Name: Établissement de cultures primaires enrichies en zone à partir du cortex surrénalen de la souris (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-05-08T14:20:00.000+00:00
Duration: 7 min 43 s
Description: Apprenez à établir des cultures primaires enrichies en zones spécifiques à partir du cortex surrénalien de souris. Cette méthode permet d'étudier la physiologie de la zona glomerulosa et de la zona fasciculata.

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<ol><li>Zelander, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+ultrastructure+of+the+adrenal+cortex+of+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Z.+Zellforsch.+Mikrosk.+Anat%22%5BJournal%5D)">The ultrastructure of the adrenal cortex of the mouse.</a> Z. Zellforsch. Mikrosk. Anat. 46 (6), 710-716 (1957).</li>
<li>Nishimoto, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adrenocortical+zonation+in+humans+under+normal+and+pathological+conditions%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Clin.+Endocrinol.+Metab%22%5BJournal%5D)">Adrenocortical zonation in humans under normal and pathological conditions.</a> J. Clin. Endocrinol. Metab. 95 (5), 2296-2305 (2010).</li>
<li>Freedman, B. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adrenocortical+zonation+results+from+lineage+conversion+of+differentiated+zona+glomerulosa+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Dev.+Cell%22%5BJournal%5D)">Adrenocortical zonation results from lineage conversion of differentiated zona glomerulosa cells.</a> Dev. Cell. 26 (6), 666-673 (2013).</li>
<li>Leng, S., Carlone, D. L., Guagliardo, N. A., Barrett, P. Q., Breault, D. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rosette+morphology+in+zona+glomerulosa+formation+and+function%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Cell.+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">Rosette morphology in zona glomerulosa formation and function.</a> Mol. Cell. Endocrinol. 530, 111287(2021).</li>
<li>Gwynne, J. T., Strauss, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+lipoproteins+in+steroidogenesis+and+cholesterol+metabolism+in+steroidogenic+glands%5BTitle%5D)+AND+%22Endocr.+Rev%22%5BJournal%5D)">The role of lipoproteins in steroidogenesis and cholesterol metabolism in steroidogenic glands.</a> Endocr. Rev. 3 (3), 299-329 (1982).</li>
<li>Zhu, Y., Zhang, X., Hu, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structure+of+rosettes+in+the+zona+glomerulosa+of+human+adrenal+cortex%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Anat%22%5BJournal%5D)">Structure of rosettes in the zona glomerulosa of human adrenal cortex.</a> J. Anat. 243 (4), 684-689 (2023).</li>
<li>Leng, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%CE%B2-Catenin+and+FGFR2+regulate+postnatal+rosette-based+adrenocortical+morphogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Commun%22%5BJournal%5D)">β-Catenin and FGFR2 regulate postnatal rosette-based adrenocortical morphogenesis.</a> Nat. Commun. 11 (1), 1680(2020).</li>
<li>Rainey, W. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adrenal+zonation%3A+clues+from+11%CE%B2-hydroxylase+and+aldosterone+synthase%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Cell.+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">Adrenal zonation: clues from 11β-hydroxylase and aldosterone synthase.</a> Mol. Cell. Endocrinol. 151 (1-2), 151-160 (1999).</li>
<li>Rebuffé-Scrive, M., Krotkiewski, M., Elfversson, J., Björntorp, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Muscle+and+adipose+tissue+morphology+and+metabolism+in+Cushing%E2%80%99s+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Clin.+Endocrinol.+Metab%22%5BJournal%5D)">Muscle and adipose tissue morphology and metabolism in Cushing’s syndrome.</a> J. Clin. Endocrinol. Metab. 67 (6), 1122-1128 (1988).</li>
