Name: In vivo Biotinylation de proximité pour les études d’interaction protéique chez Paramecium tetraurelia (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-09-12T13:30:00.000+00:00
Duration: 6 min 43 s
Description: Apprenez la biotinylation de proximité in vivo chez Paramecium tetraurelia en utilisant la ligase turboID. Cette méthode permet d'étudier les interactions protéiques et d'enrichir sélectivement les protéines biotinylées.

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<ol><li>Stefanov, B. -A., Nowacki, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functions+and+mechanisms+of+eukaryotic+RNA-guided+programmed+DNA+elimination%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+Soc+Trans%22%5BJournal%5D)">Functions and mechanisms of eukaryotic RNA-guided programmed DNA elimination.</a> Biochem Soc Trans. 53 (2), 473-485 (2025).</li>
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<li>Lepère, G., Bétermier, M., Meyer, E., Duharcourt, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Maternal+noncoding+transcripts+antagonize+the+targeting+of+DNA+elimination+by+scanRNAs+in+Paramecium+tetraurelia%5BTitle%5D)+AND+%22Genes+Dev%22%5BJournal%5D)">Maternal noncoding transcripts antagonize the targeting of DNA elimination by scanRNAs in Paramecium tetraurelia.</a> Genes Dev. 22 (11), 1501-1512 (2008).</li>
<li>Garnier, O., Serrano, V., Duharcourt, S., Meyer, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((RNA-mediated+programming+of+developmental+genome+rearrangements+in+Paramecium+tetraurelia%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">RNA-mediated programming of developmental genome rearrangements in Paramecium tetraurelia.</a> Mol Cell Biol. 24 (17), 7370-7379 (2004).</li>
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<li>Nowacki, M., Zagorski-Ostoja, W., Meyer, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nowa1p+and+Nowa2p%3A+Novel+putative+RNA+binding+proteins+involved+in+trans-nuclear+crosstalk+in+Paramecium+tetraurelia%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Biol%22%5BJournal%5D)">Nowa1p and Nowa2p: Novel putative RNA binding proteins involved in trans-nuclear crosstalk in Paramecium tetraurelia.</a> Curr Biol. 15 (18), 1616-1628 (2005).</li>
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<li>Shin, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Super-resolution+proximity+labeling+with+enhanced+direct+identification+of+biotinylation+sites%5BTitle%5D)+AND+%22Commun+Biol%22%5BJournal%5D)">Super-resolution proximity labeling with enhanced direct identification of biotinylation sites.</a> Commun Biol. 7 (1), 554(2024).</li>
<li>Leffers, K. -W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assembly+of+natural+and+recombinant+prion+protein+into+fibrils%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">Assembly of natural and recombinant prion protein into fibrils.</a> Biol Chem. 386 (6), 569-580 (2005).</li>
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</ol>

