Name: Criblage in vitro à base de LED pour l’évaluation de molécules photoactivables dans l’inactivation photodynamique bactérienne (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-01-24T14:30:00.000+00:00
Duration: 5 min 13 s
Description: Découvrez un criblage à haut débit de photosensibilisateurs antibactériens utilisant des plaques 96-puits et un panneau LED. Cette méthode économique évalue l'efficacité des composés flavylium contre Staphylococcus aureus.

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<ol><li>Correia, J. H., Rodrigues, J. A., Pimenta, S., Dong, T., Yang, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Photodynamic+therapy+review%3A+principles%2C+photosensitizers%2C+applications%2C+and+future+directions%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmaceutics%22%5BJournal%5D)">Photodynamic therapy review: principles, photosensitizers, applications, and future directions.</a> Pharmaceutics. 13 (9), 1332(2021).</li>
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<li>Babilas, P., Karrer, S., Szeimies, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Photodynamic+therapy+in+dermatology%3A+state-of-the-art%5BTitle%5D)+AND+%22Photodermatol+Photoimmunol+Photomed%22%5BJournal%5D)">Photodynamic therapy in dermatology: state-of-the-art.</a> Photodermatol Photoimmunol Photomed. 26 (3), 118-132 (2010).</li>
<li>Pérez-Laguna, V., Pérez-Artiaga, L., Gilaberte, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Photodynamic+therapy+combined+with+antibiotics+or+antifungals+against+microorganisms+that+cause+skin+and+soft+tissue+infections%3A+a+planktonic+and+biofilm+approach+to+overcome+resistances%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmaceutics%22%5BJournal%5D)">Photodynamic therapy combined with antibiotics or antifungals against microorganisms that cause skin and soft tissue infections: a planktonic and biofilm approach to overcome resistances.</a> Pharmaceutics. 14 (6), 1-16 (2021).</li>
<li>Almenara-Blasco, M., López-Roca, A., Pérez-Sanchez, A., Valiente, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antimicrobial+photodynamic+therapy+for+dermatological+infections%3A+current+insights+and+future+prospects%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Photobiol%22%5BJournal%5D)">Antimicrobial photodynamic therapy for dermatological infections: current insights and future prospects.</a> Front Photobiol. 2, 773502(2024).</li>
<li>de Oliveira, A. B., Reis, C., Soares, M. T., Batista, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Photodynamic+therapy+for+treating+infected+skin+wounds%3A+a+systematic+review+and+meta-analysis+from+randomized+clinical+trials%5BTitle%5D)+AND+%22Photodiagnosis+Photodyn+Ther%22%5BJournal%5D)">Photodynamic therapy for treating infected skin wounds: a systematic review and meta-analysis from randomized clinical trials.</a> Photodiagnosis Photodyn Ther. 40 (5), 103-118 (2022).</li>
<li>Correia, P., Oliveira, S. R., Batista, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Light-activated+amino-substituted+dyes+as+dual-action+antibacterial+agents%3A+bio-efficacy+and+AFM+evaluation%5BTitle%5D)+AND+%22Dyes+Pigm%22%5BJournal%5D)">Light-activated amino-substituted dyes as dual-action antibacterial agents: bio-efficacy and AFM evaluation.</a> Dyes Pigm. 224, 111975(2024).</li>
<li>Oliveira, H., Santos, A. R., Costa, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Photoactivated+cell-killing+amino-based+flavylium+compounds%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Photoactivated cell-killing amino-based flavylium compounds.</a> Sci Rep. 11 (1), 22005(2021).</li>
<li>Sharma, S., Singh, V., Kaur, S., Mehta, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microbial+biofilm%3A+A+review+on+formation%2C+infection%2C+antibiotic+resistance%2C+control+measures%2C+and+innovative+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Microorganisms%22%5BJournal%5D)">Microbial biofilm: A review on formation, infection, antibiotic resistance, control measures, and innovative treatment.</a> Microorganisms. 11 (6), 1614(2023).</li>
<li>Barolet, D., Christiaens, F., Misery, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Light-emitting+diodes+%28LEDs%29+in+dermatology%5BTitle%5D)+AND+%22Semin+Cutan+Med+Surg%22%5BJournal%5D)">Light-emitting diodes (LEDs) in dermatology.</a> Semin Cutan Med Surg. 27 (3), 227-238 (2009).</li>
<li>Algorri, J. F., López-Higuera, J. M., Rodríguez-Cobo, L., Cobo, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advanced+light+source+technologies+for+photodynamic+therapy+of+skin+cancer+lesions%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmaceutics%22%5BJournal%5D)">Advanced light source technologies for photodynamic therapy of skin cancer lesions.</a> Pharmaceutics. 15 (7), 2075(2023).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Spectrophotomètre UV-Vis Cary 60</td><td>Agilent</td><td>G6860A</td><td></td></tr><tr><td>Dimethyl Sulfoxide</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D8418</td><td></td></tr><tr><td>Cuvettes jetables PMMA</td><td>BRAND GMBH + CO KG</td><td>759030</td><td></td></tr><tr><td>Eppendorfs (500 mL)</td><td>Tubes Fisher Scientific</td><td>15625367</td><td></td></tr><tr><td>Falcon (15 mL)</td><td>Tubes Corning</td><td>430791</td><td></td></tr><tr><td>Falcon ( 50 mL)</td><td>Panneau</td> LED <td>Corning 430291</td><td></td></tr><tr><td>IP65 50W</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Micropippete (100 uL)</td><td>Transferpette S</td><td>705874</td><td></td></tr><tr><td>Micropippete (1000 uL)</td><td>Transferpette S</td><td>705880</td><td></td></tr><tr><td>Mueller Hinton agar&nbsp ;</td><td>Oxoid</td><td>CM0405</td><td></td></tr><tr><td>Pipette multicanaux 12 canaux</td><td>Transferpette S</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Nunc MicroWell Microplaques 96 puits</td><td>Thermo Scientific</td><td>260844</td><td></td></tr><tr><td>Phospate Comprimés salins tamponnés pH 7,4</td><td>Panreac Applichem</td><td>A9177</td><td></td></tr><tr><td>Pipettes sérologiques (10 mL)</td><td>Thermo Scientific</td><td>170356N</td><td></td></tr><tr><td>Pipettes sérologiques (5 mL)</td><td>Thermo Scientific</td><td>170366N</td><td></td></tr><tr><td>Plat de culture tissulaire</td><td>TPP Techno Plastic Products AG</td><td>93150</td><td></td></tr></tbody></table>