<li>Luo, X., Ikeda, Y., Parker, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+cell-specific+nuclear+receptor+is+essential+for+adrenal+and+gonadal+development+and+sexual+differentiation%5BTitle%5D)+AND+%22Cel.+l%22%5BJournal%5D)">A cell-specific nuclear receptor is essential for adrenal and gonadal development and sexual differentiation.</a> Cel. l. 77 (4), 481-490 (1994).</li>
<li>Huang, C. C. J., Miyagawa, S., Matsumaru, D., Parker, K. L., Yao, H. H. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Progenitor+cell+expansion+and+organ+size+of+mouse+adrenal+is+regulated+by+Sonic+Hedgehog%5BTitle%5D)+AND+%22Endocrinology%22%5BJournal%5D)">Progenitor cell expansion and organ size of mouse adrenal is regulated by Sonic Hedgehog.</a> Endocrinology. 151 (3), 1119-1128 (2010).</li>
<li>King, P., Paul, A., Laufer, E. Shh signaling regulates adrenocortical development and identifies progenitors of steroidogenic lineages. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A, 106 (50), 21185-21190 (2009).</li>
<li>Ching, S., Vilain, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeted+disruption+of+Sonic+Hedgehog+in+the+mouse+adrenal+leads+to+adrenocortical+hypoplasia%5BTitle%5D)+AND+%22Genesis%22%5BJournal%5D)">Targeted disruption of Sonic Hedgehog in the mouse adrenal leads to adrenocortical hypoplasia.</a> Genesis. 47 (9), 628-637 (2009).</li>
<li>Kim, A. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeted+disruption+of+%CE%B2-catenin+in+Sf1-expressing+cells+impairs+development+and+maintenance+of+the+adrenal+cortex%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Targeted disruption of β-catenin in Sf1-expressing cells impairs development and maintenance of the adrenal cortex.</a> Development. 135 (15), 2593-2602 (2008).</li>
<li>Berthon, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Constitutive+%CE%B2-catenin+activation+induces+adrenal+hyperplasia+and+promotes+adrenal+cancer+development%5BTitle%5D)+AND+%22Hum.+Mol.+Genet%22%5BJournal%5D)">Constitutive β-catenin activation induces adrenal hyperplasia and promotes adrenal cancer development.</a> Hum. Mol. Genet. 19 (8), 1561-1576 (2010).</li>
<li>Basham, K. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+ZNRF3-dependent+Wnt%2F%CE%B2-catenin+signaling+gradient+is+required+for+adrenal+homeostasis%5BTitle%5D)+AND+%22Genes+Dev%22%5BJournal%5D)">A ZNRF3-dependent Wnt/β-catenin signaling gradient is required for adrenal homeostasis.</a> Genes Dev. 33 (3-4), 209-220 (2019).</li>
<li>Finco, I., Lerario, A. M., Hammer, G. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sonic+Hedgehog+and+WNT+signaling+promote+adrenal+gland+regeneration+in+male+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Endocrinology%22%5BJournal%5D)">Sonic Hedgehog and WNT signaling promote adrenal gland regeneration in male mice.</a> Endocrinology. 159 (2), 579-596 (2018).</li>
<li>Heikkilä, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Wnt-4+deficiency+alters+mouse+adrenal+cortex+function%2C+reducing+aldosterone+production%5BTitle%5D)+AND+%22Endocrinology%22%5BJournal%5D)">Wnt-4 deficiency alters mouse adrenal cortex function, reducing aldosterone production.</a> Endocrinology. 143 (11), 4358-4365 (2002).</li>
<li>Drelon, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PKA+inhibits+WNT+signalling+in+adrenal+cortex+zonation+and+prevents+malignant+tumour+development%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Commun%22%5BJournal%5D)">PKA inhibits WNT signalling in adrenal cortex zonation and prevents malignant tumour development.</a> Nat. Commun. 7 (1), 12751(2016).</li>
<li>Heaton, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Progression+to+adrenocortical+tumorigenesis+in+mice+and+humans+through+insulin-like+growth+factor+2+and+%CE%B2-catenin%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Pathol%22%5BJournal%5D)">Progression to adrenocortical tumorigenesis in mice and humans through insulin-like growth factor 2 and β-catenin.</a> Am. J. Pathol. 181 (3), 1017-1033 (2012).</li>