<table><tbody><tr><td>Microscope Axiovert 40 CFL (objectifs 10x, 40x)</td><td>Zeiss</td><td>Na</td><td></td></tr><tr><td>B-sitostérol</td><td>Sigma Aldrich</td><td>567152</td><td></td></tr><tr><td>albumine sérique bovine (BSA)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>N° A9647</td><td></td></tr><tr><td>Huile CellTram</td><td>Ependorf</td><td>Na</td><td></td></tr><tr><td>Séquence d’ADN 3xHA-turboID optimisée pour les codons</td><td>Twist bioscience</td><td>Na</td><td>GCTAGCTATCCATAcGAaGTTC CTGATTATGCTTATCCTTACGAT GTTCCTGATTATGCTTATCCTTAT GATGTACCTGATTACGCTGGATC AAAAGATAATACTGTACCTCTTAA ATTAATCGCTTTATTAGCTAATGG TGAATTTCATTCTGGTGAACAAC TTGGTGAAACTTTAGGTATGTCA AGAGCTGCTATTAATAAACACATT CAAACTTTAAGAGATTGGGGTGT TGATGTTTTTACTGTCCCTGGTAA AGGATATTCACTTCCTGAACCCAT TCCTTTATTAAATGCTAACAAAT TTTAGGTCAATTAGATGGAGGTT CTGTTGCTGTTTTACCTGTTGTT GACTCAACTAATCAATATTTATTAG ATAGAATTGGTGAATTAAAGTCAG GTGATGCTTGTATTGCTGAATACC AACAAGCTGGTAGAGGTTCAAGA GGTAGAAAATGGTTTTCTCCTTTTTTTT GGTGCTAATTTATACCTTTCCATGT TCTGGAGACTTAAAAGAGGTCCCG CAGCTATTGGATTAGGTCCTGTCAT TGGTATTGTTATGGCTGAAGCTCT TAGAAAATTAGGTGCTGATAAGGT TAGAGTTAAATGGCCTAATGATTTA TATCTTCAAGATAGAAAAACTTGCT GGTATACTTGTTGAATTAGCTGGT ATTACTGGTGATGCCGCTCAAATT GTTATCGGTGCTGGTATTAATGTTG CTATGAGAAGAGTTGAAGAATCAG TTGTTAATCAAGGTTGGTTACTCT / TCAAGAAGCTGGTATAAATCTTGAT AGAAACACTTTAGCTGCTACTCTCA TTAGAGATAGAGCTGCTTTAGA ATTATTTGAACAAGAAGGTTTGGCT CCTTATCTTCCTAGATGGGAAAA TAGATAATTTCATTAATAGACCTGTTA AATTAATTATTGGTGATAAAGAAATTT TCGGTATTTCAAGAGGTATAGATAAc AAGGAGCTCTTTTTATTAGAACAAgatg GTGTTATCAAACCATGGATGGGTGTT GAAATTTCATTGAGATCAGCTGAAAA GAAATGA</td></tr><tr><td>DAPI</td><td>Sigma Aldrich</td><td>D9542</td><td></td></tr><tr><td>EDTA</td><td>Fischer Scientific</td><td>AAA151610B</td><td></td></tr><tr><td>Pointes du microchargeur epT.I.P.S.</td><td>Ependorf</td><td>5242956003</td><td></td></tr><tr><td>Éthanol</td><td>Grogg Chemie</td><td>1009832500</td><td></td></tr><tr><td>FemtoJet 4i</td><td>Ependorf</td><td>Na</td><td></td></tr><tr><td>Femtotip II</td><td>Calibre Scientifique</td><td>5242957000</td><td></td></tr><tr><td>Solution de formaldéhyde</td><td>Sigma Aldrich</td><td>Réf. F8775</td><td></td></tr><tr><td>Glycine</td><td>AppliChem</td><td>10021259</td><td></td></tr><tr><td>Anticorps IgG anti-lapin de chèvre, Alexa Fluor 568</td><td>Thermo