התגובות של אלקטרו עצב סנסורי חוש הריח כדי odorants ניתן למדוד חרקים באמצעות הקלטות sensillum יחיד. במאמר זה הווידאו נדגים כיצד לבצע הקלטות sensillum אחת האנטנות של זבוב החומץ ( תסיסנית melanogaster) ואת palps לסתי של יתוש המלריה ( אנופלס gambiae).
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
מאמר שיטה
Sensillum הקלטות סינגל חרקים תסיסנית melanogaster ו אנופלס gambiae
במאמר זה
סיכום
תקציר
חוש הריח הוא חיוני חרקים כדי למצוא מזון, בני זוג, טורפים, אתרי ההטלה 3. חרקים עצב סנסורי חוש הריח (OSNs) מוקפים שערות חושית בשם sensilla, אשר מכסים את פני השטח של אברי חוש הריח. פני השטח של כל sensillum מכוסה נקבוביות זעירות, שדרכו odorants לעבור להתמוסס בתוך נוזל הנקרא לימפה sensillum, אשר מתרחץ הדנדריטים חושית של OSNs שוכנו sensillum נתון. דנדריטים OSN לבטא קולטן odorant (OR) חלבונים, אשר בתפקוד חרקים כמו ריח מגודרת תעלות יונים 4, 5. האינטראקציה של odorants עם מחדרי גדל או פוחת שיעור ירי הבסיס של OSN. זו הפעילות העצבית בצורה של פעולה פוטנציאלים מגלם את הייצוג הראשון של איכות, עוצמה, מאפיינים הזמני של odorant 6, 7.
לאור גישה קלה אלה שערות חושית, ניתן לבצע הקלטות תאיים מ OSNs אחד על ידי החדרת אלקטרודה לתוך ההקלטה הלימפה sensillum, בעוד אלקטרודה השוואתית ממוקם הלימפה של העין או הגוף של החרק. ב תסיסנית, sensilla הבית בין אחת לארבע OSNs, אבל בדרך כלל כל OSN מציג משרעת מאפיין ספייק. טכניקות ספייק מיון מאפשרים להקצות התגובות spiking OSNs אל הפרט. זה sensillum יחיד הקלטה (SSR) טכניקה מפקחת ההבדל בין פוטנציאל הלימפה sensillum לבין אלקטרודה השוואתית כמו קוצים חשמליים שנוצרים על ידי פעילות הקולטן על OSNs 1, 2, 8. שינויים במספר קוצים בתגובה odorant מייצגים את הבסיס התאי של ריח קידוד חרקים. כאן, אנו מתארים את שיטת ההכנה המשמש כיום במעבדה שלנו לבצע SSR על תסיסנית melanogaster ו gambiae אנופלס, ולהראות עקבות נציג המושרה על ידי odorants sensillum באופן ספציפי.
פרוטוקול
1. ריח דילולים
- רוב odorants מסיסים בשמן פרפין. עם זאת, DMSO או אתנול יכול לשמש גם ממיסים חלופיים ריחות מסוימים. הכן דילולים המתאים (למשל נפח 1:10: נפח: v: v) מ odorants טהור צלוחיות זכוכית. דילולים ריח רוב יציב בטמפרטורת החדר, אך תרכובות נדיפות גבוהה, עדיף לבצע דילולים עובדים על בסיס שבועי. Sensillum כל מגיב ריחות שונים בטווח ריכוז שונים. עבור תסיסנית, שולחן שימושי להסתכל למעלה עבור ריכוזים מתאים לשימוש עם sensillum נתון ניתן למצוא 6, 7.
לצורך ניסוי הווידאו, אנו משתמשים בשמן פרפין כביקורת ממס מתיל אצטט (10 -6 v: v בשמן פרפין) ו 1-octen-3-ol (10 -7 v: v בשמן פרפין) עבור תסיסנית ו אנופלס הקלטות, בהתאמה. - בעזרת מספריים, חותכים את הנייר לתוך כרומטוגרפיה 3 מ"מ x 5 רצועות ס"מ, כך שהם יתאימו בתוך pipettes פסטר.