<li>Borges, K. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Wnt%2F%CE%B2-catenin+activation+cooperates+with+loss+of+p53+to+cause+adrenocortical+carcinoma+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Oncogene%22%5BJournal%5D)">Wnt/β-catenin activation cooperates with loss of p53 to cause adrenocortical carcinoma in mice.</a> Oncogene. 39 (30), 5282-5291 (2020).</li>
<li>Borges, K. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non-canonical+Wnt+signaling+triggered+by+WNT2B+drives+adrenal+aldosterone+production%5BTitle%5D)+AND+%22bioRxiv%22%5BJournal%5D)">Non-canonical Wnt signaling triggered by WNT2B drives adrenal aldosterone production.</a> bioRxiv. , (2024).</li>
<li>Sasano, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell+proliferation+and+apoptosis+in+normal+and+pathologic+human+adrenal%5BTitle%5D)+AND+%22Mod.+Pathol%22%5BJournal%5D)">Cell proliferation and apoptosis in normal and pathologic human adrenal.</a> Mod. Pathol. 8 (1), 11-17 (1995).</li>
<li>Chang, S. P., Morrison, H. D., Nilsson, F., Kenyon, C. J., West, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell+proliferation%2C+movement%2C+and+differentiation+during+maintenance+of+the+adult+mouse+adrenal+cortex%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Cell proliferation, movement, and differentiation during maintenance of the adult mouse adrenal cortex.</a> PLoS One. 8 (12), e81865(2013).</li>
<li>Mitani, F. Functional zonation of the rat adrenal cortex: the development and maintenance. Proc. Jpn. Acad. Ser. B, 90 (5), 163-183 (2014).</li>
<li>Dinh, H. A., Volkert, M., Secener, A. K., Scholl, U. I., Stölting, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((T-+and+L-type+calcium+channels+maintain+calcium+oscillations+in+the+murine+zona+glomerulosa%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">T- and L-type calcium channels maintain calcium oscillations in the murine zona glomerulosa.</a> Hypertension. 81 (4), 811-822 (2024).</li>
<li>Penton, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Task3+potassium+channel+gene+invalidation+causes+low+renin+and+salt-sensitive+arterial+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Endocrinology%22%5BJournal%5D)">Task3 potassium channel gene invalidation causes low renin and salt-sensitive arterial hypertension.</a> Endocrinology. 153 (10), 4740-4748 (2012).</li>
<li>Mattos, G. E., Lotfi, C. F. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differences+between+the+growth+regulatory+pathways+in+primary+rat+adrenal+cells+and+mouse+tumor+cell+line%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Cell.+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">Differences between the growth regulatory pathways in primary rat adrenal cells and mouse tumor cell line.</a> Mol. Cell. Endocrinol. 245 (1-2), 31-42 (2005).</li>
<li>Muzumdar, M. D., Tasic, B., Miyamichi, K., Li, L., Luo, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+global+double-fluorescent+Cre+reporter+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Genesis%22%5BJournal%5D)">A global double-fluorescent Cre reporter mouse.</a> Genesis. 45 (9), 593-605 (2007).</li>
<li>Livak, K. J., Schmittgen, T. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+relative+gene+expression+data+using+real-time+quantitative+PCR+and+the+2-%CE%94%CE%94CT+method%5BTitle%5D)+AND+%22Methods%22%5BJournal%5D)">Analysis of relative gene expression data using real-time quantitative PCR and the 2-ΔΔCT method.</a> Methods. 25 (4), 402-408 (2001).</li>
<li>Berber, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rho%2FROCK+signaling+and+%CE%B1-catenin+mediate+%CE%B2-catenin-driven+hyperplasia+in+the+adrenal+cortex+via+adherens+junctions%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Clin.+Invest%22%5BJournal%5D)">Rho/ROCK signaling and α-catenin mediate β-catenin-driven hyperplasia in the adrenal cortex via adherens junctions.</a> J. Clin. Invest. , (2026).</li>