Fischer Scientific</td><td>A-11011</td><td></td></tr><tr><td>HA-tag (C29F4) lapin mAB</td><td>systèmes cellulaires</td><td>3724</td><td></td></tr><tr><td>InjectMan NI 2</td><td>Ependorf</td><td>Na</td><td></td></tr><tr><td>Léger moyen</td><td>Na</td><td>Na</td><td>0,2x solution en poudre d’herbe de blé dans 2,5 mM de Na2HPO4</td></tr><tr><td>Huile minérale</td><td>Sigma Aldrich</td><td>Référence M8691</td><td></td></tr><tr><td>Na2HPO4</td><td>Sigma Aldrich</td><td>71643</td><td></td></tr><tr><td>Phénol-chloroforme-isoamylalkohol</td><td>Sigma Aldrich</td><td>77617</td><td></td></tr><tr><td>solution saline tamponnée au phosphore&nbsp ;</td><td>Fischer Scientific</td><td>10722497</td><td></td></tr><tr><td>Kit Plasmid plus midiprep</td><td>Qiagene</td><td>12945</td><td></td></tr><tr><td>Milieu riche</td><td>Na</td><td>Na</td><td>1x solution de poudre d’herbe de blé dans 2,5 mM de Na2HPO4</td></tr><tr><td>Streptavidine-FITC</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>11-4317-87</td><td></td></tr><tr><td>Filtre centrifuge Ultrafree-MC GV&nbsp ;</td><td>EMD Milipore</td><td>UFC30GV00</td><td></td></tr><tr><td>solution de lavage</td><td>Na</td><td>Na</td><td>0,1 % BSA dans l’eau de Volvic&nbsp ;</td></tr><tr><td>solution de poudre d’herbe de blé</td><td>Pines international</td><td>Na</td><td>Préparez comme un stock 20x à partir de la poudre comme décrit précédemment (0,5 g / 10 ml)</td></tr><tr><td>Streptavidine-HRP</td><td>ABCAM</td><td>AB7403</td><td></td></tr><tr><td>Perles magnatiques enrobées de streptavidine</td><td>Sigma Aldrich</td><td>LSKMAGT02</td><td></td></tr><tr><td>Tampon de lyse pour l’extraction</td><td>Na</td><td>Na</td><td>50 mM Tris pH 8 ; 150 mM de NaCl ; 0,5 % de désoxycholate de sodium ; 1 % Triton X-100 ; 5 mM MgCl2 ; 2x inhibiteur de protéase cOmplete (Roche) ; &nbsp ;</td></tr><tr><td>Tampon de lavage 1 pour tirage</td><td>Na</td><td>Na</td><td>50 mM Tris pH 8 ; 150 mM de NaCl ; 0,5 % de désoxycholate de sodium ; 1 % Triton X-100 ; 5 mM MgCl2 ;</td></tr><tr><td>Tampon de lavage 2 pour tirage</td><td>Na</td><td>Na</td><td>10 mM Tris pH 7,4 ; 150 mM de NaCl ; 0,01 % NP40 ; 1 mM de MgCl2</td></tr><tr><td>Tampon de lavage 3 pour tirage</td><td>Na</td><td>Na</td><td>10 mM Tris pH 7,4 ; 150 mM de NaCl ;</td></tr></tbody></table>