- פיפטה 30 μL הריח הרצוי על רצועת נייר סינון להכניס אותו לתוך פיפטה מזכוכית. גזור ~ 3 ס"מ של קו צינור אוויר להכניס אותו לתוך הקצה הפתוח של פיפטה, לסגור אותו עם מחבר. מחבר משמש לאטום את פיפטה כי יצורף ואז צינורות אוויר לקו של משאבת האוויר כאשר הגיע הזמן לספק את ריח במהלך הניסוי.
2. משלוח ריח מערכת
- בעזרת מקדחה קטנה, חתך 10 מ"ל פלסטיק סרולוגיות פיפטה (למשל ב 4 מ"ל לציון) וליצור שני חורים (למשל מ"ל ב -1.5 ו -0.5 סימני מ"ל) אשר ישמשו כדי להחזיק את pipettes המכיל את הריחות. הוספת טיפ 200 פיפטה μL ב מצמד התיל להציג את מצמד אל הקצה הקהה של 10 מ"ל פיפטה. פיפטה ישמש כחלק ממערכת המסירה עבור odorants.
- צרף את פיפטה על מעמד מגנטי עם מלחציים פיפטה ומקם אותה ליד המיקרוסקופ.
3. Sharpening אלקטרודות
- כדי לחדד את האלקטרודות, להכין פתרון 0.5 M של אשלגן הידרוקסיד (KOH) ולסנן אותה להסיר חלקיקים (למשל באמצעות מסנן 45 מיקרומטר). קח מזרק 20 מ"ל ולעשות חור קטן (~ 2 מ"מ קוטר) באמצעות מחט על לסגור את הקיר עד קצה (~ 1 ס"מ מהקצה), שאליו מוכנס חוט חשמלי (איור 1A).
- מלאו את המזרק עם 0.5 M KOH, לצבוט אותו על דוכן תחת המיקרוסקופ, כך קצה ממוקם בתחום של תצוגה (איור 1B, C). הכנס את חוט חשמל לתוך החור קטן על הקיר מזרק (איור 1B), ולוודא כי תיל אינה ישירות מול הכניסה של המזרק. חיבור זה חוט הקתודה של אספקת מתח DC (למשל Heerbrugg Wild MTR32, ראה שיטות) או מוט של אספקת החשמל (למשל Wild Heerbrugg-הלפריקונים 990,018). צרף את פיר בעל אלקטרודה על micromanipulator המשתמש בצד ימין של המיקרוסקופ, ולצרף כבל חשמלי בבסיס של הפיר בעל אלקטרודה עם קליפ תנין. חבר את הכבל האנודה של אספקת מתח DC או הקוטב השני של אספקת החשמל (איור 1A).
- הכנס את חוט טונגסטן (~ 5 ס"מ אורך) לתוך מחזיק אלקטרודה, וצרף אותו פיר אלקטרודה בעל למניפולטור. הגדר את ספק הכוח V 6, והכנס את קצה החוט לתוך המזרק שוב ושוב כדי לחדד את זה, נזהר לפקח על קצה תחת מיקרוסקופ בתהליך (תרשים 1C). כדי לקבל אלקטרודה אידיאלי עבור הקלטה, במקום 90% אורכו בפתרון עד דק 1, למשוך אותו החוצה לאט. ואז להכניס רק ~ 50% האלקטרודה עד דקה נוספת של 30 וחזור על זה כדי לקבל את קצה החוט חידד (~ 10 פעמים).
קצה האלקטרודה אמור להיות בסדר מספיק כדי להיכנס sensillum, אך לא בסדר כדי לכופף כשזה נוגע בו במהלך ההקלטות (שלבים 6 ו 7). למרות צופה קצה האלקטרודה מתחת למיקרוסקופ לנתח בזמן שהוא חידד היא אינדיקציה טובה עובי שלה, רק להסתכל עליה במיקרוסקופ בהגדלה הקלטה גבוהה ייתן מושג ברור אם האלקטרודה נתון מתאים ההקלטה.
