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<ol><li>Thomas, F. H., Vanderhyden, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oocyte-granulosa+cell+interactions+during+mouse+follicular+development%3A+regulation+of+kit+ligand+expression+and+its+role+in+oocyte+growth%5BTitle%5D)+AND+%22Reprod+Biol+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">Oocyte-granulosa cell interactions during mouse follicular development: regulation of kit ligand expression and its role in oocyte growth.</a> Reprod Biol Endocrinol. 4 (1), 19(2006).</li>
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<li>Tingen, C. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+macrophage+and+theca+cell-enriched+stromal+cell+population+influences+growth+and+survival+of+immature+murine+follicles+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Reproduction%22%5BJournal%5D)">A macrophage and theca cell-enriched stromal cell population influences growth and survival of immature murine follicles in vitro.</a> Reproduction. 141 (6), 809-820 (2011).</li>
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<li>Zink, N., Stock, A. -K., Vahid, A., Beste, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((On+the+neurophysiological+mechanisms+underlying+the+adaptability+to+varying+cognitive+control+demands%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Hum+Neurosci%22%5BJournal%5D)">On the neurophysiological mechanisms underlying the adaptability to varying cognitive control demands.</a> Front Hum Neurosci. 12, 411(2018).</li>
<li>Zhao, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organoids%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Methods+Primers%22%5BJournal%5D)">Organoids.</a> Nat Rev Methods Primers. 2 (1), 94(2022).</li>
<li>Yang, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organoids%3A+the+current+status+and+biomedical+applications%5BTitle%5D)+AND+%22MedComm%22%5BJournal%5D)">Organoids: the current status and biomedical applications.</a> MedComm. 4 (3), e274(2023).</li>
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<li>Pierson Smela, M. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Directed+differentiation+of+human+iPSCs+to+functional+ovarian+granulosa-like+cells+via+transcription+factor+overexpression%5BTitle%5D)+AND+%22eLife%22%5BJournal%5D)">Directed differentiation of human iPSCs to functional ovarian granulosa-like cells via transcription factor overexpression.</a> eLife. 12, e83291(2023).</li>
<li>Dipali, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Self-organizing+ovarian+somatic+organoids+preserve+cellular+heterogeneity+and+reveal+cellular+contributions+to+ovarian+aging%5BTitle%5D)+AND+%22Aging+Cell%22%5BJournal%5D)">Self-organizing ovarian somatic organoids preserve cellular heterogeneity and reveal cellular contributions to ovarian aging.</a> Aging Cell. 25 (1), e70333(2026).</li>
<li>Di Nisio, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Silk-ovarioids%3A+establishment+and+characterization+of+a+human+ovarian+primary+cell+3D-model+system%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Reprod+Open%22%5BJournal%5D)">Silk-ovarioids: establishment and characterization of a human ovarian primary cell 3D-model system.</a> Hum Reprod Open. 2025 (3), hoaf042(2025).</li>
<li>Nikanfar, S., Leonel, E. C. R., Damdimopoulou, P., Flaws, J. A., Amorim, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+phthalate+exposure+on+human+ovarian+extracellular+matrix+composition%3A+insights+from+a+3D+spheroid+model%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Res%22%5BJournal%5D)">Effects of phthalate exposure on human ovarian extracellular matrix composition: insights from a 3D spheroid model.</a> Environ Res. 279, 121797(2025).</li>
<li>Briley, S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reproductive+age-associated+fibrosis+in+the+stroma+of+the+mammalian+ovary%5BTitle%5D)+AND+%22Reproduction%22%5BJournal%5D)">Reproductive age-associated fibrosis in the stroma of the mammalian ovary.</a> Reproduction. 152 (3), 245-260 (2016).</li>