<li>Smith, T. T. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Forced+treadmill+running+reduces+systemic+inflammation+yet+worsens+upper+limb+discomfort+in+a+rat+model+of+work-related+musculoskeletal+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Musculoskelet.+Disord%22%5BJournal%5D)">Forced treadmill running reduces systemic inflammation yet worsens upper limb discomfort in a rat model of work-related musculoskeletal disorders.</a> BMC Musculoskelet. Disord. 21 (1), 57(2020).</li>
<li>Kremer, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extracellular+matrix+protein+signatures+of+the+outer+and+inner+zones+of+the+rat+adrenal+cortex%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Proteome+Res%22%5BJournal%5D)">Extracellular matrix protein signatures of the outer and inner zones of the rat adrenal cortex.</a> J. Proteome Res. 23 (8), 3418-3432 (2024).</li>
<li>Pignatti, E., Leng, S., Carlone, D. L., Breault, D. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regulation+of+zonation+and+homeostasis+in+the+adrenal+cortex%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Cell.+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">Regulation of zonation and homeostasis in the adrenal cortex.</a> Mol. Cell. Endocrinol. 441, 146-155 (2017).</li>
<li>Pignatti, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Beta-catenin+causes+adrenal+hyperplasia+by+blocking+zonal+transdifferentiation%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Rep%22%5BJournal%5D)">Beta-catenin causes adrenal hyperplasia by blocking zonal transdifferentiation.</a> Cell Rep. 31 (3), 107524(2020).</li>
<li>Romero, D. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Disabled-2+is+expressed+in+the+adrenal+zona+glomerulosa+and+is+involved+in+aldosterone+secretion%5BTitle%5D)+AND+%22Endocrinology%22%5BJournal%5D)">Disabled-2 is expressed in the adrenal zona glomerulosa and is involved in aldosterone secretion.</a> Endocrinology. 148 (6), 2644-2652 (2007).</li>
<li>Sahut-Barnola, I., Lefrancois-Martinez, A. M., Jean, C., Veyssiere, G., Martinez, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adrenal+tumorigenesis+targeted+by+the+corticotropin-regulated+promoter+of+the+aldo-keto+reductase+AKR1B7+gene+in+transgenic+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Endocr.+Res%22%5BJournal%5D)">Adrenal tumorigenesis targeted by the corticotropin-regulated promoter of the aldo-keto reductase AKR1B7 gene in transgenic mice.</a> Endocr. Res. 26 (4), 885-898 (2000).</li>
<li>Vidal, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+adrenal+capsule+is+a+signaling+center+controlling+cell+renewal+and+zonation+through+Rspo3%5BTitle%5D)+AND+%22Genes+Dev%22%5BJournal%5D)">The adrenal capsule is a signaling center controlling cell renewal and zonation through Rspo3.</a> Genes Dev. 30 (12), 1389-1394 (2016).</li>
<li>Dörner, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((GLI1%2B+progenitor+cells+in+the+adrenal+capsule+of+the+adult+mouse+give+rise+to+heterotopic+gonadal-like+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Cell.+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">GLI1+ progenitor cells in the adrenal capsule of the adult mouse give rise to heterotopic gonadal-like tissue.</a> Mol. Cell. Endocrinol. 441, 164-175 (2017).</li>
<li>Guo, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((3D+culture+system+for+human+adrenal+glands+that+uses+a+sequential+processing+medium+to+facilitate+cortical-medullary+cell+development%5BTitle%5D)+AND+%22Clin.+Lab%22%5BJournal%5D)">3D culture system for human adrenal glands that uses a sequential processing medium to facilitate cortical-medullary cell development.</a> Clin. Lab. 70 (12), (2024).</li>
<li>Friedrich, L., Schuster, M., Rubin de Celis, M. F., Berger, I., Bornstein, S. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+and+in+vitro+cultivation+of+adrenal+cells+from+mice%5BTitle%5D)+AND+%22STAR+Protoc%22%5BJournal%5D)">Isolation and in vitro cultivation of adrenal cells from mice.</a> STAR Protoc. 2 (4), 100999(2021).</li>