4. חרקים הכנה: תסיסנית אנטנה
- בנה aspirator לעוף. חותכים חתיכה של צינור אוויר קו זמן מספיק כדי לתלות בנוחות סביב הצוואר (כ 90-120 ס"מ). חותכים את קצה קצהו של 200 פיפטה μL והכנס אותו בקצה אחד של הצינור. על העמדה אחרים סוף, ~ 1.5 ס"מ X 1.5 ס"מ חתיכה של רשת, כך שהוא יוצר מחסום פיזי אך אינה מונעת אוויר זורם מתוך הצינור. חותכים את קצה קצה מ"ל 1 פיפטה ולמקם את סוף רחב על גבי פתיחת הצינור, חוסמת את הרשת ביניהם. חלק זה ישמש לאסוף ולטפל זבובי חומץ מבוגר (איור 2).
- קח שקופיות מיקרוסקופ ומקום חתיכת שעווה שיניים בערך באמצע הצד הארוך. על גבי זה positioנה מכסה זכוכית מוטה מעט כלפי מעלה (~ 30), ולוודא כי שעווה אינה ישירות מתחת לחלק העליון, אשר ימנע להדמיה של זבוב החומץ מתחת למיקרוסקופ. משוך אלקטרודה זכוכית עם חולץ האנכי. קצהו צריך להיות דק וגמיש מספיק כדי להתאים בין המגזר מחושים השני והשלישי, ולשמור על יציבה אנטנה עבור ההקלטות. מקם את אלקטרודת הזכוכית עוד חתיכת שעווה למקם אותו בצד של הזכוכית המכסה, רחוק מספיק שכאשר הוא הוריד את קצה שהוא מגיע לפינה של זכוכית המכסה (איור 3A).
- עבודה מבקבוק או בקבוקון של זבובים בוגרים של הגנוטיפ הרצוי, להרים לטוס חומץ מבוגר באמצעות aspirator לעוף. למרות נקבות משמשים בדרך כלל בגלל הגודל שלהם גדול יותר, גברים יכולים לשמש גם. המקום טיפ 200 פיפטה μL על גבי טיפ 1 מ"ל, כדי למנוע את לטוס לברוח. מכה לתוך הצינור, כך הוא דחף לטוס לקראת סוף טיפ 200 פיפטה μL. חתוך את סוף רחב של קצה פיפטה עם סכין הגילוח מילימטרים ספורים להטיס את עצמו, ולאחר מכן להוסיף קצת שעווה כדי למנוע לטוס גיבוי החוצה. תחת מיקרוסקופ, לחתוך שוב ליד הראש של הזבוב חומץ, לשים לב לא לפגוע בבעלי חיים. עם טיפ קטן פיפטה, לדחוף את השעווה כדי לאלץ את ראש לטוס כך כי כמחצית העיניים extrude מקצה (איור 3B). ודא כי הרגליים שלו לא יוצאים כמו גם, או שהם עלולים להעביר להפריע ההקלטות.
- הר זבוב על פיסת שעווה, ראשו כלפי מעלה, ומניחים אותו על השקופית מול זכוכית המכסה. דחפו את הראש מעט כלפי הפינה של הזכוכית, כך האנטנות להרחיב יתר על הזכוכית. מנמיכים את קצה הכוס נימי בין המגזר מחושים השני והשלישי (איור 3B).
- חלקים שונים של האנטנה יעניק גישה sensilla סוגים שונים. בהתאם לצרכים הניסוי בפרט, האנטנה תצטרך להיות מכוונת אחרת כדי לאפשר גישה sensilla סוגים שונים. כדי להקליט מן sensilla basiconic גדול כמו בדוגמה שלנו, Arista הוא נדחף מטה על משטח הזכוכית (איור 3B).
5. חרקים הכנה: אנופלס לסתי palps
- שימוש aspirator חשמלי (2E איור), לאסוף 40-60 3-5 ימים יתושים הישן (זכרים ונקבות מעורבות) בכלוב פלסטיק קטן (תרשים 2F). יתושים צריך להיות שגדלו בתנאים רגילים, כלומר ב 25-28 באינקובטור חרקים או insectary ° C עם לחות 70-80%. מניחים את כלוב פלסטיק קטנה עם בעלי החיים על קרח במשך 15 דקות ~ עד שהם מורדמים על ידי קר. לאחר החיות הפסיקו לנוע, להעביר רק 4-6 חיות על הבמה תחת המיקרוסקופ בכל זמן נתון, תוך שמירה על שאר החיות על הקרח במהלך ההליכים. למרות נקבות משמשים בדרך כלל בגלל הרגישות שלהם ל-CO 2, הזכרים יכולים גם להיות מועסק. בחר יתושים זכר או נקבה, אם לשפוט על פי המבנה של האנטנה (נוצה, כמו אצל נקבות, נימה כמו אצל גברים), ולהסיר את כנפיהם ורגליהם עם מלקחיים בסדר לשתק אותם. שמור אותם בתוך כוס פלסטיק קטנה עם נייר רטוב בתחתית, כדי למנוע מהם desiccating.
- שים שתי חתיכות של נייר דו צדדית (~ 1 ס"מ אורך) מקבילים זה לזה (~ 1 ס"מ זה מזה), במרכז וגם בצד של זכוכית השקופית (איור 3 ג). בעזרת מלקחיים בסדר, במקום אחד יתוש בקלטת המרכזי מתחת למיקרוסקופ לנתח, ולהפוך אותו הצידה מקל הגוף שלו עין אחת בקלטת. התאם את עמדת palps לסתי כך palps הן להאריך במקביל בקלטת (איור 3D). תקן את palps לסתי ידי הצבת מחרוזות דק (שערות אדם למשל) הן בבסיס בקצה palps (איור 3D). הקלטת הצד משמש כמאגר עבור מחרוזות דק, בעוד קלטת המרכזי צריך להיות מוחלף אחרי כל הקלטה (איור 3 ג).
6. הקלטה תסיסנית melanogaster
- מניחים את השקף מתחת למיקרוסקופ (איור 4A) בהגדלה נמוכה ואת המיקום של האנטנה בערך באמצע שדה הראייה (FOV) (איור 4 ב). בעדינות להוריד את האלקטרודות כך אלקטרודה השוואתית ממוקם ליד העין של הזבוב לבין אלקטרודה ההקלטה ליד אנטנה (איור 4C). הגדל את ההגדלה מחדש לתפקיד אנטנה באמצע של FOV (איור 4D).
- מקום הלידה ריח המכשיר קרוב לראש של הזבוב, מצביע על האנטנה.
- בהגדלה נמוכה (איור 4C), הכנס את האלקטרודה הפניה לתוך העין של הזבוב. מנמיכים את האלקטרודה הקלטה על גבי האנטנה בלי לגעת פני השטח שלו.
- החלפת בהגדלה גבוהה, שליטה אלקטרודה הקלטה עם micromanipulator ו להכניס אותו לתוך sensillum נבחר (איור 4D). כל נקודה לאורך sensillum טוב ההקלטה. פעם אחת בתוך sensillum, האלקטרודה יכול להיות דחף רחוק ב (לעיתים לאורך כל הדרך)כדי לקבל אות יותר טוב יחס רעש. לאחר האלקטרודה הוא sensillum, פעילות ספונטנית של התאים ניתן לאתר.
7. הקלטה אנופלס gambiae
- מניחים את השקופית זכוכית מתחת למיקרוסקופ בהגדלה נמוכה (10x) ואת עמדת palps לסתי בערך באמצע של FOV ואת ראש בראש (איור 4E). סובב את הבמה עד אחד palps הוא בזווית ישרה עם אלקטרודה את ההקלטה.
- התאם את גובה של האלקטרודות כך אלקטרודה השוואתית ממוקם בדיוק מעל העין של היתוש ועל אלקטרודה ההקלטה ליד palps לסתי.
- מניחים את המכשיר משלוח ריח כך שהוא קרוב ככל האפשר אל palps.
- הכנס את האלקטרודה הפניה לתוך העין בהגדלה נמוכה (10x), וכן מעבר הגדלה גבוה (100x), הכנס את האלקטרודה הקלטה לתוך sensillum יתד על משוש (איור 4F). לאחר האלקטרודה הוא sensillum, פעילות ספונטנית של התאים ניתן לאתר.
