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<ol>
	<li>Massier L, et al. An integrated single cell and spatial transcriptomic map of human white adipose tissue. Nat Commun. 2023;14(1):1438. doi:10.1038/s41467-023-36983-2.</li>
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</ol>

```html
<table><tbody><tr><td>BD OptEIA Mouse TNF ELISA Kit</td><td></td><td>BD Biosciences</td><td>560478</td></tr><tr><td>Bodipy 558/568 C12</td><td>Flow cytometry: 1:10000; Staining: 1:2000</td><td>Invitrogen</td><td>D3835</td></tr><tr><td>Bovine Serum Albumin</td><td>3%</td><td>Sigma</td><td>A9647</td></tr><tr><td>CD107a (LAMP1) &ndash; AF647</td><td>Staining: 1:100; Flow cytometry: 1:200</td><td>BioLegend</td><td>121610</td></tr><tr><td>CD11c &ndash; BV605</td><td>Flow cytometry: 1:100</td><td>BioLegend</td><td>117334</td></tr><tr><td>CD16/32</td><td>Flow cytometry: 1:100</td><td>Invitrogen</td><td>14-0161-82</td></tr><tr><td>CD301 &ndash; AF647</td><td>Flow cytometry: 1:50</td><td>Bio-Rad</td><td>MCA2392A647</td></tr><tr><td>CD36 &ndash; PE</td><td>Flow cytometry: 1:400</td><td>BioLegend</td><td>102606</td></tr><tr><td>CD45 &ndash; PE</td><td>Flow cytometry: 1:100</td><td>BD Pharmingen</td><td>555483</td></tr><tr><td>Click-iT Plus EdU Alexa Fluor 350 Flow Cytometry Assay Kit</td><td>EdU: 5 &micro;M</td><td>Invitrogen</td><td>C10632</td></tr><tr><td>Clodronate Liposomes</td><td>500 &micro;g/ml clodronate</td><td>Liposoma</td><td></td></tr><tr><td>Collagenase Type 2</td><td>1 mg/ml, 315 U/mg</td><td>Worthington</td><td>LS004176</td></tr><tr><td>CyQUANT LDH Cytotoxicity Assay Kit</td><td></td><td>Invitrogen</td><td>C20301</td></tr><tr><td>DAPI</td><td>Flow cytometry: 0.2 &micro;g/ml</td><td>Thermo Fisher</td><td>62248</td></tr><tr><td>Ethanol</td><td>70%</td><td>Carl Roth</td><td>T913.1</td></tr><tr><td>F4/80 &ndash; AF647</td><td>Flow cytometry: 1:100</td><td>Invitrogen</td><td>MF48021</td></tr><tr><td>F4/80 &ndash; PE-Cy7</td><td>Flow cytometry: 1:200</td><td>Invitrogen</td><td>25-4801-82</td></tr><tr><td>Fetal Calf Serum</td><td>1.10</td><td>Gibco</td><td>10270106</td></tr><tr><td>Fetal Calf Serum</td><td>1.20</td><td>Gibco</td><td>10270106</td></tr><tr><td>HBSS (-Mg, -Ca)</td><td></td><td>Gibco</td><td>14170138</td></tr><tr><td>HEPES</td><td>13 mM</td><td>Roth</td><td>HN77.2</td></tr><tr><td>Hoechst 33342</td><td>1:10,000</td><td>Life Technologies</td><td>H3570</td></tr><tr><td>LysoTracker &ndash; AF647</td><td>Flow cytometry: 1:20000; Staining: 1:10000</td><td>Invitrogen</td><td>H34477</td></tr><tr><td>MAC-2</td><td>Staining: 1:1000</td><td>Cedarlane</td><td>CL8942AP</td></tr><tr><td>Millicell Cell Culture Insert, 30 mm, hydrophilic PTFE, 0.4 &micro;m</td><td></td><td>Merck Millipore</td><td>PICM0RG50</td></tr><tr><td>PBS (-Mg, -Ca)</td><td></td><td>Gibco</td><td>14190169</td></tr><tr><td>PBS (-Mg, -Ca)</td><td></td><td>Gibco</td><td>14190169</td></tr><tr><td>Penicillin/Streptomycin (10,000 U/ml)</td><td>0.111111111</td><td>Gibco</td><td>11548876</td></tr><tr><td>Penicillin/Streptomycin (10,000 U/ml)</td><td>0.111111111</td><td>Gibco</td><td>11548876</td></tr><tr><td>Perilipin</td><td>2 &micro;g/ml</td><td>Abcam</td><td>ab3526</td></tr><tr><td>Plexxicon 5622</td><td>40 &micro;M</td><td>Plexxicon Inc.</td><td>HY-114153</td></tr><tr><td>RPMI-Media 1640</td><td>with 11 mM glucose</td><td>Sigma Aldrich</td><td>R8758</td></tr><tr><td>RPMI-Media 1640</td><td></td><td>Sigma</td><td>R8758</td></tr><tr><td>TC-Insert for 6-well plates</td><td></td><td>Sarstedt</td><td>83.3930.040</td></tr><tr><td>TPP tissue culture test plate 6</td><td></td><td>TPP</td><td>92006</td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>1%</td><td>Carl Roth</td><td>3051.2</td></tr><tr><td>Zinc chloride</td><td>0.8 mM</td><td>Sigma</td><td>Z0152</td></tr><tr><td>Zinc formaline</td><td></td><td>Polyscience</td><td>21516-3.75</td></tr></tbody></table>