<li>Converse, A., Zaniker, E. J., Amargant, F., Duncan, F. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recapitulating+folliculogenesis+and+oogenesis+outside+the+body%3A+encapsulated+in+vitro+follicle+growth%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Reprod%22%5BJournal%5D)">Recapitulating folliculogenesis and oogenesis outside the body: encapsulated in vitro follicle growth.</a> Biol Reprod. 108 (1), 5-22 (2023).</li>
<li>Dean, M., Jin, V., Russo, A., Lantvit, D. D., Burdette, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exposure+of+the+extracellular+matrix+and+colonization+of+the+ovary+in+metastasis+of+fallopian-tube-derived+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Carcinogenesis%22%5BJournal%5D)">Exposure of the extracellular matrix and colonization of the ovary in metastasis of fallopian-tube-derived cancer.</a> Carcinogenesis. 40 (1), 41-51 (2019).</li>
<li>Charalambous, C., Webster, A., Schuh, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aneuploidy+in+mammalian+oocytes+and+the+impact+of+maternal+ageing%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Mol+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Aneuploidy in mammalian oocytes and the impact of maternal ageing.</a> Nat Rev Mol Cell Biol. 24 (1), 27-44 (2023).</li>
<li>Rowley, J. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Low+molecular+weight+hyaluronan+induces+an+inflammatory+response+in+ovarian+stromal+cells+and+impairs+gamete+development+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Low molecular weight hyaluronan induces an inflammatory response in ovarian stromal cells and impairs gamete development in vitro.</a> Int J Mol Sci. 21 (3), 1036(2020).</li>
<li>Amargant, F., Vieira, C., Pritchard, M. T., Duncan, F. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Systemic+low-dose+anti-fibrotic+treatment+attenuates+ovarian+aging+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Geroscience%22%5BJournal%5D)">Systemic low-dose anti-fibrotic treatment attenuates ovarian aging in the mouse.</a> Geroscience. 47 (3), 3475-3495 (2024).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>0.2 &mu;m, Polyethersulfone syringe filter</td><td>Corning</td><td>431229</td><td></td></tr><tr><td>1.5 mL microcentrifuge tubes</td><td>MIDSCI</td><td>PR-MCT15</td><td></td></tr><tr><td>100 mL glass beaker</td><td>Fisherbrand</td><td>FB100100</td><td></td></tr><tr><td>100 mm Petri dishes</td><td>Corning</td><td>351029</td><td></td></tr><tr><td>15 mL conical tubes</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>339651&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>24-well plates (TC-treated)</td><td>Corning</td><td>353047</td><td></td></tr><tr><td>28-gauge insulin needles</td><td>Exel International</td><td>26027</td><td></td></tr><tr><td>35 mm Petri dishes</td><td>Corning</td><td>351008</td><td></td></tr><tr><td>3&beta;-HSD antibody</td><td>Cosmo Bio</td><td>K0607</td><td>1:1000</td></tr><tr><td>4% Paraformaldehyde</td><td>Electron Microscopy Sciences</td><td>1574100</td><td></td></tr><tr><td>40 &micro;m cell strainer</td><td>Corning</td><td>431750</td><td></td></tr><tr><td>45 mm watch glass</td><td>Electron Microscopy Sciences</td><td>7054345</td><td></td></tr><tr><td>50 mL concial tubes</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>339652&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>60 mL sterile syringe</td><td>Air-Tite</td><td>ML60</td><td></td></tr><tr><td>60 mm TC-treated plates</td><td>Corning</td><td>353037</td><td></td></tr><tr><td>6-well plates (TC-treated)</td><td>Corning</td><td>353046</td><td></td></tr><tr><td>Agarose</td><td>Hoefer</td><td>GR140-500</td><td>Gel strength >1200 g/cm2; Gel Temperature 36 &deg;C</td></tr><tr><td>Autoclave sterilization pouch</td><td>Fisherbrand</td><td>01-812-55</td><td></td></tr><tr><td>Biotinylated Goat Anti-Mouse IgG</td><td>Vector Laboratories</td><td>BA-9200-1.5</td><td>1:200</td></tr><tr><td>Biotinylated Goat Anti-Rabbit IgG</td><td>Vector