8. נציג תוצאות
בהתאם sensillum ואת איכות ההקלטה, ניתן להבחין בין מספרים שונים של נוירונים הריח בתוך זכר יחיד. ב sensilla basiconic גדול של תסיסנית melanogaster, למשל, בין 2 ל 4 תאים שונים ספייק משרעת אמור להופיע במהלך ההקלטה 9, 10.
בניסוי וידאו שלנו, ab2 תסיסנית sensillum מציגה שני תאים, תא (איור 5, קוצים כחול) תא B (איור 5, קוצים ירוקים). התא לא מופעל במהלך היישום של שמן פרפין (איור 5 א), ואילו רק התא מגיב הדילול 10 -6 של מתיל אצטט (איור 5 ב).
ב משוש לסתי של gambiae אנופלס, מחורץ יתד sensillum מכילה שלושה תאים, אלא רק שני מופלים בקלות (איור 5 ג, קוצים כחול וירוק, בהתאמה). בניסוי וידאו אנו מראים כיצד התא B מגיב דילול של 10 -7 1-octen-3-ol (איור 5D).
באיור 1. אלקטרודה מחדד
(א) מראה כללי של המנגנון אלקטרודה מחדד. (ב) מזרק המכיל 0.5 M KOH (משמאל) משמש כדי לחדד את האלקטרודה (מימין). (C) תקריב של קצה האלקטרודה ליד הפתח של המזרק.
איור 2. איך להכין aspirator לעוף aspirator יתושים
(א) החל חומר:... קו צינורות אוויר מפלסטיק, שני פיפטה טיפים לחתוך, ואת רשת (ב) aspirator לטוס פעם אחת הוא יושלם (ג) פירוט של סוף המשמש לתפוס זבובים חומץ (ד) פירוט של את הקצה השני של aspirator את הזבוב. (E) aspirator חשמלי לאיסוף יתוש מורכב גוף הראשי כלוב פלסטיק פריק. (ו) כלוב פלסטיק פריק של יתושים.
איור 3. הכנת זבוב החומץ (תסיסנית melanogaster) ו יתוש המלריה (gambiae אנופלס) להקלטה
(א) תמונה של חומץ זבוב רכוב על השקופית לפני מיצוב אותו תחת המיקרוסקופ. (ב) תקריב של ראש לטוס חומץ עם האנטנה כל הזמן במקום על ידי נימי הזכוכית. (C) תמונה של יתוש רכוב על השקופית. (ד) תקריב של ראש יתוש עם חוטם ו palps דבק בקלטת.
איור 4. הקלטה של זבוב החומץ (תסיסנית melanogaster) ו יתוש המלריה (gambiae אנופלס)
(א) הגדרת תצוגה של electrophysiology. (ב) תקריב של הכנת לטוס רכוב על המיקרוסקופ. שימו לב עמדה בהתאמה של האלקטרודה הקלטה (משמאל), המסירה ריח המערכת (באמצע פיפטה), ואת אלקטרודה הקלטה (מימין). (ג) תמונה של הזבוב תחת המטרה 10x. (ד ') תמונה של האנטנה לטוס תחת המטרה 100x:. sensilla basiconic גדול (חיצים), וביניהם בין אי - חושית שערות (ראשי חץ) (ה) להציג 10x של יתוש רכוב הקלטה (F) לצפות בהגדלה גבוהה של משוש היתוש sensillum יתד (חץ). .
איור 5. דוגמאות של הקלטות תסיסנית melanogaster ואנופלס gambiae
(א) sensillum ab2 של תסיסנית melanogaster שני הבתים עצב סנסורי:.. תא (קוצים כחול) תא B (קוצים ירוקים) (ב) בתאים A ו-B במהלך היישום של מתיל אצטט -6 10 (ג) יתד sensillum של אנופלס gambiae שני הבתים עצב סנסורי: תא (קוצים כחול) תא B (קוצים ירוקים) (ד) בקשה של 10 -7 1-octen-3-ol את sensillum יתד..
