévenir la dessiccation de la cornée.</li>
</ol>
2. Préparation de la procédure
<ol>
	<li>Préparez le site d’opération avec tout le matériel et les instruments nécessaires, y compris des ligatures en polyfilament, des boucles de récipient en silicone, des pinces à émoussée, des ciseaux et des pinces à préparation fine, ainsi que des patchs hémostatiques coupés en morceaux de 0,8 x 0,6 cm (Figure 1A-G). Préparez l’appareil d’exposition chirurgicale des rongeurs, un coussin chauffant et les crochets de préparation chirurgicale comme spécifié dans la littérature citée25.</li>
	<li>Rasez la longueur de l’accès souhaité, désinfectez le site chirurgical en alternant trois gommages avec des écouvillons à base d’éthanol à 70 % et d’iode ou à base de chlorhexidine dans un mouvement circulaire, et obtenez une oxygénation adéquate par l’inhalation d’oxygène à 100 % à l’aide d’un masque facial néonatal (Figure 1H-J). Couvrez le reste du corps à l’extérieur du lieu chirurgical avec des champs pour éviter la contamination. REMARQUE : L’animal représentatif qui a été utilisé pour obtenir des images de figures n’a pas été drapé afin de permettre une meilleure visualisation des points de repère anatomiques.</li>
	<li>Effectuez une mini-laparotomie médiane via une incision cutanée médiane initiale sur la longueur abdominale souhaitée de ~3 cm et une incision ultérieure légèrement plus petite du fascia le long de la linea alba (Figure 1K-M).</li>
	<li>Réaliser l’exposition chirurgicale du rein à l’aide de compresses chirurgicales et de crochets de préparation chirurgicale (Figure 1N-O). Ne touchez le parenchyme rénal qu’à l’aide d’instruments de préparation atraumatiques tels qu’un coton-tige humidifié ou une compresse humidifiée à l’aide de pinces ou de pinces émoussées.</li>
</ol>
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67322/67322fig01.jpg"> 
Figure 1 : Instruments, matériaux et configuration expérimentaux. (A) Instruments chirurgicaux requis ; (B) ligature polyfilament ; (C) boucle de récipient en silicone ; (D) ciseaux de préparation fine. (E-G) Patch hémostatique coupé en morceaux de 0,8 x 0,6 cm. (H-J) Modèle de rat rasé et oxygéné avec un masque facial. L’animal représentatif qui a été utilisé pour obtenir des images de figures n’a pas été drapé afin de permettre une meilleure visualisation des points de repère anatomiques. (K,L) Incision cutanée médiane sur la longueur abdominale souhaitée de ~3 cm. (M) Mini-laparotomie médiane ; (N) l’exposition du rein gauche à l’aide d’une compresse chirurgicale, de crochets de préparation chirurgicale et d’un support métallique ; (O) exposition analogue du rein droit et résection du fascia de Gerota. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67322/67322fig01large.jpg" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.</a>
3. Néphrectomie partielle
<ol>
	<li>Exposez le rein respectif, saisissez la graisse périrénale qui est attachée au mince fascia de Gerota, et appliquez une certaine tension pour soulever localement le fascia du parenchyme rénal (Figure 2A, B.2).</li>
	<li>Inciser et saper le fascia avec l’extrémité pointue d’un bord de ciseau et continuer avec une dissection longitudinale du fascia de Gerota (Figure 2B).</li>
	<li>Effectuez un dégantage émoussé du fascia de Gerota à l’aide de ciseaux fermés en sapant progressivement le fascia tout autour du parenchyme et en pliant la capsule fasciale médialement-éventuellement en la réséquant partiellement (Figure 2C).</li>
	<li>Élaguer le hile rénal à l’aide d’une boucle vasculaire en silicone pour un meilleur contrôle vasculaire (figure 2D).</li>
