תנועתיות גלישה בחוטי Phormidium lacuna

תקציר

מקור: וובר, נ ' ואח', טרנספורמציה טבעית, ביטוי חלבונים ושימור בהקפאה של הלקונה החוטית Cyanobacterium Phormidium. J. Vis. Exp. (2022)

סרטון זה מדגים את ההליך להערכת תנועתיות הגלישה בלקונת פורממידיום על ידי הומוגניזציה של תרביות נימה ליצירת מתלה אחיד, הכנת מערך בדיקת לוחית פטרי על גבי שקופית מיקרוסקופ והדמיית תנועת נימה.

פרוטוקול

1. מבחן לתנועה במדיום נוזלי
   1. לתצפית ישירה על התנועתיות, העבירו 8 מ"ל של מדיום המכיל P. lacuna לצלחת פטרי בגודל 6 ס"מ. המתן מספר דקות עד שהדגימה תגיע לטמפרטורת החדר, ואז כסה את צלחת הפטרי בנייר כסף צלופן.
   2. הנח שקופית מיקרוסקופ על שולחן xy של מיקרוסקופ רגיל עם מצלמה. הפעל את אור המיקרוסקופ. באופן אידיאלי, השתמש תמיד באותן הגדרות חשמליות ואופטיות עבור התאורה. הזיזו מטרה של פי 4 או פי 10 לנתיב האור.
   3. מניחים את צלחת הפטרי על גבי השקופית. התאם חוטים בודדים או צרורות נימה על ידי תנועות x, y ו-z של השולחן.
      הערה: בשל הסידור התלת מימדי, רק חלק מהחלק הרלוונטי יכול להיות בפוקוס. רדיד הצלופן מאפשר התאמת המיקוד ללא הגבלה.
   4. התבונ....

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה

שם	חברה	מספר קטלוג	הערות
כלי זכוכית, שונים
מיקרוסקופ DM750	צייס
מצלמת עיניים MikrOkular Full HD	ברסר		להקלטות דולג זמן, בשילוב עם מיני-מחשב Raspberry Pi
צלחות פטרי פוליסטירול, 60 מ"מ על 15 מ"מ	מרק	P5481-500EA
תוכנה, כתובת URL
תמונהJ		תוכנה לעיבוד אימאג' (עוצמות פיקסלים, קוטר מעגל)
מדיה תרבותית
מי ים מלאכותיים	0.41 מ' NaCl, 53 מ"מ MgCl₂, 28 מ"מ Na₂SO₄, 10 מ"מ CaCl₂, 9 מ"מ KCl , 2.4 מ"מ NaHCO₃ , 0.84 מ"מ KBr, 0.49 מ"מ H3BO₃, 90 מיקרומטר SrCl₂, 72 מיקרומטר NaF
f/2 -מדיום נוזלי	מי ים מלאכותיים, 0.1% (V/V) תמיסת יסודות קורט, 0.05% (V/V) תמיסת ויטמינים, 0.88 מ"מ NaNO₃, 36 מיקרומטר NaH₂PO₄
פתרון יסודות קורט	0.36 מ"מ NaH₂PO₄, 12 מיקרומטר Na₂EDTA, 39 ננומטר CuSO₄, 26 ננומטר Na₂MoO₄ , 77 ננומטר ZnSO₄, 42 ננומטר CoCl₂, 0.91 מיקרומטר MnCl₂
תמיסת ויטמינים	0.3 מיקרומטר תיאמין-הידרוכלוריד, 2.1 ננומטר ביוטין, 0.37 ננומטר ציאנוקובלמין