מאמר שיטה

זיהוי מעכבי קינאז המווסתים את תגובת התימוציט לאותות TCR חזקים

741 צפיות

⸱

8 ביולי 2025

במאמר זה

תקציר

מקור: Chen, E. W., et al. זיהוי מתווכים של איתות קולטן תאי T באמצעות סינון ספריות מעכבים כימיים. J. Vis. Exp. (2019).

בסרטון זה, אנו מתארים שיטה לזיהוי מעכבי קינאז במולקולות קטנות המווסתים את האפופטוזיס של CD4+CD8+ חיוביים כפולים חיוביים לא בוגרים. אפופטוזיס מושרה בתימוציטים חיוביים כפולים על ידי הפעלתם עם חרוזים מגנטיים מצופים נגד CD3 ו- CD28; לאחר מכן מתבצע טיפול במעכבי מולקולות קטנות וניתוח ציטומטריית זרימה כדי לזהות אם המעכבים מווסתים את ביטוי הסמן האפופטוטי.

פרוטוקול

כל הנהלים הנוגעים למודלים של בעלי חיים נבדקו על ידי הוועדה המוסדית המקומית לטיפול בבעלי חיים ועל ידי ועדת הבדיקה הווטרינרית JoVE.

1. בדיקת ספריית מעכבי קינאז (בדיקה בלתי תלויה בצנטריפוגה)

  1. טיפול בתימוציטים עם מעכבי קינאז
    1. הכינו תרחיף תימוציטים.
    2. לדלל את thymocytes בסל"ד מלא כדי לקבל תרחיף thymocyte של 25 x 106 תאים/מ"ל.
    3. הוסף 40 μL של thymocytes לכל באר של צלחת נפח קטן, באמצעות פיפטה רב ערוצית. מניחים את הצלחת על קרח.
    4. לדלל את המעכבים מצלחת המלאי, DMSO ודקסמתזון בסל"ד מלא ביחס של ארבעה חלקים של RPMI מלא לחלק אחד של מעכב/DMSO/dexamethasone (מקדם דילול של 5).
      הערה: מכיוון שהנפחים המשמשים בצלחת קטנה זו קטנים פי 5 מאשר בשיטה הקונבנציונלית, המעכבים וריאגנטי הבקרה מדוללים פי חמישה לפני הוספתם לתימוציטים שבלוחית.
    5. הוסף 0.5 μL של מעכבי קינאז לצלחת 96 בארות מהבארות המתאימות של צלחת המעכב שהוכנה בשלב 1.1.4.
    6. הכינו שמונה בארות של בקרות לא מטופלות. הכינו ארבע בארות של בקרות מטופלות ברכב על ידי הוספת 0.5 μL של DMSO שהוכנו בשלב 1.1.4. הכינו ארבע בארות של 5 מיקרומטר בקרות שטופלו בדקסמטזון, באמצעות דקסמתזון מדולל שהוכן בשלב 1.1.4 (איור 1).

2. גירוי של תימוציטים באמצעות חרוזים נגד CD3 / CD28

  1. ודא כי החרוזים תלויים מחדש באופן אחיד. קח 1 מ"ל של חרוזים ולשטוף אותם עם 2 מ"ל של PBS. מפרידים את החרוזים באמצעות מעמד מגנטי ושאפו את התמיסה. להשעות מחדש את החרוזים ב 1 מ"ל של RPMI מלא.
    הערה: היחס בין חרוזים לתאים הוא 1 ל -2.5. התאם את כמות החרוזים, בהתאם למספר הבארות שיש לעורר ומספר התימוציטים המשמשים.
  2. הוסף 10 μL של תרחיף חרוזים לכל דגימה שטופלה במעכב, ארבע הדגימות שטופלו ב- DMSO, וארבע מתוך שמונה הדגימות שלא טופלו. הוסף 10 μL של סל"ד מלא לארבע הבארות הנותרות שאינן מטופלות. איור 1 מציג את פריסת הלוחות הכללית.
    הערה: הנפח הסופי של הבארות הוא 50 μL, שהוא בתוך הקיבולת המקסימלית של הבארות. חשוב לנקוט משנה זהירות ולהחזיק את הצלחות זקופות, כדי למנוע שפיכה צולבת.
  3. כדי לערבב, להסעיר את הצלחת באמצעות שייקר אורביטלי microplate. לחלופין, מערבבים את תכולת הבארות באמצעות פיפטה רב ערוצית.
  4. לדגור את thymocytes ב 37 ° C, 5% CO2 אינקובטור במשך 17 - 20 שעות (או לילה) עם מכסה נגד אידוי.

3. הגדרת מכונת הכביסה

הערה: ההוראות להגדרת מכונת הכביסה מסופקות על ידי היצרן. השלבים מוזכרים בקצרה להלן. יש צורך בערך 150 מ"ל של תמיסה עבור כל שלב פריימינג.

  1. יש לשטוף את מערכת השטיפה עם 70% אתנול המכיל 1% Tween 20.
  2. יש לשטוף את מערכת הכביסה במים נטולי יונים, המכילים 1% Tween 20.
  3. הפעילו את מערכת השטיפה באמצעות חיץ שטיפה מסוג FACS.