	<li>Placez l’extrémité de la pince dans l’espace rétropéritonéal pour stabiliser le rein afin d’éviter une fuite dorsale du rein pendant le processus de coupe et effectuez la polectomie rénale 1/3 tranchante crânienne en un seul coup précis et ciblé à l’aide de ciseaux (Figure 2E). REMARQUE : La ligne de dissection doit être choisie par l’évaluation clinique de manière à séparer l’organe en 1/3 de la hauteur de l’organe crânienne et caudale.</li>
	<li>Réaliser l’hémostase en appliquant un timbre hémostatique, par compression manuelle, par compression à l’aide d’instruments contondants ou par tension hilaire via la boucle du vaisseau en silicone, réduisant efficacement le flux sanguin hilaire (Figure 2F-J). REMARQUE : L’hémostase a été obtenue régulièrement en tirant simultanément sur l’anse vasculaire et en appliquant le patch hémostatique pendant 2,5 à 3 minutes.</li>
	<li>Poursuivre avec une polectomie rénale 1/3 caudale aiguë de manière analogue (Figure 2K-N). Pour les deux coups de ciseaux, visez un plan de dissection légèrement angulé qui laissera plus de parenchyme rénal du côté hilaire et moins de tissu du côté latéral pour éviter les lésions hilaraires involontaires et réduire les fuites urinaires du système pelvico-calicéal (Figure 2O). Si une standardisation plus élevée de la résection précise du parenchyme 5/6 est souhaitée, pesez la résection de la néphrectomie totale du côté controlatéral décrite ci-dessous, pesez les réséquates de la néphrectomie partielle 2/3 et répétez la dissection dans une technique de « salami-tranchage » jusqu’à ce que exactement les 2/3 du poids soient obtenus.</li>
</ol>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67322/67322fig02.jpg"> 
Figure 2 : Néphrectomie partielle. (A) Exposition chirurgicale d’un rein. (B) Incision longitudinale du fascia de Gerota à l’aide de ciseaux tranchants. (C) Dégantage émoussé de l’aponévrose de Gerota à l’aide de ciseaux fermés. (D) Élingage du hile rénal à l’aide d’une boucle vasculaire en silicone. (E) Polectomie crânienne aiguë 1/3 à l’aide de ciseaux et de pinces comme guide. (F) Réalisation de l’hémostase par l’application d’un patch hémostatique ; (G) réalisation de l’hémostase par compression manuelle ; (H-J) réalisation de l’hémostase par compression à l’aide d’instruments contondants et tension hilaraire via la boucle du vaisseau en silicone. (K-N) Polectomie caudale aiguë 1/3 par analogie. (O) Représentation schématique des plans de dissection recommandés pour éviter les lésions hilaires involontaires (lignes noires). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67322/67322fig02large.jpg" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.</a>
4. Néphrectomie totale
<ol>
	<li>Mobilisez le rein par analogie avec les étapes décrites ci-dessus et creusez le hile rénal à l’aide de pinces émoussées (Figure 3A,B).</li>
	<li>Élinguez le hile rénal à l’aide d’une ligature de polyfilaments et placez un nœud coulissant sécurisé sur le hile rénal plutôt près des vaisseaux abdominaux pour obstruer le flux sanguin rénal et l’uretère (Figure 3C, D).</li>
	<li>Disséquez brusquement le hile à l’aide de ciseaux et retirez le rein (Figure 3E,F).</li>
	<li>Contrôler l’hémostase et couper les extrémités de la ligature (Figure 3G-J).</li>
</ol>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67322/67322fig03.jpg"> 
