הערכת נכסים איתות של Ectodermal epithelia במהלך פיתוח Craniofacial

Summary

מאמר זה מתאר השתלת רקמות טכניקה שנועדה לבדוק את איתות ותכונות של דפוסים האאקטודרם משטח cephalic במהלך הפיתוח craniofacial.

Abstract

הנגישות של עוברי העופות סייע embryologists ניסיוני להבין את גורלם של תאים במהלך ההתפתחות ואת תפקידו של אינטראקציות רקמות המווסתים דפוסים המורפוגנזה של בעלי חוליות (לדוגמה: ^{1, 2, 3, 4).} כאן, אנו ממחישים שיטה זו מנצלת את הנגישות כדי לבדוק את איתות ותכונות דפוסים של רקמות ectodermal במהלך התפתחות הפנים. בניסויים אלו, אנו יוצרים שליו, חומוס ⁵ או עכבר חומוס ⁶ מפלצות ידי השתלת האאקטודרם משטח cephalic המכסה את הלסת העליונה של שליו או בעכבר על אזור או באותו אזור או מחוץ לרחם של עוברים חומוס. השימוש שליו כמו רקמות התורם להשתלה לתוך אפרוחים פותחה על מנת לנצל את הסמן nucleolar נוכח שליו אך לא תאים חומוס, ובכך מאפשר לחוקרים להבחין מארח ורקמות תורם ^7. בדומה לכך, מרכיב חוזרות נמצא גנום העכבר, והוא הביע בכל מקום בגוף, אשר מאפשר לנו להבחין המארח רקמות התורם אפרוח ועכבר מפלצות ^8. השימוש האאקטודרם עכבר כמו רקמות התורם יהיה מאוד להרחיב את ההבנה שלנו של האינטראקציות הללו רקמות, כי זה יאפשר לנו לבחון את המאפיינים של איתות האאקטודרם שמקורם בעוברים מוטנטיים שונים.

Protocol

1. הכנת רקמות התורם

1. הכן התקשורת לתרבות, לחדד סיכות זכוכית, לחדד מחטים טונגסטן.
2. איסוף העובר מן המעטפת, להתרחץ קר כקרח PBS.
   1. בעזרת מזרק 10 מ"ל ו - 18 מחט מד להסיר 1.0 מ"ל של אלבומין מהקצה המחודד של מעטפת הביצית.
   2. עושים חור קטן בחלק העליון של הקליפה באמצעות נקודת מספריים, ולאחר מכן לחתוך פתח עגול לחשוף את העובר

Discussion

באמצעות שיטה זו השתלת אפשרה לנו לקבוע כי האאקטודרם מכיל מידע איתות המווסת את הקוטביות dorsoventral והסיומת proximodistal של הלסת העליונה. הדמיון של תוצאות בעת שימוש שליו או האאקטודרם העכבר השימור של אותות מולקולריים ברקמה זו בקרב מינים רבים ^6,11 מציין כי מדובר במרכז איתות שמור ביותר בקרב בעלי החוליות. יתר על כן, חוקרים אחרים השתמשו בטכניקות דומות כדי לבדוק את המאפיינים של איתות באזורים שונים של פני השטח האאקטודרם cephalic ו חשפו את נוכחותו של מרכזי איתות מרובים הממוקמים.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
1x PBS	Tektronix, Inc.
DMEM	אוניברסיטת קליפורניה - סן פרנסיסקו	CCFDA003
BSA	Sigma-Aldrich	A7906
Dispase	GIBCO, מאת Life Technologies	17105-041
צלחת פטרי 35x10 מ"מ	Falcon BD	1008
מס' 5 מלקחיים של דומונט	כלים מדעיים עדינים	11252-20
מספריים	כלי מדע עדינים	14058-11
מספריים קפיצים	כלי מדע עדינים	15010-11
מחזיק מחט	כלי מדע עדינים	26016-12
מחט טונגסטן	כלי מדע עדינים	26000
צינור מיקרו-נימי	דראמונד סיינטיפיק	3-000-225-G
פיפטס פסטר	פישר סיינטיפיק	13-678-6B
מספריים קפיצים	כלי מדע עדינים	15010-11
מחזיק להב	כלי מדע עדינים	10052-11
סכין גילוח	כלי מדע עדינים	10050-00