הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
מאמר שיטה
3.5K צפיות
⸱
30 באפריל 2023
מקור: Molino, Y. et al. Setting up an In Vitro Model of Rat Blood-Brain Barrier (BBB): A Focus on BBB Atlmeability and Receptor-mediated Transport. J. Vis. Exp.(2014)
סרטון זה מציג את הבידוד של כלי דם זעירים ממוח חולדה באמצעות שילוב של צנטריפוגה הדרגתית של צפיפות ומהוד עיכול אנזימטי. את כלי הדם המבודדים ניתן לגדל בתרבית בבקבוק תרבית המצופה מראש במטריצת קולגן ופיברונקטין כדי להשיג מושבות תאי אנדותל.
כל הנהלים הנוגעים למודלים של בעלי חיים נבדקו על ידי הוועדה המוסדית המקומית לטיפול בבעלי חיים ועל ידי ועדת הבדיקה הווטרינרית JoVE.
1. בידוד של כלי דם זעירים במוח חולדה
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| סרום בקר עוברי | Invitrogen | 10270-098 | -20 °C / 1 שנה |
| חלק BSA V אנדוטוקסין נמוך | הרשות הפלסטינית | K45-011-500 גרם | 4 °C |
| פניצילין-סטרפטומיצין | Invitrogen | 15140-122 | -20 °C |
| T75 צלוחיות | בקטון דיקינסון פלקון | 353135 | |
| חיץ HEPES (1 מטר) | Invitrogen | 15630-056 | 4 °C / 1 שנה |
| קולגן סוג IV עכבר (10 x 1 מ"ג) | בקטון דיקינסון | 356233 | -20 °C / חודש אחד |
| פיברונקטין הומיין פלזמה (5 מ"ג) | בקטון דיקינסון | 356008 | -20 °C / חודש אחד |
| מספריים קפיציים Vannas, ישר (9 ס"מ) | כלים מדעיים משובחים | 91500-09 | |
| מספריים ישרים (9 ס"מ) | כלים מדעיים משובחים | 14568-09 | |
| מלקחיים Dumont #5/45 (11 ס"מ) | כלים מדעיים משובחים | 11251-35 | |
| מלקחיים Graefe, רוחב קצה 0.8 מ"מ | כלים מדעיים משובחים | 11050-10 | |
| מלקחיים Graefe, רוחב קצה העקומה 0.8 מ"מ | כלים מדעיים משובחים | 11051-10 | |
| תערובת קולגנאזות / דיספאס (2 x 5 מ"ג) | רוש דיאגנוסטיקה | 05 401 054 001 | -20 °C / 3 חודשים |
| DNase I (100 מ"ג / 569 KU / מ"ג) | סיגמא אולדריץ' | DN25-100 מ"ג | -20 °C / 1 שנה |
| גנטמיצין (10 מ"ג/מ"ל) | Invitrogen | 15710-049 | 4 °C / 1 שנה |
| DMEM/F12 | Invitrogen | 31331-028 | 4 °C |
| סרום בקר מפלזמה ירודה טסיות (500 מ"ל) | Clinisciences | BT-214-100 | -20 °C / 1 שנה |
| bFGF (10 מיקרוגרם) | Invitrogen | 13256-029 | -20 °C / 6 חודשים |
| מלח הפרין Na מרירית חזיר דרגה I | סיגמא אולדריץ' | H3149-100KU | 4 °C / 1 שנה |
| פורומיצין | סיגמא אולדריץ' | P8,833-10 מ"ג | -20 °C / 6 חודשים |
