הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

תגובת חוטם הרחבה (PER) Assay ב תסיסנית

30.6K צפיות

DOI:

10.3791/193

29 באפריל 2007

במאמר זה

סיכום

בתגובה חוטם הארכה או PER היא התנהגות טעם assay כי נעשה שימוש זבובים וכן דבורי דבש. כאשר חוטם הופך במגע עם חומר אטרקטיבי, לטוס מרחיב חוטם שלה לצרוך את החומר. פתרונות של סוכרים שונים הם אטרקטיביים מאוד לטוס.

תקציר

בתגובה חוטם הארכה (PER) היא התנהגות טעם assay כי נעשה שימוש זבובים וכן דבורי דבש.

על פני השטח של הפה של זבוב (labellum), ישנם מבנים דמויי שיער הנקרא sensilla אשר בתים נוירונים טעם. כאשר חומר אטרקטיבי יוצר קשר עם labellum, לטוס מרחיב חוטם שלה לצרוך את החומר. תגובת חוטם הרחבה (PER) assay מודד את התגובה התנהגות הטעם, היא שיטה יעילה כדי ללמוד על העדפות מזון זבוב אחד. פתרונות של סוכרים שונים, כגון גלוקוז סוכרוז, פרוקטוז ו, הם אטרקטיביים מאוד לטוס. ההשפעה של חומרים מרתיעה גם יכול להיבדק כמו הפחתה של PER כאשר מעורבים פתרון מתוק.

למרות הפשטות של התהליך הבסיסי, יש הרבה דברים שיכולים למנוע ממנו לעבוד. אחד הגורמים הדורש תשומת לב הוא מצב תגובה של הזבוב. בפעם רעב הנדרש כדי להביא את המדינה לטוס מענה הולם משתנה באופן דרסטי 36-72 שעות. הקמנו סדרה של בקרות כדי להעריך מצב של זבוב המאפשר סינון החוצה של בעלי חיים יחידים שאינם מגיבים או Hyper-תגובה. גורם חשוב נוסף הוא רמת ההשפעה ואת המיקום של איש הקשר של labellum, אשר יהיה קשה לתאר במילים. מצגת וידאו זה מדגים את כל אלה, יחד עם שיפורים נוספים אשר יגדילו את שחזור של שיטה זו.

פרוטוקול

רעב

  1. ראשית, להרעיב את לעוף.
  2. לשים חתיכה קטנה של קים, לנגב ספוגה מים בקבוקון ריק.
  3. העברת 20-30 המדושנים טס הבקבוקון הריק.
  4. בדוק כל 12 -24 שעות כדי לוודא נייר לח.
  5. להרעיב את לטוס על 36-72 שעות.

תקן את הזבוב

  1. קח אחד לטוס aspirator.
  2. המקום טיפ 200 μl צהוב על פתיחת. במקביל להטלת ונשף על זה, אתה יכול ללחוץ על לטוס אל קצה צהוב.
  3. בעדינות להחיל קצת אוויר כדי לדחוף את לטוס עד לנקודה שבה הוא לא יכול לזוז.
  4. באמצעות סכין גילוח, לשים סימן כ בעין של זבוב, אז למצוץ את לטוס הלוך לחתוך את קצה.
  5. בעדינות המכה לטוס בחזרה למצב, אבל רק לפני שהגיע סוף מאוד, לעשות בשיפוע לחתוך במיקום שבו חוטם הוא הולך להיות ממוקם. אתה יכול לעשות את זה בלי לחתוך באלכסון, אבל זה בהחלט להפוך את התהליך הבא קל יותר.

הכינו פתילות סוכרוז

  1. טוויסט רצועה ברוחב של 6 מ"מ Kimwipes ® נייר לתוך חוט, ולמשוך בנפרד לחתיכות קטנות של הפתיל כמו בצורת קונוס (<1 ס"מ).
  2. פתילים אלה קטן היו טבל פתרונות סוכרוז או מים בפני חוטם על ידי יצירת קשר.

הכן שולטת בחיות מעבדה

  1. לפני כל בדיקה tastants, לתת פתרון סוכרוז 4% לטוס. זה פועל כמו שליטה חיובית. מחק כל לעוף כי לא הגיב.
  2. בשלב הבא, מבחן DH 2 0 על לטוס. מעשה זה כביקורת שלילית. מחק את הזבוב אם הגיב.
  3. מבחן פקדים אלה לאחר בדיקות tastants שלך.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

במצגת זו, שעברנו את כל השלבים עבור assay בתגובה חוטם הארכה. השיטה נשמעת די פשוטה אבל כמו רבים מבחני התנהגות אחרים, דברים קטנים רבים יכולים למנוע את assay מעבודה. עברנו שלבים רבים כאלה שצריכים תשומת לב. הנה, אני reemphasize כמה מן הגורמים החשובים ביותר.

גורם אחד כזה הוא צורה של הפתיל. הראיתי כמה דוגמאות טובות מאוד, אבל כמובן, במציאות הכל יהיה ספקטרום רציף בין טוב מאוד רע מאוד. בהתחלה, ייתכן שאתה משתמש בדברים קרוב לצד טובים מאוד, אבל יום אחר יום רגיל שלך ע...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תודות

אנו מודים פול גרהם עבור משרת כאיש מצלמה במצגת וידאו.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
HDR-HC1מצלמהSony Corporation
SMZ800מיקרוסקופNikon Instruments
P-IBSSמתאם למצלמהNikon Instruments
1x DC10LNמתאם למצלמהOptem, Qioptiq Inc.
257010מתאם למצלמהOptem, Qioptiq Inc.
TREKKER Mk2חצובהBENBO
Gorillapod SLRחצובהJoby
iMac G5מחשבApple
Power Mac G5מחשבApple
iMovieתוכנהApple
MPEG StreamclipתוכנהSQUARED 5

מקורות

  1. Dethier, V. G. The Hungry Fly. , Harvard University Press. Cambridge. (1976).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות