יצירת ניסויית מפרצת אבי העורקים הבטני Murine עם Elastase

Summary

וידאו זה מראה כיצד לגרום מפרצת אבי העורקים הבטני (AAA) בעכברים באמצעות עירוי intraluminal חולף של elastase הלבלב חזירי לתוך מגזר infrarenal של אבי העורקים בבטן. המודל יש את היכולת להוסיף תובנות לתוך pathobiology רחב של AAA בשל הופעתה של מהונדס רבים נוקאאוט בעכברים גנים.

Abstract

עירוי intraluminal חלוף של elastase הלבלב חזירי לתוך מגזר infrarenal של אבי העורקים בבטן הוא מודל החיה הנפוצה ביותר של מפרצת אבי העורקים הבטני (AAA) מאז זה תוארה לראשונה על ידי Anidjar ועמיתיו בחולדות. ¹ הרציונל הפיתוח שלה התבססה על אופי שיבשו של ואלסטין שנצפתה AAAS. מודל זה עכברוש שונתה כדי לייצר AAAS באזור infrarenal אבי העורקים של עכברים. ² מודל יש את היכולת להוסיף תובנה רחבה לתוך pathobiology של AAA בשל הופעתה של מהונדס רבים נוקאאוט בעכברים גנים. יתר על כן, היא פלטפורמה מעשית לבדוק סוכני טיפולית פוטנציאל AAA. בסרטון הזה, אנחנו מדגימים את הליך עירוי elastase AAA בשימוש במעבדה שלנו.

עכברים מורדמים באמצעות isoflurane 2.5%, ו laparotomy מבוצעת בתנאים סטריליים. Aortais בטן מבודד בסיוע stereomicroscope ההפעלה (לייקה). לאחר הצבת חיבורי אותיות זמני סביב האאורטה הפרוקסימלית ומ דיסטלי, aortotomy נוצר ב הסתעפות עם קצה מחט 30-מד. קטע חום מחודדות של צינורות פוליאתילן PE-10 הוא הציג דרך aortotomy ומאובטחת. לומן העורקים היא perfused לאחר מכן ב 100 מ"מ כספית עם סוג המכיל תמיסת מלח אני elastase חזירי הלבלב (4.5 U / mL: Sigma כימית ושות') במשך 5-15 דקות. לאחר הסרת הקטטר זלוף, aortotomy הוא תוקן ללא התכווצות של לומן.

Protocol

1. עכברים מורדמים עם בשאיפה isoflurane 2.0-3.0ml / ל '
2. הבטן היא מגולח מצוחצח עם אלכוהול בבטאדין.
3. העכבר מונח פרקדן על שדה הניתוח.
4. כפפות סטריליות שחוקים על ידי המנתח, ואת הכלים המשמשים כבר מעוקר עם מעקר חרוז חם.
5. חתך ארוך בבטן קו האמצע הוא עשה. תכולת הבטן הם חזר בו מחוץ הבטן עם גזה סטרילית לחשוף את אבי העורקים בבטן.
6. אבי העורקים בבטן מבודד ברמה של עורק הכליה משמאל ה....

Discussion

מחקרים קודמים ציין וריאציה משמעותית הרבה-to-הרבה בפיתוח AAA מ שונה ההכנות elastase מסחרי ^3. לכן, חשוב לעקוב אחר המון הייצור וכן יש קבוצות ביקורת מתאימות כדי לתעד את היכולת של התכשיר כדי לגרום AAAS.

מעניין, הרגישות פיתוח AAA במודל זה תלוי המתח העכבר משמש ^3. העכבר משמש הווידאו הנוכחי של זן C57Bl / 6 אשר יש התפתחות עקבית של AAA באמצעות פרוטוקול התווה. ריכוז Elastase ו / או זמן הדגירה יכול להיות.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
סוג I חזיר לבלב אלסטאז	ריאגנט	Sigma-Aldrich	E1250
צינורות פוליאתילן (PE-10)		BD Biosciences	427400
CHANGE-A-TIP		Bovie Medical Corporation	18010-00 (FST)	סכין צריבה
LEICA MZ6		Leica Microsystems		סטריאומיקרוסקופ
LEICA		Leica Microsystems		מצלמת USB
Image Pro Express גרסה 6.0		Media Cybernetics Inc.		תוכנה