<li>Mattos, G. E., Jacysyn, J. F., Amarante-Mendes, G. P., Lotfi, C. F. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+effect+of+FGF2%2C+synthetic+peptides+1%E2%80%9328+N-POMC+and+ACTH+on+proliferation+in+rat+adrenal+cell+primary+cultures%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Tissue+Res%22%5BJournal%5D)">Comparative effect of FGF2, synthetic peptides 1–28 N-POMC and ACTH on proliferation in rat adrenal cell primary cultures.</a> Cell Tissue Res. 345 (3), 343-356 (2011).</li>
<li>Gazdar, A. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+and+characterization+of+a+human+adrenocortical+carcinoma+cell+line+that+expresses+multiple+pathways+of+steroid+biosynthesis%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Establishment and characterization of a human adrenocortical carcinoma cell line that expresses multiple pathways of steroid biosynthesis.</a> Cancer Res. 50 (17), 5488-5496 (1990).</li>
<li>Wang, T., Rainey, W. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+adrenocortical+carcinoma+cell+lines%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Cell.+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">Human adrenocortical carcinoma cell lines.</a> Mol. Cell. Endocrinol. 351 (1), 58-65 (2012).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Tube conique (50 mL )</td><td>Corning (Corning, NY, USA)</td><td>352070</td><td>Stérile</td></tr><tr><td>Filtre à seringue de 0,22 &micro;m</td><td>MilliporeSigma (Burlington, MA, USA)</td><td>SLGV033RS</td><td>Filtration de la solution de digestion</td></tr><tr><td>Seringue jetable de 10 mL</td><td>BD Plastipak (Franklin Lakes, NJ, USA)</td><td>300912</td><td>Stérile</td></tr><tr><td>Pipette sérologique de 5 mL</td><td>Corning (Corning, NY, USA)</td><td>4487</td><td>Stérile</td></tr><tr><td>Pipette sérologique de 10 mL</td><td>Corning (Corning, NY, USA)</td><td>4488</td><td>Stérile</td></tr><tr><td>Embouts de pipette filtrés (P200)</td><td>Axygen (Union City, CA, USA)</td><td>TF-200-R-S</td><td>Stérile</td></tr><tr><td>Embouts de pipette filtrés (P1000)</td><td>Axygen (Union City, CA, USA)</td><td>TF-1000-R-S</td><td>Stérile</td></tr><tr><td>Plat de culture P60</td><td>Corning (Corning, NY, USA)</td><td>430166</td><td>Traité pour la culture de tissus</td></tr><tr><td>Plat de 48 puits</td><td>Corning (Corning, NY, USA)</td><td>3527</td><td>Traité pour la culture de tissus</td></tr><tr><td>Papier filtre stérile</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>Élimination des graisses et support de dissection</td></tr><tr><td>Milieu DMEM/F-12</td><td>Gibco, Thermo Fisher Scientific (Waltham, MA, USA)</td><td>11320033</td><td>Formulation 1:1</td></tr><tr><td>Sérum bovin foetal (FBS)</td><td>Gibco, Thermo Fisher Scientific (Waltham, MA, USA)</td><td>10082147</td><td>Inactivé par la chaleur</td></tr><tr><td>Supplément ITS</td><td>Gibco, Thermo Fisher Scientific (Waltham, MA, USA)</td><td>41400045</td><td>100X</td></tr><tr><td>Supplément GlutaMAX</td><td>Gibco, Thermo Fisher Scientific (Waltham, MA, USA)</td><td>35050061</td><td>100X</td></tr><tr><td>Pénicilline-Streptomycine (100X)</td><td>Gibco, Thermo Fisher Scientific (Waltham, MA, USA)</td><td>15140122</td><td>Antibiotique</td></tr><tr><td>PBS 1X</td><td>Gibco, Thermo Fisher Scientific (Waltham, MA, USA)</td><td>10010023</td><td>pH 7,4</td></tr><tr><td>Collagénase de type I</td><td>Gibco, Thermo Fisher Scientific (Waltham, MA, USA)</td><td>17100-017</td><td>Digestion des tissus</td></tr><tr><td>DNase I</td><td>Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA)</td><td>DN25-1</td><td>Digestion des tissus</td></tr><tr><td>Angiotensine II (Ang II)</td><td>Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA)</td><td>A9525</td><td>Stimulation hormonale</td></tr><tr><td>Hormone adrénocorticotrope (ACTH)</td><td>Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA)</td><td>A0298</td><td>Stimulation