Laboratories</td><td>PK-6101</td><td>1:200</td></tr><tr><td>Biotinylated Goat Anti-Rat IgG</td><td>Vector Laboratories</td><td>BA-9400-1.5</td><td>1:100</td></tr><tr><td>Bluing reagent</td><td>Fisherbrand</td><td>23-245681</td><td></td></tr><tr><td>Centrifuge with swing bucket rotor for 50 mL conical tubes</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>Sorvall X1R Pro-MD</td><td></td></tr><tr><td>Class II biosafety cabinet</td><td>The Baker Company</td><td>SG403A</td><td></td></tr><tr><td>Cleaved Caspase-3 (CC3) antibody</td><td>Cell Signaling Technology</td><td>9579T</td><td>1:250</td></tr><tr><td>CO2 incubator</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>Heracell VIOS 160i CO2 Incubator</td><td></td></tr><tr><td>Collagenase, Type IV, powder</td><td>Gibco, Fisher Scientific</td><td>17-104-019</td><td></td></tr><tr><td>C-Series Mouse Cytokine Antibody Array 3 Kit</td><td>RayBiotech</td><td>AAM-CYT-3-8</td><td></td></tr><tr><td>Cytoseal XYL</td><td>Epredia</td><td>83124</td><td></td></tr><tr><td>Deoxyribonuclease I from bovine pancreas</td><td>Millipore Sigma</td><td>DN25-100MG</td><td>Dnase I</td></tr><tr><td>Dissecting microscissors</td><td>World Precision Instruments</td><td>WPI-14003</td><td></td></tr><tr><td>Dissecting scissors</td><td>World Precision Instruments</td><td>WPI-15922</td><td></td></tr><tr><td>Dissection microscope</td><td>Leica</td><td>MZ9.5, S9 series</td><td></td></tr><tr><td>DPBS, no calcium, no magnesium</td><td>Gibco, Fisher Scientific</td><td>14-190-250</td><td>pH 7.0&ndash;7.3</td></tr><tr><td>Eosin</td><td>Fisherbrand</td><td>23-314631</td><td></td></tr><tr><td>F4/80 antibody</td><td>Bio-Rad</td><td>MCA497G</td><td>1:50</td></tr><tr><td>Fetal Bovine Serum, certified, heat inactivated, United States</td><td>Gibco, ThermoFisher Scientific</td><td>10082147</td><td></td></tr><tr><td>Fine-tipped dissecting forceps</td><td>World Precision Instruments</td><td>WPI-14098</td><td></td></tr><tr><td>FOXL2 antibody</td><td>Abcam</td><td>ab246511</td><td>1:200</td></tr><tr><td>Graefe Forceps</td><td>Fine Science Tools</td><td>1105010</td><td></td></tr><tr><td>Hematoxylin</td><td>EK Industries</td><td>EKI 47971GL</td><td></td></tr><tr><td>Hemocytometer</td><td>MedOne</td><td>DHCN015</td><td></td></tr><tr><td>Imaging System</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>EVOS FL Auto</td><td></td></tr><tr><td>IntestiCult Organoid Growth Medium (Mouse)</td><td>STEMCELL Technologies</td><td>06005</td><td>Basal medium, Supplements 1 and 2</td></tr><tr><td>Laminar flow hood</td><td>IVFtech</td><td>IVFtech sterile workstation</td><td></td></tr><tr><td>Leibovitz's L-15 Medium</td><td>Gibco, Fisher Scientific</td><td>11415114</td><td></td></tr><tr><td>Microscope slides</td><td>Mercedes Scientific</td><td>MER 7255/90/WH/CC</td><td></td></tr><tr><td>MicroTissues 3D Petri Dish micro-mold spheroids</td><td>Millipore Sigma</td><td>Z764043-6EA</td><td>Silicone casts for agarose micromolds</td></tr><tr><td>Modified Davidson's Fixative</td><td>Electron Microscopy Sciences</td><td>6413350</td><td></td></tr><tr><td>OVCAR8-RFP cells</td><td></td><td></td><td>Gift from Joanna Burdette PhD, University of Illinois Chicago</td></tr><tr><td>Penicillin-Streptomycin</td><td>Millipore Sigma</td><td>P4333-100ML</td><td></td></tr><tr><td>Picrosirius Red staining solution</td><td>StatLab</td><td>STPSRPT</td><td></td></tr><tr><td>RPMI 1640 Medium (ATCC modification)</td><td>Gibco, Fisher Scientific</td><td>A1049101</td><td></td></tr><tr><td>Tabletop centrifuge</td><td>Eppendorf</td><td>Centrifuge 5430 R&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Trypan blue</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>T10282</td><td></td></tr><tr><td>Trypsin-EDTA (0.05%), phenol red</td><td>Gibco, ThermoFisher Scientific</td><td>25300054</td><td></td></tr><tr><td>Vimentin antibody</td><td>Cell Signaling Technology</td><td>5741S</td><td>1:100</td></tr><tr><td>&alpha;MEM, GlutaMAX Supplement, no nucleosides</td><td>Gibco, Fisher Scientific</td><td>32561102</td><td></td></tr></tbody></table>