criblage in vitro à base de led pour l’évaluation de molécules photoactivables dans l’inactivation photodynamique bactérienne

LED-Based In Vitro Screening for Assessing Photoactivable Molecules in Bacterial Photodynamic Inactivation

Composés de flavylium à base d’amino (Figure 2) : 7-diéthylamino-4′-diméthylaminoflavylium (7NEt24′NMe2), 7-diéthylamino-2-(diméthylaminostyryl)-1-benzopyrylium (7NEt2st4′NMe2), 7-diéthylamino-4′-aminoflavylium (7NEt24′NH2) et 7-diéthylamino-4′-hydroxyflavylium (7NEt24′OH), dont la nature sensible à la lumière a été discutée précédemment12,13, ont été incubé...

Criblage in vitro à base de LED pour l’évaluation de molécules photoactivables dans l’inactivation photodynamique bactérienne

The rise of multi-drug-resistant infections and the lack of new antibiotic classes have renewed interest in alternative therapies like photodynamic ...

led-based-vitro-screening-for-assessing-photoactivable-molecules

Research

Recherche

JoVE Journal

Biochemistry

Biochimie

Source : Cheng, C., et al. Inactivation des agents pathogènes par photolyse en lumière visible de la riboflavine-5'-phosphate. J. Vis. Exp. (2022)Cette vidéo présente une méthode d’évaluation des effets phototoxiques du mononucléotide de flavine (FMN) sur les bactéries pathogènes. Les cultures bactériennes sont exposées à des concentrations croissantes de FMN et éclairées par une lumière visible pour générer des espèces réactives de l’oxygène (ROS) qui endommagent les composants cellulaires.

Inactivation de bactéries à l’aide d’un mononucléotide de flavine activé par la lumière

Source : Cheng, C., et al. Inactivation des agents pathogènes par photolyse en lumière visible de la riboflavine-5'-phosphate. J. Vis. Exp. (2022).Dans cette vidéo, un mélange réactionnel tamponné contenant de la L-méthionine, du nitro-bleu tétrazolium (NBT) et du mononucléotide de flavine (FMN) est irradié avec une lumière violette pour induire la production d’espèces réactives de l’oxygène (ROS). Cela conduit à l’inactivation bactérienne et à la formation de formazan détectable par...