Figure 3 : Néphrectomie totale. (A) Exposition chirurgicale du rein controlatéral ; (B) ablation analogue de l’aponévrose de Gerota et creusement d’un tunnel du hile rénal à l’aide de pinces à émoussé ; (C) élingage du hile à l’aide d’une ligature de polyfilaments. (D) Mise en place d’une ligature à nœud coulissant sur le hile rénal ; (E,F) dissection brusque du hile à l’aide de ciseaux et ablation du rein ; (G-I) contrôle de l’hémostase et de la coupe des extrémités de la ligature. (J) Représentation schématique de la hauteur de ligature recommandée (ligne pointillée) et du plan de dissection (ligne noire). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67322/67322fig03large.jpg" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.</a>
5. Fermeture de la paroi abdominale
<ol>
	<li>Placez une suture d’angle sur le fascia abdominal à l’aide d’une suture en polyfilament (Figure 4A-D).</li>
	<li>Continuez à suturer le fascia abdominal avec une suture courante avec ~2 mm de tissu saisi à chaque morsure et environ 4 mm entre les morsures (Figure 4E-I).</li>
	<li>Suturez la couche cutanée à l’aide de points simples avec ~3 mm de tissu saisi à chaque morsure et ~6 mm entre les morsures (Figure 4J-Q).</li>
</ol>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67322/67322fig04.jpg"> 
Figure 4 : Fermeture de la paroi abdominale. (A-D) Mise en place d’une suture d’angle sur le fascia abdominal à l’aide d’une suture en polyfilament. (E-I) Suture courante du fascia abdominal ; (J-Q) suture de la couche cutanée à l’aide de points simples. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67322/67322fig04large.jpg" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.</a>
6. Autres étapes
<ol>
	<li>En fonction du scénario souhaité, de l’objectif de la recherche et du degré d’insuffisance rénale souhaité, envisagez des écarts par rapport à ce protocole, y compris une variation de la quantité de parenchyme rénal réséqué, par exemple, néphrectomie totale unilatérale (néphrectomie 3/6), néphrectomie totale bilatérale (néphrectomie 6/6), monopolectomie unilatérale (néphrectomie 1/6), monopolectomie bilatérale (néphrectomie 2/6), bipolectomie unilatérale (néphrectomie 2/6) et bipolectomie bilatérale (néphrectomie 4/6).</li>
	<li>En général, soit euthanasier les animaux par cardicectomie tranchante sans fermeture préalable de la paroi abdominale pour les applications non de survie, soit effectuer une fermeture abdominale par étapes comme décrit ci-dessus dans le cas d’expériences de survie planifiées avec suivis.</li>
	<li>Dans le cas d’applications de survie, maintenez des conditions stériles à tout moment pendant la chirurgie. Avant l’opération, préparez aseptiquement la peau au site chirurgical à l’aide d’un gommage (à base d’iode ou de chlorhexidine) et d’alcool. Utilisez un emballage d’instruments autoclaves frais pour chaque animal.</li>
	<li>Après l’opération, surveillez l’animal jusqu’à ce qu’il soit suffisamment conscient pour maintenir le décubitus sternal et isolez-le jusqu’à ce qu’il soit complètement rétabli.</li>
	<li>En tant que traitement postchirurgical de l’animal, inclure des visites quotidiennes par le personnel médical ainsi que le traitement postopératoire de la douleur par injections sous-cutanées de 5 mg/kg de carprofène de poids corporel 2 fois par jour pendant 2 jours.</li>
	<li>Utilisez des feuilles de score avec des critères d’interruption clairement définis pour la durée jusqu’à la récupération postopératoire complète. Utilisez l’échelle de grimace du rat26 ou le score d’état corporel27 de la littérature citée. Terminez l’expérience si le score de grimace ≥ de 6 ou un score d’état corporel = 1 après l’application de carprofène. De plus, mettez fin à la grossesse en cas de complication chirurgicale telle qu’une infection postopératoire de la plaie ou une insuffisance de fermeture de la paroi abdominale.</li>
</ol>