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un modèle murin ex vivo pour l’inflammation du tissu adipeux riche en graisses

An ex vivo Mouse Model for High-Fat Diet-Like Adipose Tissue Inflammation

Un modèle murin ex vivo pour l’inflammation du tissu adipeux riche en graisses

This protocol describes an ex vivo mouse model that recapitulates selected cellular and inflammatory features observed in visceral adipose tissue (VAT) ...

We are investigating inflammation in adipose tissue, focusing on the role of adipose tissue macrophages in this process. This model can be applied in a great variety of adipose tissue inflammation research where the focus is on the adipose tissue itself. To begin, prepare the culture medium under sterile conditions.Warm the culture medium and sterile PBS to 37 degrees Celsius. Clean all equipment and the work area inside the tissue culture hood with 70%ethanol. After placing the sacrificed animal in a glass beaker containing 70%ethanol, wipe the exterior of the glass beaker with ethanol and transfer it into the tissue culture hood.Using blunt forceps, place the mouse in a supine position, and pin it to a dissection board. Then, add a thin layer of pre-warmed PBS to a Petri dish. Change to a fresh pair of gloves.Using forceps, lift the lower abdominal skin, and make a small horizontal incision using scissors to open the abdominal cavity. Make a vertical incision extending from the initial cut to expose the internal organs. For male mice, carefully lift the gonadal fat pad, which is attached to the epididymis and testis.Make a cut above the epididymis. Alternatively, excise the epidi

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Research

Recherche

JoVE Journal

Immunology and Infection

Immunologie et infection

Le tissu adipeux (AT) est un site d'activation intense des cellules immunitaires et de l'interaction. Presque toutes les cellules du système immunitaire sont présents dans A et leurs rapports sont modifiés par l'obésité. Une bonne isolation, la quantification et la caractérisation des AT populations de cellules immunitaires sont essentielles pour la compréhension de leur rôle dans la maladie immunometabolic.

Isolement de tissu adipeux cellules immunitaires

Le tissu adipeux (AT) peut influencer l’homéostasie de l’ensemble du corps, il est donc important de comprendre les mécanismes moléculaires de la différenciation et de la fonction des adipocytes. Nous fournissons un protocole pour acquérir de nouvelles connaissances sur ces processus en analysant l’homéostasie des adipocytes, la différenciation et l’exposition à l’hypoxie comme modèle de l’apoptose adipocytaire induite.

Mécanisme de règlement des numéros adipocytes dans les organismes adultes grâce à la différenciation et l&#39;apoptose homéostasie

On décrit un modèle d’animal de rongeur simple et fiable pour la stéatohépatite non alcoolisée (NASH), obtenu par le logement non-SPF des animaux et l’administration d’un régime spécifique riche en graisses. Nous décrivons l’identification des sous-ensembles de cellules immunitaires hépatiques et adipeuses pour récapituler les conditions immunologiques humaines en exposant les souris aux germes de l’environnement.