sonder le microenvironnement ovarien : méthodes d’isolement, culture 2d et culture organoïde des cellules somatiques ovariennes de souris

Probing the Ovarian Microenvironment: Methods for Isolation, 2D Culture, and Organoid Culture of Mouse Ovarian Somatic Cells

Sonder le microenvironnement ovarien : méthodes d’isolement, culture 2D et culture organoïde des cellules somatiques ovariennes de souris

The ovary consists of heterogeneous populations of somatic cells, both within the follicle and the surrounding stroma, which are critical to support ...

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Research

Recherche

JoVE Journal

Developmental Biology

Biologie du développement

Culture de cellules normales dans leurs trois dimensions contexte représente une méthode alternative pour étudier les événements précoces nécessaires pour la transformation cellulaire et la tumorigenèse. Cette méthode est utilisée pour cultiver des cellules ovariennes normales et l'oviducte pour étudier les événements précoces de la formation de cancer de l'ovaire.

Les hydrogels d&#39;alginate de culture d&#39;organe en trois dimensions des ovaires et des trompes

Ce protocole décrit la culture primaire / co-culture de tissu ovarien de la souris, en utilisant des ovaires de souris nouveau-nées et des follicules ovariens provenant de souris individuelles prépubères. Les techniques de culture de soutenir le développement d'une manière hautement physiologique, ce qui permet étude de l'effet d'agents extrinsèques sur l'ovaire, et des interactions entre les follicules ovariens.

Culture et co-culture de souris ovaires et follicules ovariens

Ici, nous présentons un protocole pour construire un modèle in vitro tridimensionnel de la muqueuse de la cavité péritonéale, composé de cellules mésothéliales humaines primaires et de fibroblastes superposés avec une matrice extracellulaire, comme outil pour étudier l’adhésion, l’invasion et la prolifération des cellules cancéreuses de l’ovaire.

Modélisation des étapes précoces de cancer de l&#39;ovaire Diffusion dans une culture organotypique de la cavité péritonéale humain

Nous présentons ici un protocole visant à quantifier les follicules dans les ovaires de jeunes souris sans sectionnement serial. Selon immunofluorescence de la totalité de l’organe et de tissus de compensation, sectionnant physique est remplacé par sectionnement optique. Cette méthode de préparation des échantillons et visualisation maintient l’intégrité de l’organe et facilite la quantification automatique des cellules spécifiques.

Toute monture Immunofluorescence et Quantification de follicule de souris cultivées ovaires

Les cultures de tissus ovariens peuvent être utilisés comme modèles de l’atrésie folliculaire développement, ovulation et follicule et indiquer les mécanismes de régulation de processus ovariens dynamiques.

Culture de tissus ovariens pour visualiser les phénomènes dans les ovaires de souris

La culture in vitro du cortex ovarien bovin et l’effet du régime nutritionnel Stair-step sur le microenvironnement ovarien sont présentés. Des morceaux de cortex ovarien ont été cultivés pendant sept jours et les stéroïdes, les cytokines et les stades folliculaires ont été évalués. Le traitement diététique Stair-Step avait une augmentation de la stéroïdogenèse entraînant une progression des follicules en culture.

Culture de tissu du cortex ovarien bovin

Ce protocole offre un cadre systématique pour l’établissement d’organoïdes du cancer de l’ovaire à différents stades de la maladie et relève les défis de la variabilité spécifique à la patiente pour augmenter le rendement et permettre une expansion robuste à long terme pour des applications ultérieures. Il comprend des étapes détaillées pour le traitement des tissus, l’ensemencement, l’ajustement des exigences en matière de milieux et la coloration par immunofluorescence.

Stratégie de mise en banque d’organoïdes du cancer de l’ovaire : Aborder l’hétérogénéité interpatiente entre les sous-types histologiques et les stades de la maladie

Ce protocole décrit l’établissement d’organoïdes tissulaires tridimensionnels (3D) à partir de cellules primaires d’épithélium de surface ovarienne humaine (hOSE). Le protocole comprend l’isolement de l’hOSE à partir d’ovaires fraîchement collectés, l’expansion cellulaire de l’hOSE, les procédures de cryoconservation-décongélation et la dérivation d’organoïdes. L’immunofluorescence, l’analyse quantitative et la démonstration de l’utilité en tant que plate-forme de dépistage sont incluses.

Les organoïdes de l’épithélium de surface de l’ovaire humain comme plate-forme pour étudier la régénération des tissus

Ce protocole détaille le développement de modèles murins de carcinome séreux de l’ovaire séreux de haut grade (HGSOC) in vitro et in vivo. De la dérivation d’organoïdes murins de trompes de Fallope, leur modification génétique pour récapituler la génétique HGSOC humaine, et leur introduction dans la bourse ovarienne de souris syngéniques pour le développement in vivo de tumeurs.

Développement de lignées organoïdes dérivées de souris à partir de cellules épithéliales de trompes de Fallope pour la modélisation du carcinome de l’ovaire séreux de haut grade

Nous décrivons des méthodes de culture des follicules ovariens dans un nouveau moule d’agarose sans échafaudage qui complète la gamétogenèse in vitro .

Production et utilisation de moules d’agarose personnalisables pour la culture de follicules ovariens de souris sans échafaudage

Northwestern University, Chicago.  Nous décrivons des méthodes pour isoler les cellules somatiques ovariennes de souris à partir d’une fraction enrichie en strome de l’ovaire et pour générer des organoïdes somatiques ovariens de souris en utilisant une approche sans échafaudage.

Sonder le microenvironnement ovarien : méthodes d’isolement, culture 2D et culture organoïde des cellules somatiques ovariennes de souris

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