הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

פגיעה עצבית הנגרמת על ידי לייזר בשני פוטונים: שיטה לצפייה בניוון והתחדשות אקסונים בזחלי דרוזופילה

2.1K צפיות

⸱

30 באפריל 2023

במאמר זה

תקציר

מקור: Li, D., et al. A Drosophila In Vivo Injury Model לחקר התחדשות עצבית במערכת העצבים ההיקפית והמרכזית. J. Vis. Exp. (2018).

סרטון זה מתאר אבלציה של אקסונים בלייזר דו-פוטוני בזחל Drosophila melanogaster ופרוטוקול לדוגמה לגרימת פציעה ותמונה של אתר הפגיעה.

פרוטוקול

פרוטוקול זה הוא קטע מתוך Li et al., A Drosophila In Vivo Injury Model for Study Neuroregeneration in the Peripheral and Central Nervous System, J. Vis. Exp. (2018).

1. פגיעה בשני פוטונים והדמיה קונפוקלית

  1. הגדרת מיקרוסקופ
    NOTE: מיקרוסקופ סריקת לייזר קונפוקלי עם לייזר של שני פוטונים שימש לניסוי זה, אך גם מערכות אחרות עם מערך מקביל יספיקו. לייזר שני פוטונים (930 ננומטר) שימש להעברת פציעות ולייזר ארגון (488 ננומטר) שימש להדמיה קונפוקלית של GFP.
    1. בתחילת כל הפעלה, הפעל את הלייזר הדו-פוטוני ו/או את הלייזר הקונפוקלי ואת המיקרוסקופ. פתח את תוכנת ההדמיה.
    2. ....

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

figure-results-1
איור 1: רגנרציה של אקסון נוירון בפריפריה מציגה ספציפיות מחלקתית. (א' ו-ב') ציור סכמטי המציג את מיקום הזחלים. (C) ציור סכמטי של תאי עצב מסוג III da. (D) אקסונים מסוג III da neurons ddaF, המסומנים ב-19-12-Gal4, UAS-CD4-tdGFP, repo-Gal80/+, אינם מצליחים לצמוח מחדש. (E) ציור סכמטי של תאי עצב מסוג IV da. (F) אקסונים מסוג IV da neurons v'ada, .......

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
אתר דיאתיל, מגיב ACS, נטול מיםאקרוס אורגניקסAC615080010
Halocarbon 27 שמןג'נסי סיינטיפיק59-133
חומצה פרופיוניתג'יי טי בייקרU33007
כיסוי משקפיים: מלבניםפישר סיינטיפיק12-544-ד50 מ"מ X 22 מ"מ
מיקרוסקופ סריקת לייזר Zeiss LSM 880זיס
תוכנת זןזיס
זיקית אולטרה IIקוהרנטית

גלה מאמרים נוספים

אבלאציה בלייזר דו-פוטוניהתחדשות אקסוניםדימיון קונפוקאלימודל לפגיעה עצביתנזק מושרה בלייזרפרוטוקול לאקסוטומיהדימיון רב-זמני (Time-Lapse)התחדשות עצבית