Un modèle avancé de murine pour la stéatohépatite non alcoolisée en association avec le diabète de type 2

Nous décrivons un système de culture in vitro de matrice-adipocyte extracellulaire humain 3D qui permet la dissection des rôles de la matrice et des adipocytes en contribuant au phénotype métabolique de tissu adipeux.

Un modèle de culture matrix-adipocyte extracellulaire humaine 3D pour étudier matrix-Cell Metabolic Crosstalk

Ce protocole décrit l’approche technique permettant d’isoler des sous-populations de cellules stromales adipogènes et fibro-inflammatoires à partir de dépôts de tissu adipeux blanc (WAT) intra-abdominal murin par tri cellulaire activé par fluorescence ou séparation immunomagnétique des billes.

Isolement de sous-populations de cellules stromales adipogènes et fibro-inflammatoires à partir de dépôts adipeux intra-abdominaux murins

Ce protocole décrit l’isolement des préadipocytes de souris de la graisse sous-cutanée, leur différenciation en adipocytes matures et l’induction de la résistance à l’insuline. L’action de l’insuline est évaluée par la phosphorylation/activation des membres de la voie de signalisation de l’insuline par transfert Western. Cette méthode permet de déterminer directement la résistance/sensibilité à l’insuline dans les adipocytes primaires.

Adipocytes de souris différenciés en culture primaire: un modèle de résistance à l’insuline

La lipolyse des triglycérides dans les adipocytes est un processus métabolique important entraînant la libération d’acides gras libres et de glycérol. Ici, nous fournissons un protocole détaillé pour mesurer la lipolyse basale et stimulée dans les adipocytes et le tissu adipeux ex vivo de souris.

Mesure du taux de lipolyse dans le tissu adipeux murin ex vivo et les préadipocytes primaires différenciés in vitro

Ce protocole décrit l’isolement semi-automatisé de la fraction vasculaire stromale (SVF) du tissu adipeux murin pour obtenir des préadipocytes et obtenir une différenciation adipocytaire in vitro. L’utilisation d’un dissociateur tissulaire pour la digestion de la collagénase réduit la variation expérimentale et augmente la reproductibilité.

Isolement semi-automatisé de la fraction vasculaire stromale à partir de tissu adipeux blanc murin à l’aide d’un dissociateur tissulaire

Ce protocole présente une approche détaillée de la réplication d’un modèle murin d’insuffisance cardiaque induite par l’hyperlipidémie avec fraction d’éjection préservée (ICFEp). La conception combine l’administration du virus adéno-associé 9-troponine cardiaque, du récepteur des lipoprotéines de basse densité T (AAV9-cTnT-LDLR) et du poloxamer-407 (P-407).

Modèle murin d’insuffisance cardiaque induite par l’hyperlipidémie avec fraction d’éjection préservée

Schistosoma mansoni oeufs sont des stimulateurs efficaces du type T auxiliaire 2 (Th2) la réponse immunitaire, caractéristique d'une infection parasitaire, l'asthme et l'inflammation allergique. Ce protocole utilise S. mansoni œuf d'injection afin de générer un taux de CD4 Th2 induite par les cytokines réponse inflammatoire dans les poumons, caractérisée par la formation de granulomes pulmonaires autour de l'oeuf, l'éosinophilie et l'activation des macrophages alternative.

En utilisant des oeufs de<em&gt; Schistosoma mansoni</em&gt; En tant que<em&gt; In vivo</em&gt; Modèle de l&#39;inflammation pulmonaire induite par les helminthes

Leipzig University.  En utilisant un modèle explant ex vivo , de petits morceaux de la portion rostrale du tissu adipeux blanc viscéral provenant de souris maigres sont cultivés pendant 7 à 10 jours, permettant l’induction et l’étude de l’inflammation du tissu adipeux lors de l’alimentation riche en graisses.

Un modèle murin ex vivo pour l’inflammation du tissu adipeux riche en graisses

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