<meta charset="utf8"></head><body>Néphrectomie normalisée 5/6 chez le rat pour l’insuffisance rénale et la malperfusion

<ol><li>Kovesdy, C. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epidemiology+of+chronic+kidney+disease%3A+An+update+2022%5BTitle%5D)+AND+%22Kidney+Int+Suppl+%282011%29%22%5BJournal%5D)">Epidemiology of chronic kidney disease: An update 2022.</a> Kidney Int Suppl (2011). 12 (1), 7-11 (2022).</li>
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</ol>

<table><tbody><tr><td>pince de préparation atraumatique</td><td>Aesculap</td><td>FB395R</td><td>DE BAKEY ATRAUMATA pince atraumatique, droite</td></tr><tr><td>émoussée Pince</td> de préparation et de ligature <td>Aesculap</td><td>BJ012R</td><td>BABY-MIXER, COUDÉE</td></tr><tr><td>, canule</td> de 180 mm <td>BD (Beckton, Dickinson)</td><td>301300</td><td>BD Microlance 3 canule 20 G</td></tr><tr><td>tiges de fixation</td><td>legefirm</td><td>&lrm ; 500343896</td><td>diapasons utilisés comme tiges de fixation métalliques en forme de Y</td></tr><tr><td>coussin chauffant</td><td>Royal Gardineer</td><td>IP67</td><td>Royal Gardineer Coussin chauffant Taille S,</td></tr><tr><td>tube perfuseur en plastique</td> 20 watts <td>M. Schilling GmbH</td><td>S702NC150</td><td>tube de raccordement COEX 150 cm</td></tr><tr><td>polyfilament</td><td>suture Covidien</td><td>CL-769</td><td>Covidien Polysorb Suture résorbable tressée 2-0 75 cm</td></tr><tr><td>ciseaux</td> <td>de préparationCiseaux de préparation Aesculap</td><td>BC177R</td><td>JAMESON, courbés, modèle fin, émoussé/émoussé, 150 mm (6")</td></tr><tr><td>Patch d’étanchéité hémostatique</td><td>Baxter</td><td>1506257</td><td>Hemopatch Étanchéité Hemopatch Baxter 45 x 90 mm</td></tr><tr><td>attache de boucle de récipient en silicone</td><td>SERAG WIESSNER</td><td>SL26</td><td>attache de boucle de récipient 2,5 mm rouge</td></tr><tr><td>Spraque Dawley rat</td><td>Janvier Labs</td><td>RN-SD-M</td><td>Spraque Dawley rat</td></tr><tr><td>steel plaque</td><td>Maschinenbau Feld GmbH</td><td>C010206</td><td>Plaque en tôle galvanisée, 40 x 50 cm, épaisseur 4,0 mm</td></tr><tr><td>Yasargil clip</td><td>Aesculap</td><td>FE795K</td><td>YASARGIL Aneurysm Clip System Phynox Temporary (Standard)</td></tr><tr><td>Yasargil clip Applicateur</td><td>Aesculap</td><td>FE558K</td><td>YASARGIL Aneurysm Clip Applicator Phynox (Standard)</td></tr></tbody></table>

5/6 néphrectomie par bipolectomie aiguë par laparotomie médiane chez le rat

5/6 Nephrectomy Using Sharp Bipolectomy Via Midline Laparotomy in Rats

Ce protocole a été réalisé chez 10 rats mâles (poids moyen 398 ± 35 g) dans un contexte de non-survie et l’intervention a été réalisée par un résident en chirurgie de troisième année. Le taux de réussite défini par la survie plus de 20 minutes après la fermeture de la paroi abdominale était de 100 %. La durée moyenne de la préparation, de l’incision cutanée à la fermeture de la peau, était de 18 min 34 s ± 7 min 31 s.
Malheureusement, en raison de la nature non survivante de ce manuscrit, il n...

5/6 Néphrectomie par bipolectomie aiguë par laparotomie médiane chez le rat

Chronic kidney disease (CKD) affects over 10% of the global population, amounting to more than 800 million individuals worldwide. The advances in the ...

56-nephrectomy-using-sharp-bipolectomy-via-midline-laparotomy-in-rats

Research

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JoVE Journal

Medicine

Médecine

Une méthode en deux étapes pour établir l'insuffisance rénale chronique (IRC) chez le rat Lewis par l'ablation chirurgicale 5/6e de la masse rénale est décrite. Combinaison de la procédure chirurgicale, NOS-inhibition et une alimentation riche en sel conduit à un modèle ressemblant CKD humaine, permettant l'étude des mécanismes et le développement de nouvelles interventions thérapeutiques causales.