in vivo biotinylation de proximité pour les études d’interaction protéique chez paramecium tetraurelia

In Vivo Proximity Biotinylation for Protein Interaction Studies in Paramecium tetraurelia

Notre protocole décrit une méthode simplifiée pour l’introduction d’une modification covalente de la biotine dans les protéines au voisinage d’une protéine cible dans Paramecium (Graphique 1A). Ces protéines biotinylées peuvent ensuite être enrichies à l’aide d’un pulldown de streptavidine et identifiées à l’aide de la spectrométrie de masse20. Pour démontrer un cas d’utilisation pratique de la méthode, nous avons appliqué le protocole à la protéine Nowa1. Cette protéine est essentielle au processus de réarrangement génomique et présente des altérations dynamiques dans sa localisation12. Dans les premiers stades, il reste dans l’ancien noyau somatique et se fragmente, mais plus tard, il est localisé dans le nouveau noyau en développement. Notamment, nos tentatives précédentes d’enrichissement médié par marquage des protéines interagissant avec Nowa1 ont échoué (résultats non publiés). Cela était probablement dû aux répétitions complexes présentant une similitude avec la protéine prion PrP27 qui pouvaient provoquer une auto-agrégation dans des conditions non optimales pendant la procédure de pulldown21. Nous avons amplifié par PCR la région codante de Nowa1 avec sa région non codante en amont contenant le promoteur. Le produit a ensuite été inséré dans le cadre à l’aide d’une séquence d’encodage turboID optimisée pour les codons (Graphique 1B). Pour éviter le silençage induit par le transgène causé par l’injection d’ADN circulaire dans Paramecium, le vecteur a été linéarisé avant l’injection. L’ADN linéarisé et purifié a ensuite été micro-injecté dans le noyau somatique (MAC) comme décrit dans ce protocole. Une gouttelette dispersée confinée dans la région la plus foncée du noyau somatique est devenue visible dans certaines des injections réussies (Graphique 1C). Le succès de l’injection et l’amplification de l’ADN par les cellules lors de la division cellulaire ont ensuite été vérifiés par PCR. Comme prévu, 40 à 50 % des cellules étaient positives pour l’ADN injecté de la construction Nowa1 (taille de produit attendue de 685 pb) (Graphique 2). L’étape suivante consistait à vérifier la présence de la protéine codée par l’ADN injecté. Étant donné que le vecteur récepteur contient la séquence turboID flanquée d’un triple marqueur HA, nous avons utilisé la coloration par immunofluorescence pour détecter le marqueur. Cela nous a permis de vérifier si les cellules injectées expriment la protéine de fusion et si elle était correctement localisée. Nous avons utilisé des cellules à un stade avancé qui ont montré la localisation de la protéine de fusion dans les deux nouveaux noyaux en développement, comme précédemment observé pour la protéine Nowa1 de type sauvage12. Les lignées cellulaires individuelles injectées ont montré différents niveaux de la protéine de fusion (Graphique 3). Un niveau d’expression plus faible peut être bénéfique pour les applications où un bruit de fond réduit est souhaitable, mais dans ce cas, nous avons opté pour un signal maximal et avons procédé avec le clone 2, qui a montré l’expression la plus élevée. Nous avons ensuite collecté des échantillons à différents stades de développement pour suivre la localisation de la protéine de fusion. La protéine a d’abord été localisée dans les écheveaux formés à partir de l’ancien noyau somatique et dans les fragments nucléaires séparés au cours des premiers stades de l’autogamie. Lors de l’apparition de l’anlagen nucléaire, la protéine de fusion a évolué vers ces nouveaux noyaux en développement (Graphique 4). Pour favoriser la biotinylation du protéome proximal aux différents stades, nous avons complété la culture avec de la biotine 500 μM pendant 2 h avant de prélever les cellules pour la FI. Nous avons visualisé les protéines marquées à la biotine via une coloration IF à l’aide d’une streptavidine marquée par fluorescence. Le signal observé correspondait à la localisation de la protéine de fusion marquée HA. Il est important de noter qu’il a été possible d’obtenir une localisation de la biotinylation spécifique aux différents stades de développement nucléaire, car même une courte incubation avec de la biotine est suffisante pour obtenir une biotinylation significative (Graphique 4). De plus, sans l’ajout de biotine supplémentaire, seule une biotinylation