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
דיון
רמזים חוש הריח נמצאים בשימוש על ידי אורגניזמים לזהות מקורות מזון, בני זוג פוטנציאליים, טורפים. עצב סנסורי חוש הריח (OSNs) הם מרכז ממסר הראשון בין גירויים חיצוניים ומרכזי יותר של המוח שבו מידע מעובד נוסף. ב תסיסנית melanogaster ו gambiae אנופלס, OSNs נגישים בקלות ואת הפעילות החשמלית שלהם ניתן לנטר בזמן מגורה על ידי ענני ריח.
Sensillum יחיד הקלטה (SSR) טכניקה הסביר וידאו זה כבר בשימוש נרחב להקליט ...
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
חומרים
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות | |
|---|---|---|---|---|
| שמן פראפין | ריחות | Fluka | 76235 | |
| ריחות בדרגת טיהור גבוהה (>98%) | ריחות | Sigma-Aldrich | Methyl acetate #296996 1-octen-3-ol #74950 | |
| רצועות נייר מסנן | ריחות | Fisher Scientific | 05-714-1 | נייר כרומטוגרפיה |
| מחברים | ריחות | Cole-Parmer | EW-06365-40 | 1/16x1/8" |
| בקעונים מזכוכית | ריחות | Agilent Technologies | 5182-0556 | |
| צינורות פלסטיק לקו אוויר | הולכת ריח | Python Products | 500PAL | |
| פיפטה סרולוגית אחת | הולכת ריח | Corning | 4101 | 10 mL |
| צינור פלסטיק | הולכת ריח | Cole-Parmer | EW-06418-0 | 0.050"x0.090"OD |
| פיפטות פסטור חד-פעמיות מזכוכית בורוסיליקט | הולכת ריח | Fisher Scientific | 13-678-20A | 5-3/4 inches |
| בקר גירויים ניתן לתכנות | הולכת ריח | Syntech | CS-55 | |
| שולחן נגד רעידות | ציוד אלקטרופיזיולוגי | TMC | 63533 | 36”Wx30”Dx29”H |
| כלוב פראדיי | ציוד אלקטרופיזיולוגי | TMC | MI8133303 | |
| מיקרוסקופ הפוך | ציוד אלקטרופיזיולוגי | Nikon Instruments | E600FN ECLIPSE | מיקרוסקופ להקלטה |
| עדשות אובייקטיב 10x ו-100x | ציוד אלקטרופיזיולוגי | Nikon Instruments | 10x Plan Fluor 100x L Plan | |
| מיקרוסקופ דיסקציה | ציוד אלקטרופיזיולוגי | Nikon Instruments | EZ645 | מיקרוסקופ להשחזת אלקטרודות ולהכנת חרקים |
| מעמדים מגנטיים | ציוד אלקטרופיזיולוגי | Newport Corp. | MODEL 150 | |
| IDAC | ציוד אלקטרופיזיולוגי | Syntech | IDAC-4 | |
| תוכנת רכישה | ציוד אלקטרופיזיולוגי | Syntech | Autospike | |
| מניפולטור מאקרו אחד | ציוד אלקטרופיזיולוגי | Narishige International | MN-151 | מניפולטור ג'ויסטיק משמש למיקום אלקטרודת ייחוס |
| מניפולטור מיקרו אחד | ציוד אלקטרופיזיולוגי | EXFO | PCS-6000 | משמש למיקום אלקטרודת הקלטה |
| תליב תנימים | ציוד אלקטרופיזיולוגי | Pomona | AL-B-12-0 | |
| כבל חשמל | ציוד אלקטרופיזיולוגי | Pomona | B-36-0 | הרכבת כבל בדיקה |
| 2 מחזיקי אלקטרודות | ציוד אלקטרופיזיולוגי | Syntech | N/A | מחזיקי אלקטרודות (סט של 2) לאלקטרודת תיל טונגסטן |
| גשש AC | ציוד אלקטרופיזיולוגי | Syntech | N/A | גשש אוניברסלי בעל קצה אחד (10xAC) |
| אלקטרודות טונגסטן | ציוד אלקטרופיזיולוגי | Microprobes | M210 | מוטות טונגסטן ישרים, 0.005x3 |
| பொטאשום הידרוקסיד | ציוד אלקטרופיזיולוגי | Sigma-Aldrich | 221473 | |
| מזרק | ציוד אלקטרופיזיולוגי | BD Biosciences | 301625 | 20 mL |