hormonale</td></tr><tr><td>Forskoline</td><td>Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA)</td><td>F6886</td><td>Stimulation de l'AMPc</td></tr><tr><td>Chlorure de potassium (KCl)</td><td>Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA)</td><td>P9541</td><td>Stimulation de l'aldostérone</td></tr><tr><td>Chlorure de sodium (NaCl)</td><td>Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA)</td><td>S7653</td><td>Contrôle du véhicule</td></tr><tr><td>Petites ciseaux chirurgicaux</td><td>Fine Science Tools (Foster City, CA, USA)</td><td>14060-09</td><td>Dissection</td></tr><tr><td>Scalpel avec lame jetable</td><td>Fine Science Tools (Foster City, CA, USA)</td><td>10003-12</td><td>Microdissection</td></tr><tr><td>Pince fine</td><td>Fine Science Tools (Foster City, CA, USA)</td><td>11252-00</td><td>Dissection</td></tr><tr><td>Pince incurvée</td><td>Fine Science Tools (Foster City, CA, USA)</td><td>11251-10</td><td>Dissection</td></tr><tr><td>Hotte à flux laminaire</td><td>Thermo Fisher Scientific (Waltham, MA, USA)</td><td>N/A</td><td>Traitement des tissus stériles</td></tr><tr><td>Incubateur</td><td>Thermo Fisher Scientific (Waltham, MA, USA)</td><td>N/A</td><td>Culture cellulaire</td></tr><tr><td>Centrifugeuse</td><td>Eppendorf (Hamburg, Germany)</td><td>N/A</td><td>Péletat cellulaire</td></tr><tr><td>Chambre de comptage Neubauer</td><td>Hausser Scientific (Horsham, PA, USA)</td><td>1490</td><td>Comptage cellulaire</td></tr><tr><td>Tampon de lyse et d'extraction RIPA</td><td>Thermo Fisher Scientific (Waltham, MA, USA)</td><td>89901</td><td>Extraction de protéines</td></tr><tr><td>Cocktail d'inhibiteurs de protéase Halt</td><td>Thermo Fisher Scientific (Waltham, MA, USA)</td><td>87786</td><td>Extraction de protéines</td></tr><tr><td>Dismembrateur sonique Fisherbrand Modèle 120</td><td>Thermo Fisher Scientific (Waltham, MA, USA)</td><td>FB120</td><td>Sonication</td></tr><tr><td>Système RIA</td><td>Tecan (M&auml;nnedorf, Switzerland)</td><td>MG13051</td><td>Quantification des hormones</td></tr><tr><td>Compteur automatique Cobra II Gamma</td><td>Berthold Technologies (Bad Wildbad, Germany)</td><td>N/A</td><td>Mesure de la radioactivité</td></tr><tr><td>Kit ELISA pour la corticostérone (96 puits)</td><td>Thermo Fisher Scientific (Waltham, MA, USA)</td><td>55-CORMS-E01</td><td>Mesure des hormones</td></tr><tr><td>Montant anti-évanouissement ProLong Gold</td><td>Thermo Fisher Scientific (Waltham, MA, USA)</td><td>P36930</td><td>Milieu de montage</td></tr><tr><td>Anticorps primaire anti-Dab2 de souris</td><td>BD Biosciences (San Jose, CA, USA)</td><td>610464</td><td>Anticorps primaire</td></tr><tr><td>Anticorps primaire anti-GFP de poulet</td><td>Aves Labs (Tigard, OR, USA)</td><td>GFP-1020</td><td>Anticorps primaire</td></tr><tr><td>Anticorps primaire anti-RFP de lapin</td><td>Rockland Immunochemicals (Limerick, PA, USA)</td><td>600-401-379</td><td>Anticorps primaire</td></tr><tr><td>Anticorps secondaire Alexa Fluor 594 anti-sour</td><td>Invitrogen (Carlsbad, CA, USA)</td><td>A-11005</td><td>Anticorps secondaire</td></tr><tr><td>Anticorps secondaire Alexa Fluor 594 anti-poulet</td><td>Invitrogen (Carlsbad, CA, USA)</td><td>A-11042</td><td>Anticorps secondaire</td></tr><tr><td>Anticorps secondaire Alexa Fluor 647 anti-lapin</td><td>Invitrogen (Carlsbad, CA, USA)</td><td>A-21244</td><td>Anticorps secondaire</td></tr><tr><td>Anticorps secondaire Alexa Fluor 488 anti-sour</td><td>Thermo Fisher Scientific (Waltham, MA, USA)</td><td>A-11001</td><td>Anticorps secondaire</td></tr><tr><td>Système de microscope EVOS</td><td>Thermo Fisher Scientific (Waltham, MA, USA)</td><td>N/A</td><td>Imagerie</td></tr><tr><td>TRI Reagent</td><td>Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA)</td><td>T9424</td><td>Extraction d'ARN</td></tr><tr><td>Kit Direct-zol RNA</td><td>Zymo Research (Irvine, CA, USA)</td><td>R2050</td><td>Purification d'ARN</td></tr><tr><td>NanoDrop ND-1000</td><td>Thermo Fisher Scientific (Waltham, MA, USA)