Quantification de l’inactivation bactérienne induite par la lumière par génération d’espèces réactives de l’oxygène

Source : Zhao, K., et al. Un modèle in vitro pour étudier l’effet de la thérapie photodynamique médiée par l’acide 5-aminolevulinic sur le biofilm de Staphylococcus aureus . J. Vis. Exp. (2018)La vidéo présente un protocole de thérapie photodynamique pour évaluer les effets antibactériens sur les biofilms bactériens Gram-positifs. Les biofilms sont divisés en quatre groupes : deux reçoivent un précurseur photosensible, et deux reçoivent un tampon. Tous sont incubés dans l’obscurité, suivis...

Traitement activé par la lumière des biofilms bactériens à l’aide d’un précurseur photosensible

Les infections causées par des souches bactériennes multirésistantes (MDR) sont apparues comme une menace sérieuse pour la santé publique, nécessitant le développement de thérapies alternatives. Nous présentons un protocole pour évaluer l’efficacité de la thérapie antimicrobienne à la lumière bleue (aBL) pour les infections à Acinetobacter baumannii MDR dans les brûlures de souris en utilisant l’imagerie par bioluminescence.

In vivo Investigation of Antimicrobial Therapy Blue Light pour multirésistante Acinetobacter baumannii Gravez Infections En utilisant l&#39; imagerie par bioluminescence

Ce manuscrit décrit un protocole afin d’étudier l’effet antimicrobien de la thérapie photodynamique induite par l’acide 5-aminolévulinique (ALA-PDT) sur un biofilm de Staphylococcus aureus . Ce protocole peut être utilisé pour développer un modèle in vitro afin d’étudier le traitement des biofilms bactériens par PDT à l’avenir.

Un modèle In Vitro pour étudier l’effet de la thérapie photodynamique véhiculée par 5-Acide aminolévulinique sur Staphylococcus aureus Biofilm

La thérapie photodynamique (PDT) est un acte médical qui consiste à l’incubation d’un photosensibilisateur exogène appliquée (PS) suivie de photoactivation de lumière visible pour induire l’apoptose. Nous présentons un protocole en vitro PDT conçu pour simuler des PDT qui peut-être être utilisé pour étudier les différences en incubation de PS et paramètres de traitement par la lumière.

Une approche In Vitro à la thérapie photodynamique

Ici, nous présentons un protocole pour inactiver les bactéries pathogènes avec des espèces réactives de l’oxygène produites lors de la photolyse de flavine mononucléotide (FMN) sous irradiation en lumière bleue et violette de faible intensité. La photolyse FMN s’est avérée être une méthode simple et sûre pour les processus sanitaires.

Inactivation d’agents pathogènes par photolyse en lumière visible de la riboflavine-5′-phosphate

L’incidence croissante de Candida albicans résistant aux médicaments est un grave problème de santé dans le monde entier. La thérapie photodynamique antimicrobienne (TDA) peut offrir une stratégie pour lutter contre les infections fongiques résistantes aux médicaments. Le présent protocole décrit l’efficacité de l’aPDT médiée par rose bengal sur une souche multirésistante de C. albicans in vitro.

Thérapie photodynamique médiée par rose Bengal pour inhiber Candida albicans

Ici, nous décrivons un dispositif nouveau, simple et peu coûteux pour effectuer avec succès des tests de thérapie photodynamique in vitro (PDT) en utilisant une culture cellulaire HeLa bidimensionnelle et une vertéporfine comme photosensibilisant.

Dispositif de thérapie photodynamique construit en interne et à base de diodes électroluminescentes pour améliorer la cytotoxicité des vertéporfines dans un modèle de culture cellulaire 2D

Ce protocole présente un ensemble d’expériences adoptées pour l’évaluation de peptides anticancéreux photocommutables, qui peuvent être utilisés dans le criblage préclinique de tels composés. Cela comprend l’évaluation de la cytotoxicité dans des cultures cellulaires 2D et 3D, l’évaluation de l’efficacité de la photoisomérisation ex vivo (tissu modèle) et l’efficacité in vivo .

Évaluation in vitro et in vivo de composés biologiquement actifs photocontrôlés - candidats médicaments potentiels pour la photopharmacologie du cancer

Ce manuscrit présente un dispositif d’éclairage innovant imprimé en 3D pour l’étude in vitro de la thérapie photodynamique médiée par Rose Bengal.

Développement d’un dispositif d’éclairage LED innovant pour l’application in vitro de la thérapie photodynamique avec Rose Bengal

Découvrez un criblage à haut débit de photosensibilisateurs antibactériens utilisant des plaques 96-puits et un panneau LED. Cette méthode économique évalue l'efficacité des composés flavylium contre Staphylococcus aureus.

Criblage in vitro à base de LED pour l’évaluation de molécules photoactivables dans l’inactivation photodynamique bactérienne

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