5/6e néphrectomie en association avec High Salt Diet Nitric Oxide Synthase et inhibition pour provoquer la maladie rénale chronique chez le rat Lewis

L'administration de médicaments pour la récupération de la fonction rénale nécessite un contrôle de la localisation et la distribution du composé thérapeutique. Ici, nous décrivons en détail une technique simple pour la livraison intrarenal de médicaments chez les rats. Cette procédure peut être facilement réalisée sans la mortalité et une reproductibilité élevée.

Livraison intravasculaire de produits biologiques du rein de rat

Ce manuscrit fournit une intervention chirurgicale en deux étapes détaillées pour effectuer la néphrectomie partielleth 5/6 de la souris (PNx) avec ligature du pôle. Quatre semaines après la chirurgie, par rapport aux souris opérés, les souris PNx développé la fibrose cardiaque, hypertrophie cardiaque, anémie, insuffisance rénale et une diminution de la fonction cardiaque systolique et diastolique.

Un modèle de néphrectomie souris 5/6ème qui induit la cardiomyopathie et urémique expérimentale

Induction rapide hypertrophie du foie par une hépatectomie Staged associant la Partition de foie et de la ligature de la veine porte (ALPPS) a été proposé pour la résection de tumeurs hépatiques résécables borderline. Ce modèle peut élucider les mécanismes impliqués dans l’hypertrophie rapide et permet de tester des médicaments qui favorisent ou bloquent l’accélération de la régénération.

Modèle de rat de la Partition du foie associant et la ligature de la veine porte pour la procédure de mise en scène une hépatectomie (ALPPS)

Cet article présente la méthode pour le placement chirurgical chez les souris d’un cathéter intrapéritonéal attaché à un port d’accès qui est placé à l’arrière de l’animal. En outre, il explique la procédure pour une néphrectomie 5/6 ressembler à l’État et urémique de patients Parkinsoniens.

Techniques chirurgicales pour le Placement de cathéter et néphrectomie 5/6 dans les modèles murins de la dialyse péritonéale

Tissulaire rénales constructions offrent une solution pour la pénurie d’organes et les effets délétères de la dialyse. Nous décrivons ici un protocole se rapportant au micro disséquer les reins murins pour l’isolement des segments cortico-médullaire. Ces segments sont implantés dans des constructions cellulaires exempte d’échafaudage, formant organoïdes rénale.

Microdissection de tissu rénal primaire Segments et intégration avec la technologie de nouvelle construction exempte d’échafaudage

Le but de ce manuscrit et protocole est d’expliquer et de démontrer en détail la procédure chirurgicale de transplantation rénale orthotopique chez le rat. Cette méthode est simplifiée pour obtenir la perfusion correcte du rein donneur et raccourcir le temps de reperfusion en utilisant la technique de l’anastomose du brassard veineux et urétral.

Greffe orthotopique de rein de rat: une approche chirurgicale nouvelle et simplifiée

Cet article fournit des instructions détaillées pour permettre aux chercheurs d’effectuer une obstruction urétérale unilatérale réversible chez la souris à l’aide d’un modèle standardisé qui permet d’analyser les résultats structurels et fonctionnels à long terme après l’inversion de l’obstruction urétérale prolongée.

Un modèle murin pour évaluer les résultats structurels et fonctionnels à long terme après l’inversion de l’obstruction urétérale unilatérale prolongée

Ce protocole décrit une procédure de survie pour une lymphadenectomie rénale bilatérale murine sûre et bien tolérée.

Lymphadenectomie rénale bilatérale murine

Simple port de la chirurgie laparoscopique change la norme de soins dans les soins chirurgicaux comme rien puisque la technique laparoscopique a été introduit il ya 20 ans. Nous présentons à la technique de la néphrectomie ports seul donneur en utilisant l'appareil Gelpoint. Nous avons réalisé avec succès cette chirurgie chez 100 patients.

Simple néphrectomie Port

Apprenez la néphrectomie partielle 5/6 par bipolectomie aiguë chez le rat via laparotomie médiane. Ce protocole standardisé permet d'induire une insuffisance rénale contrôlée pour la recherche en néphrologie.

5/6 Néphrectomie par bipolectomie aiguë par laparotomie médiane chez le rat

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