Établissement de cultures primaires enrichies en zone à partir du cortex surrénalen de la souris

Establishment of Zone-Enriched Primary Cultures from the Mouse Adrenal Cortex

Établissement et caractérisation de cultures cellulaires surrénales primaires enrichies en zone Des cultures cellulaires surrénales primaires ont été établies avec succès à partir de l’OF, enrichies pour les cellules zG, et de l’IF, enrichies pour les cellules zF. Des images représentatives des cellules cultivées sont montrées dans la Figure 2A (OF–zG) et la Figure 2B (IF–zF). Pour évaluer l’enrichissement de...

The mouse adrenal gland is encapsulated by a mesenchymal cell layer (capsule) and contains an underlying cortex organized into distinct concentric zones ...

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JoVE Journal

Biology

Biologie

Surrénales médullaires systèmes de culture de cellules chromaffines sont extrêmement utiles pour l'étude de l'excitation-sécrétion de couplage dans une dans la mise en in vitro. Ce protocole illustre la méthode utilisée pour disséquer les glandes surrénales et ensuite isoler la région médullaire en enlevant le cortex surrénalien. La digestion de la moelle dans les cellules chromaffines unique est alors démontrée.

Souris d&#39;isolement surrénales cellules chromaffines

Cette vidéo décrit la méthode utilisée pour l'isolement de neuroprecursors du cortex en développement de souris embryonnaires. La procédure pour la suppression des embryons dans l'utérus, la dissection du tissu cortical, et digérant le cortex cérébral est démontré isolés.

