הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

בשנת הזרקה תוך חדרי ברחם ו electroporation E15 של עוברי עכברים

28.2K צפיות

DOI:

10.3791/239

19 ביולי 2007

במאמר זה

תקציר

ברחם-in-vivo הזרקת electroporation של הניאוקורטקס עכבר עובריים מספק כלי רב עוצמה עבור מניפולציה של אבות בודדים לאורך הקירות של החדר לרוחב. טכניקה זו היא כעת בשימוש נרחב כדי לחקור את התהליכים המעורבים corticogenesis על ידי יתר להביע או דריסה גנים התבוננות על תופעות התפשטות ההגירה הסלולר, והבחנה. בהשוואה אסטרטגיות בנוקאאוט המסורתית, ב-ברחם electroporation מספק אמצעי מהיר כדי לתפעל אוכלוסייה של תאים במהלך חלון הזמני ספציפיים. בפרוטוקול הווידאו הזאת אנחנו המתאר את המתודולוגיה ניסיוני להכנת עכברים לניתוח, לחשוף את הקרניים דרך הרחם laporatomy, הזרקת DNA לתוך החדרים רוחבי של העובר המתפתח, electroporating דנ"א לתוך אבות המצפים את הקיר לרוחב, וטיפול בבעלי חיים שלאחר הניתוח . המעבדה שלנו משתמשת בפרוטוקול זה על ניתוחים על E13-E16 עכברים, לעומת זאת, מבוצעת בדרך כלל על E15, כפי שמוצג בסרטון זה.

גילויים

למחברים אין ניגודי עיניינים להצהיר עליהם.

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

אלקטרפורציה תוך-רחמיתניתוח עוברי בעכברהזרקה לחדר הצדימיקרו-הזרקת DNAנאו-קורטקס עובריהעברת DNA פלסמידיטכניקת תפירה כירורגיתמתן בופרנורפיןהרדמה באיסופלורןמערכת אלקטרפורציה BTX