מדיום כרומוגני חדש לזיהוי מהיר של מיני ויבריו

תקציר

מקור: Yeung, M., et al. פיתוח מדיום אגר כרומוגני רגיש וספציפי יותר לזיהוי Vibrio parahaemolyticus ומיני ויבריו אחרים. J. Vis. Exp. (2016)

סרטון זה מדגים שיטה מבוססת תרבות לזיהוי מיני ויבריו , ומדגיש אגר כרומוגני כחלופה מדויקת יותר לאגר תיוסולפט-ציטראט-מרה הנפוץ או אגר TCBS. אגר כרומוגני מספק בידול מעולה של זני ויבריו על ידי זיהוי פעילויות אנזימטיות ספציפיות למין.

פרוטוקול

צמיחה במדיה סלקטיבית ודיפרנציאלית

1. יומיים עד ארבעה ימים לפני הניסוי, פס את כל הזנים המיקרוביאליים על תווך לא סלקטיבי (TSAS, BHI או אגר שוקולד) לבידוד המושבה. דגרו צלחות בטמפרטורה של 35-37 מעלות צלזיוס למשך 48 שעות. בדוק את טוהר התרבויות על ידי התבוננות במורפולוגיה של המושבה לאחר הדגירה. תרבויות טהורות צריכות להניב מושבות המציגות מורפולוגיה דומה של מושבה.
2. מעבירים כמה מושבות מבודדות ל -5 מ"ל מרק. דגרו צינורות בטמפרטורה של 35-37 מעלות צלזיוס למשך 16-24 שעות.

הערה: השתמש במושבות צעירות, בנות פחות מארבעה ימים, כדי להכין תרביות לילה בכל הניסויים.

3. פס לולאה של תרביות לילה על מדיה סלקטיבית ודיפרנציאלית (TCBS ואגר ....

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה

שם	חברה	מספר קטלוג	הערות
ריאגנט/ציוד
אגר	פישר סיינטיפיק	DF0140-15-4	עשוי להשתמש במותגים אחרים
אבקת BHI	פישר סיינטיפיק	DF0418-17-7	עשוי להשתמש במותגים אחרים
מחולל גז CampyGen	דיאגנוסטיקה של הארדי	CN035A	לספק אווירה מיקרואירופילית; עשוי להשתמש במותגים אחרים
צלחות אגר שוקולד	דיאגנוסטיקה של הארדי	ה14	עשוי להשתמש במותגים אחרים
צינורות תרבות	פישר סיינטיפיק	S50712	עשוי להשתמש במותגים אחרים
צלחות אגר HardyChrom Vibrio	דיאגנוסטיקה של הארדי	G319	מחקר זה מעריך מדיום זה
אינקובטור	כלשהו
לולאות חיסון	פישר סיינטיפיק	22-363-606	במחקר זה נעשה שימוש בגודל 10 מיקרוליטר
צלחת פטרי	פישר סיינטיפיק	FB0875713	עשוי להשתמש במותגים אחרים
פיפטה וטיפים	כל טיפים מעוקרים
אבקת TCBS	דיאגנוסטיקה של הארדי	265020	מחקר זה מעריך מדיום זה
אבקת TSB	פישר סיינטיפיק	DF0370-07-5	עשוי להשתמש במותגים אחרים
ארון צפייה UV	כלשהו		פולט אור UV גל ארוך
אמבט מים	כלשהו
זנים וזנים של חיידקים
אירומונס הידרופילה	ATCC
קנדידה אלביקנס	ATCC
Campylobacter jejuni	ATCC
Escherichia coli	ATCC
Proteus mirabilis	ATCC
Pseudomonas aeruginosa	ATCC
סטפילוקוקוס זהוב	ATCC
סלמונלה Choleraesuis	ATCC
Shigella boydii	ATCC
שיגלה פלקסנרי	ATCC
שיגלה סוניי	ATCC
Vibrio alginolyticus	ATCC
V. cholerae (הסרוטיפים כוללים O139, O1, non O1, El Tor biovars)	מנהל המזון והתרופות האמריקאי, ATCC
V. damsela	ה-FDA
V. fisheri	סביבה
V. fluvialis	המרכז לבקרת מחלות
V. furnissii	המרכז לבקרת מחלות
V. hollisae	ה-FDA
ו. מטשניקובי	ATCC
V. mimicus	ה-FDA
V. parahaemolyticus (הסרוטיפים כוללים O3:K6, O1:K56, O4:K8, O5:K15, O8 וכו')	ATCC, FDA, CDC, איכות הסביבה
V. proteolyticus	ה-FDA
V. vulnificus	ה-FDA