Culture de la souris de neurones précurseurs de cellules souches

Cet article décrit un protocole pour l'isolement et l'entretien des cultures de fibroblastes primaires de la peau et les tissus pulmonaires de rongeurs sauvages.

Établir des cultures primaires de fibroblastes adultes à partir de rongeurs

Dans ce rapport, nous décrivons une méthode pour l'isolement et la culture de la niche de cellules progénitrices du rein d'embryon de souris qui peuvent être utilisées pour étudier les voies de signalisation réglementant cellules souches / progénitrices du rein en développement. Ces cellules cultivées sont très accessibles à de petites molécules et le traitement de protéines recombinantes, et surtout aussi à la transduction virale, ce qui permet une manipulation efficace des voies candidat.

Isolement et culture de cellules de la zone néphrogénique du rein d&#39;embryon de souris

Cet article décrit les méthodes pour estimer la population enrichie des cellules précurseurs des oligodendrocytes murins (OPC) en culture primaire, qui se différencier pour produire des oligodendrocytes matures (MCO). En outre, ce rapport décrit des techniques pour produire murin myélinisantes co-cultures par semis OPC de la souris sur un lit de neurites de souris dorsale neurones ganglion de la racine (DRGNs).

Dérivation des cultures enrichies en oligodendrocytes et Oligodendrocyte / Neuron myélinisantes co-cultures de post-natal tissus murins

Dans cette vidéo, nous décrivons la méthode pour obtenir une préparation pure d’astrocytes à partir de souris nouvellement nées.

Isolement des astrocytes : une méthode pour obtenir une préparation pure d’astrocytes corticaux de souris

Les astrocytes ont été reconnus pour être des cellules polyvalentes qui participent au processus biologiques fondamentaux qui sont essentiels pour le développement normal du cerveau et la fonction, et réparation du système nerveux central. Nous présentons ici une procédure rapide afin d'obtenir des cultures pures astrocytes de souris pour étudier la biologie de cette classe importante de cellules du système nerveux central.

Isolement et culture des astrocytes corticaux de souris

Nous décrivons ici un protocole détaillé pour la production simultanée de cultures de cellules de précurseur de neurones, soit comme des monocouches ou des neurosphères adhérentes, à partir de la zone sous-ventriculaire et le gyrus denté de souris individuels adultes.

Une souris, deux cultures: Isolement et culture des cellules souches adultes de neurones à partir des deux Neurogenic Zones de souris individuelle

L’épithélium pigmentaire rétinien (RPE) est un épithélium multifonctionnel de le œil. Nous présentons ici un protocole visant à mettre en place des cultures de cellules primaires provenant de la RPE murine.

Cultures de cellules primaires de l’épithélium pigmentaire rétinien de souris

Nous présentons ici une méthode pour isoler les glandes surrénales de souris, difficulté les tissus, leur section et effectuez l’immunofluorescence souillant.

Isolation, Fixation et l’Immunofluorescence imagerie des glandes surrénales de souris

L’hormone sécrétée par le cortex surrénalien est vital pour les animaux contre le stress et les maladies. Nous présentons ici un protocole à la culture le rat primaire les cellules surrénales. Ça pourrait être une bonne plateforme in vitro pour étudier les mécanismes du réactif d’intérêt dans la stéroïdogénèse surrénalienne et la biosynthèse des lipides.

Culture primaire de cellules Corticosurrénaliennes Rat et tests des fonctions Stéroïdogéniques

Apprenez à établir des cultures primaires enrichies en zones spécifiques à partir du cortex surrénalien de souris. Cette méthode permet d'étudier la physiologie de la zona glomerulosa et de la zona fasciculata.

Établissement de cultures primaires enrichies en zone à partir du cortex surrénalen de la souris

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