מבחן האכלה: הערכת העדפות האכלה בדרוזופילה מלנוגסטר

תקציר

מקור: Bovier, T. F., et al. שיטות לבדיקת הפרעה אנדוקרינית במלנוגסטר דרוזופילה. J. Vis. Exp. (2019).

סרטון זה מתאר בדיקת האכלה לזבובי פירות שבה משתמשים במזון צבעוני כדי לפקח על האכלה ועל ההשפעה שעשויה להיות לתרכובות נוספות על פעילות ההאכלה. הפרוטוקול לדוגמה בודק את ההשפעות של מספר כימיקלים משבשים אנדוקריניים (EDC).

פרוטוקול

פרוטוקול זה הוא קטע מתוך Bovier et al., Methods to Test Endocrine Disruption in Drosophila melanogaster, J. Vis. Exp. (2019).

1. בדיקת האכלה

הערה: בדיקה זו מומלצת כדי לבדוק אם נוכחות של EDC שנבחר בתווך עלולה להשפיע על האכלת זבובים.

1. שים 15 זבובים צעירים בבקבוקונים המכילים מדיום קמח תירס (CM) בתוספת ריכוזים שונים של EDC שנבחר ומזון צביעה. אפשר לזבובים להאכיל את המדיה למשך יום אחד.
   NOTE: לדוגמה, השתמש בצבע אדום מס '40 (1 מ"ג / מ"ל).
2. שימו 15 זבובים צעירים בבקבוקונים המכילים CM בתוספת הממס בלבד ומזון צביעה להדברה. אפשר לזבובים להאכיל את התקשורת במשך יום אחד.
3. מרדימים בנפרד כל קבוצת זבובים עם אתר.
   1. מעבירים זבובים מכל קבוצה למיכל זכוכית גלילי (אתרייזר) עם משפך המוכנס לקצה הפתוח, הופכים את הבקבוקון מעל המשפך ומחברים בעדינות את שני המיכלים זה לזה כדי לגרום לזבובים ליפול לתוך האתרייזר.
      NOTE: המשפך ימנע מהם לצאת מהאתר.
   2. הקש בעדינות על האתר על משטח רך, כגון משטח עכבר, והחלף במהירות את המשפך בתקע כותנה וגזה ספוג אתר.
   3. המתן כדקה עד שהזבובים נופלים לתחתית ומפסיקים לזוז.
      NOTE: אין לחרוג מהזמן אחרת הזבובים ימותו.
4. שים זבובים משותקים תחת מיקרוסקופ סטריאו והשווה את צבע הבטן של כל קבוצת טיפול ביחס לקבוצת הביקורת.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה

שם	חברה	מספר קטלוג	הערות
17α-אתינילאסטרדיול	סיגמא	E4876-1G
אגר למדיום דרוזופילה	ביוסיגמה	789148
ביספנול A	סיגמא	239658-50 גרם
ביספנול AF	סיגמא	90,477-100 מ"ג
קמח תירס	קא' ביאנקה
אתר דיאתיל	סיגמא
בקבוקוני דרוזופילה	ביוסיגמה	789008	25 מ"מ x 95 מ"מ
בקבוקוני דרוזופילה	ביוסיגמה	789009	29 מ"מ x 95 מ"מ
בקבוקוני דרוזופילה	קלטק	187	22 מ"מ x 63 מ"מ
אתנול	פלוקה	2860
אתרייזר	אמנות		מיכל זכוכית גלילי עם תקע כותנה
בלנדר מוט פימי	אריאטה		מעבד מזון
שמרים להצלחה מיידית	אסק"א		אבקת שמרים
צבע אדום מס' 40	סיגמא	16035
סטריאומיקרוסקופ עם נורות LED	לייקה		S4E