négligeable était détectable dans les cellules injectées. Dans les cellules de type sauvage, l’ajout d’un supplément de biotine n’a provoqué aucune biotinylation détectable (Graphique 5A). Notamment, la biotine ne s’accumulait pas simplement dans le noyau en développement, car même dans des conditions de dénaturation, elle reste attachée aux protéines. (Graphique 5B). À l’aide de billes magnétiques enrobées de streptavidine, il a été possible d’enrichir sélectivement les protéines biotinylées (Graphique 6). Les protéines enrichies peuvent être identifiées à l’aide de la spectrométrie de masse. Dans ces expériences ultérieures d’identification de protéines, la culture non supplémentée, ainsi que les cellules exprimant une protéine turboID non fusionnée, peuvent être utilisées comme groupes de contrôle de fond.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/68504/68504fig1.jpg"> 
Figure 1 : Vue d’ensemble de la procédure de biotinylation de proximité chez P. tetraurelia. (A) Aperçu général du protocole. (B) Principe de clonage pour le vecteur récepteur turboID plug-and-play et la construction résultante pour la protéine de fusion Nowa1. La région 3'UTR utilisée dans ce plasmide est dérivée de CenH3a. (C) Gouttelette diffuse visible contenue dans la zone plus sombre correspondant au noyau somatique (MAC) lors d’une injection réussie d’ADN. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68504/68504fig1large.jpg" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/68504/68504fig2.jpg"> 
Figure 2 : Test PCR pour une injection réussie. Analyse sur gel d’agarose de la réaction PCR d’un produit avec une amorce directe spécifique pour la région amont codant pour la résistance à l’ampicilline (amp start) et une amorce inverse complémentaire à Nowa1. La pointe de la flèche indique la taille attendue du produit. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68504/68504fig2large.jpg" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/68504/68504fig3.jpg"> 
Figure 3 : Coloration par immunofluorescence pour valider la localisation correcte de la protéine de fusion turboID. Coloration par immunofluorescence à l’aide d’un anticorps primaire anti-HA de lapin (1:100) et d’un anticorps secondaire conjugué Alexa Fluor 568 (1:1000) de lignées monoclonales de paramécie avec un signal PCR positif pour l’ADN codant pour une protéine de fusion Nowa1-HA-turboID. Echelle 20 μm. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68504/68504fig3large.jpg" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/68504/68504fig4.jpg"> 
Figure 4 : Biotinylation spécifique de Nowa1 à différents stades de développement. Coloration par immunofluorescence de la ligne monoclonale 2 à des stades progressifs lors de la formation du nouveau noyau somatique. Le milieu de culture a été complété par 500 μM de biotine pour une activité turboID optimale. L’HA-tag a été détecté comme sur la figure 3, et la biotine a été détectée à l’aide de la streptavidine-FITC (1:200). Echelle 20 μm. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68504/68504fig4large.jpg" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/68504/68504fig5.jpg"> 
Figure 5 : Un marquage de proximité efficace par turboID nécessite un supplément de biotine dans la culture. (A) Coloration par immunofluorescence des cellules wt et injectées au stade avancé du développement montrant l’expression de Nowa1-HA-turboID et la biotinylation observée avec 500 μM de biotine supplémentaire. Le HA-tag et la biotine ont été détectés comme à la figure 4. Echelle 20 μm. (B) Analyse par transfert Western pour la biotine à l’aide de la HRP-streptavidine de cellules wt cultivées avec de la biotine 500 μM et de cellules injectées de turboID avec et sans biotine. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68504/68504fig5large.jpg" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/68504/68504fig6.jpg"> 
Figure 6 : Enrichissement de protéines biotinylées avec des billes magnétiques de streptavidine. Analyse par transfert Western pour la biotine d’échantillons provenant d’une expérience de pulldown utilisant des billes magnétiques enrobées de streptavidine. Les échantillons sont : le lysat cellulaire Nowa1-HA-turboID (entrée), la fraction non liée (flowthrough), les étapes de lavage (wash 1-6) et les protéines liées aux billes (sortie). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68504/68504fig6large.jpg" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.</a>

In vivo Biotinylation de proximité pour les études d’interaction protéique chez Paramecium tetraurelia

Paramecium is a major model organism for the study of molecular mechanisms involved in programmed genomic rearrangements and transposon elimination during ...

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Cette vidéo montre des expériences avec l'analyse subséquente des interactions protéine-protéine par l'utilisation de micro-surfaces texturées. L'approche offre la possibilité de détecter les interactions entre protéines dans les cellules vivantes et combine haute capacité de débit avec la possibilité d'extraire des informations quantitatives.

In vivo de détection des interactions protéine-protéine sur la micro-surfaces texturées

Ce protocole décrit comment l'image interactions protéine-protéine en utilisant un dosage de proximité basée sur le FRET.

Imagerie interactions protéine-protéine In vivo</em

Cette vidéo décrit le test de ligature de proximité pour étudier in situ les interactions protéine-protéine dans les cellules de nématodes. La proximité des protéines d’intérêt génère la matrice d’ADN circulaire à l’aide d’une sonde PLA attachée à un anticorps secondaire. La sonde est encore amplifiée à l’aide de la solution d’amplification, qui produit un long ADN simple brin suivi de l’hybridation de la sonde détecteur, permettant la localisation des interactions protéine-protéine dans les...

Essai de ligature de proximité pour étudier les interactions protéine-protéine in situ

Ici, nous décrivons une procédure pour visualiser et de quantifier avec une grande sensibilité les interactions endogènes entre le réticulum endoplasmique et les mitochondries dans les cellules fixes. Le protocole optimisé comprend un essai de ligature de proximité in situ dans le ciblage de l'inositol 1,4,5-triphosphate récepteur / protéine régulée par le glucose 75 / D complexe canal anionique / cyclophiline dépendant de la tension à l'interface de la membrane associée à la mitochondrie.

Etude de réticulum endoplasmique et mitochondries Interactions par<em&gt; In Situ</em&gt; Proximité Ligation Assay dans des cellules fixes

Cet article décrit le protocole pour la Purification d’affinité de complémentation bimoléculaire (BiCAP). Cette nouvelle méthode facilite l’isolement spécifique et la caractérisation de la protéomique en aval de toute deux protéines qui interagissent, tandis que hors ONU complexée protéines individuelles ainsi que des complexes formés avec des partenaires de liaison concurrentes.

Dissection multi-signalisation Complexes protéiques par Purification d’affinité de complémentation bimoléculaire (BiCAP)

Nous présentons ici un protocole visant à contrôler le montage et le démontage de la toxine du charbon à l’aide de biolayer l’interférométrie (BLI). Suite de montage/démontage sur la surface du biocapteur, les complexes de protéine importante sont dispensés de la surface pour la visualisation et l’identification des composantes des complexes à l’aide de la microscopie électronique et microanalyse, respectivement.

Analyse des Complexes protéiques dynamique assemblés sur et libéré de Biolayer interférométrie biocapteur à l’aide de la spectrométrie de masse et de microscopie électronique

Présentés ici sont des protocoles pour les essais biochimiques in vitro utilisant des étiquettes de biotine qui peuvent être largement applicables pour étudier les interactions protéines-acides nucléiques.

In Vitro Biochemical Assays using Biotin Labels to Study Protein-Nucleic Acid Interactions In Vitro Biochemical Assays using Biotin Labels to Study Protein-Nucleic Acid Interactions In Vitro Biochemical As

Ce protocole démontre l’utilisation de l’essai de ligation de proximité pour sonder pour des interactions protéine-protéine in situ dans la lignée germinale de C. elegans.

In Situ Détection de l’assemblage du complexe Ribonucleoprotéine dans le C. elegans Germline à l’aide de Proximity Ligation Assay

Un protocole d’imagerie des microtubules dynamiques in vivo à l’aide d’une protéine de liaison à l’extrémité sous marquage fluorescent a été présenté. Nous avons décrit les méthodes pour étiqueter, imager et analyser les microtubules dynamiques dans le neurone du microtubule latéral postérieur (PLM) de C. elegans.

In vivo Évaluation de la dynamique et de l’orientation des microtubules dans les neurones de Caenorhabditis elegans

Le transfert d’énergie par résonance de fluorescence (FRET) est une technique d’imagerie permettant de détecter les interactions protéiques dans les cellules vivantes. Ici, un protocole FRET est présenté pour étudier l’association des enzymes modifiant les histones avec des facteurs de transcription qui les recrutent vers les promoteurs cibles de la régulation épigénétique de l’expression génique dans les tissus végétaux.

Étude des interactions entre les enzymes modifiant l’histone et les facteurs de transcription in vivo par transfert d’énergie par résonance de fluorescence

Dans cette étude, nous établissons un protocole détaillé pour le marquage de proximité (PL) basé sur TurboID dans l’ovaire de D. melanogaster , couvrant les étapes allant de la supplémentation en biotine et de la dissection de l’ovaire à la validation de l’expression du transgène et à l’enrichissement des peptides biotinylés pour la spectrométrie de masse.

In vivo Application du marquage de proximité basé sur TurboID chez Drosophila melanogaster

Apprenez la biotinylation de proximité in vivo chez Paramecium tetraurelia en utilisant la ligase turboID. Cette méthode permet d'étudier les interactions protéiques et d'enrichir sélectivement les protéines biotinylées.

In vivo Biotinylation de proximité pour les études d’interaction protéique chez Paramecium tetraurelia

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