| ספק כוח | ציוד אלקטרופיזיולוגי | Wild Heerbrugg | e.g MTR32 | |
| שובך אנכי | הכנת חרקים | Narishige International | PB-7 | |
| להב תער | הכנת חרקים | VWR international | 55411-050 | |
| שעוות שיניים | הכנת חרקים | Patterson | 091-1503 | |
| זכוכית מיקרוסקופ | הכנת חרקים | Fisher Scientific | 12-550A | |
| זכוכית כיסוי | הכנת חרקים | Fisher Scientific | 12-541A | 18X18 #1.5 |
| רשת פוליפרופילן | הכנת חרקים | Small Parts, Inc. | CMP-0500-B | |
| אלקטרודת זכוכית | הכנת חרקים | Frederick Haer and Co. | 27-32-0-075 | צינור קפילרי בורוסיליקט 1.5mm OD x 1.12mm ID x 75 mm |
| סרט דבק דו-צדדי (3M) | הכנת חרקים | 3M | MMM6652P3436 | סרט דבק דו-צדדי (3M) |
| פינצטה | הכנת חרקים | Fine Science Tools | 021x0053 | פינצטה Dumont #5 בגימור מראה |
| כוס פלסטיק קטנה | הכנת חרקים | VWR international | 89009-662 | 7 x 5.7 (23/4 x 21/4) |
| שואב חשמלי | הכנת חרקים | Gempler’s | RHM200 |
מקורות
- Boeckh, J. Elektrophysiologische Untersuchungen an einzelnen Geruchsrezeptoren auf der Antenne des TotengrAbers (Necrophorus Coleoptera). Z. Vergl. Physiol. 46, 212-248 (1962).
- Schneider, D., Hecker, E. Zur Elektrophysiologic der Antenne des Seidenspinners Bombyx mori bei Reizung mit angereicherten Extrakten des Sexuallockstoffes. Z. Naturforschg. 11b, 121-124 (1956).
- Touhara, K., Vosshall, L. B. Sensing odorants and pheromones with chemosensory receptors. Annu Rev Physiol. 71, 307-332 (2009).
- Sato, K. Insect olfactory receptors are heteromeric ligand-gated ion channels. Nature. 452, 1002-1006 (2008).
- Wicher, D. Drosophila odorant receptors are both ligand-gated and cyclic-nucleotide-activated cation channels. Nature. 452, 1007-1011 (2008).
- Hallem, E. A., Ho, M. G., Carlson, J. R. The molecular basis of odor coding in the Drosophila antenna. Cell. 117, 965-979 (2004).
- Hallem, E. A., Carlson, J. R. Coding of odors by a receptor repertoire. Cell. 125, 143-160 (2006).
- Boeckh, J., Kaissling, K. E., Schneider, D. Insect olfactory receptors. Cold Spring Harb Symp Quant Biol. 30, 263-280 (1965).
- de Bruyne, M., Foster, K., Carlson, J. R. Odor coding in the Drosophila antenna. Neuron. 30, 537-552 (2001).
- Lu, T. Odor coding in the maxillary palp of the malaria vector mosquito Anopheles gambiae. Curr Biol. 17, 1533-1544 (2007).
- Hallem, E. A., Fox, A. N., Zwiebel, L. J., Carlson, J. R. Olfaction: mosquito receptor for human-sweat odorant. Nature. 427, 212-213 (2004).
- Couto, A., Alenius, M., Dickson, B. J. M. olecular anatomical, and functional organization of the Drosophila olfactory system. Curr. Biol. 15, 1535-1547 (2005).
- Fishilevich, E., Vosshall, L. B. Genetic and functional subdivision of the Drosophila antennal lobe. Curr Biol. 15, 1548-1553 (2005).
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
הדפסות חוזרות והרשאות
