מבחן ווגס-פרוסקאואר להבדלת ביוטיפים של ויבריו כולרה

תקציר

מקור: ברומפילד, ק. ד. ואחרים, טכניקות מעבדה המשמשות לשימור והבחנה בין ביוטיפים של ויבריו כולרה לבידוד קליני וסביבתי. J. Vis. Exp. (2017).

הסרטון הזה מדגים את מבחן ווגס-פרוסקאואר (VP) להבחנה בין שלושה ביוטיפים של ויבריו כולרה: קלאסי, אל טור מסוג פראי, וגרסה של אל טור. כל תרבית מחוננת לתוך מדיום המכיל גלוקוז, מודגרת ומטופלת ב-α-נפתול ואשלגן הידרוקסיד כדי לזהות נוכחות אצטואין. צבע ורוד-אדום, המצביע על תגובת VP חיובית, נצפה רק בביוטיפ El Tor מסוג פראי, מה שמבדיל אותו מהסוגים הקלאסיים והווריאנטים.

פרוטוקול

מבחן Voges-Proskauer (VP)

1. הכינו תרבית(ים) ללילה בציר נוזלי של LB.
2. הסנן 4 מ"ל של מתיל אדום Voges-Proskauer, או מרק MR-VP, על ידי פיפטינג של 10 מיקרו ליטר של תרבית לילה מוכנה מראש למרק MR-VP בנפח 4 מ"ל בצינור תרבית סטרילי ולדגר עם אוורור בתנור שייקר במהירות 225 סל"ד למשך 12 עד 16 שעות בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס.
3. הוסיפו 150 מיקרוליטר של 5% (עם v) α-נפתול ו-50 מיקרוליטר 40% (עם v) KOH ל-1 מ"ל אליקואטים של תרבית לילה MR-VP במבחנות תרבית סטרילית, בהתאמה.
4. מערבולת קצרה ותן לעמוד בטמפרטורת החדר עד 4 שעות עד שיתפתח שינוי צבע.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה

שם	חברה	מספר קטלוג	הערות
MR-VP Broth	דיפקו	216300	http://catalog.bd.com/nexus-ecat/getProductDetail?productId=216300&parentCategory=&parentCategoryName=&categoryId=&categoryName=&searchUrl=%2FsearchResults%3Fkeyword%3Dmr-vp%2Bmedium%26typeOfSearch%3DproductSearch
KOH	פישר סיינטיפיק	P250-500	https://www.fishersci.com/shop/products/potassium-hydroxide-pellets-certified-acs-fisher-chemical-5/p250500?searchHijack=true&searchTerm=P250500&searchType=RAPID
α-נפתול	ביומדיקל MP	204189	http://www.mpbio.com/product.php?pid=05204189