4. צביעה של אנטיגנים פני השטח

  1. הכינו תערובת צביעת נוגדנים המכילה נוגדנים נגד TCRβ, אנטי-CD4, אנטי-CD8 ואנטי-CD69. לדלל את הנוגדנים במאגר השטיפה FACS ביחס של 1:100 (v/v).
  2. שטפו את הצלחת 9x, באמצעות 55 μL של חיץ כביסה FACS לכל כביסה, באמצעות מערכת הכביסה האוטומטית למינרית.
    הערה: בסוף השטיפות, יהיה 25 μL של נפח שיורי בכל באר.
  3. להשעות מחדש את התאים ב 25 μL של תערובת נוגדנים מכתים מוכן בשלב 1.4.1.
  4. אם הדגימות מועברות מצלחת של 96 בארות, השהה מחדש את התאים ב -50 מיקרוליטר של תערובת הנוגדנים, והעבר את הדגימות לצלחת בעלת נפח קטן. שלב זה מתאים לשיטה מספר 2, כפי שמתואר באיור 2A.
  5. כדי לערבב, עוררו את הצלחת עם שייקר אורביטלי מיקרו-צלחת או ערבבו את הדגימות באמצעות פיפטה רב ערוצית, ודגרו על קרח במשך 30 דקות.

5. קיבוע תאים

  1. שטפו את הצלחת פי 9, באמצעות 55 מיקרוליטר של חיץ שטיפה FACS לכל כביסה, באמצעות מערכת השטיפה האוטומטית למינרית.
  2. הוסף חיץ קיבוע/חדירה (מגיע עם ערכת אפופטוזיס קספאז-3 פעיל; זהה עם חיץ 10x perm/wash המוזכר בשלב 1.6.1 והנוגדן נגד קספאז-3 בשלב 1.6.2) ב 50 μL לכל באר.
  3. דוגרים על קרח במשך 30 דקות.

6. צביעה תוך תאית לקספז פעיל 3

  1. הכינו חיץ פרם/שטיפה 1x על ידי דילול 25 מ"ל של 10x חיץ פרם/שטיפה ב-225 מ"ל מים טהורים במיוחד.
  2. הכן כתם קספז פעיל תוך תאי על ידי הוספת 1 מ"ל של נוגדן אנטי קספאז-3 ל -2 מ"ל של 1x perm/wash buffer. היחס בין נוגדנים לחיץ פרם/שטיפה הוא 1:2.
  3. הפעילו את מערכת השטיפה עם חיץ פרם/שטיפה אחד.
  4. שטפו את הצלחת 9x עם חיץ פרם/כביסה אחד, במינון של 55 מיקרוליטר לכל כביסה.
  5. הוסף 25 μL של כתם קספז תוך תאי שהוכן בשלב 1.6.2 לכל הבארות.
  6. כדי לערבב, לערבב את הצלחת עם שייקר מסלול microplate או לערבב את הדגימות באמצעות פיפטה רב ערוצית, לדגור על קרח במשך 1 שעות.
  7. שטפו את הצלחת 9x עם חיץ פרם/כביסה אחד, במינון של 55 מיקרוליטר לכל כביסה.
  8. הוסף 25 μL של חיץ שטיפה FACS לכל הבארות.
  9. מעבירים את הדגימות לצינורות מיקרוטיטר לאחר ערבוב מתאים באמצעות פיפטינג.
  10. הוסף עוד 50 μL של חיץ שטיפה FACS לבארות הריקות וחזור על שלב 1.6.9.
  11. חזור על שלבים 1.6.9 ו- 1.6.10 2x עד 200 μL של הדגימות נאספות בצינורות microtiter.
    הערה: מטרת ההליכים המתוארים בשלבים 1.6.10 ו- 1.6.11 היא להבטיח התאוששות מרבית של התאים מהצלחת בעלת הנפח הקטן. אם מספרי התאים אינם מהווים דאגה, לאחר שלב 1.6.10, פשוט טען את צינורות המיקרוטיטר ל- 200 μL באמצעות מאגר שטיפה FACS.
  12. הפעל ניתוח ציטומטרי זרימה של הדגימות ונתח את התוצאות באמצעות תוכנית ניתוח FACS. הפעלת קספאז-3 וביטוי CD69 מנותחים בשער המכיל תימוציטים CD4+CD8+DP.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

figure-results-1
איור 1: פריסת לוחות של בדיקת הפעלת תימוציטים. (למעלה) עמודות 1 ו- 12 שמורות לבקרים, ואילו עמודות 2 עד 11 הן דגימות שטופלו במעכבים (בז'). הבקרה השלילית (לא מגורה [NS]; אפור) תופסת בארות A1 עד D1, והבקרה החיובית למוות תאים (DEXecasethasone שטופלה [DEX]; סגול) תופסת בארות E1 עד H1. עמודות 2 עד 12 מכילות תימוציטים המעוררים בחרוזים נגד CD3/CD28. הבקרה החיובית להפעלת תימוציט (דגימות מגורות [α-CD3/CD28]; ירוק) תופסת בארות A12 עד D12, ובקרת...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

לא הוכרז על ניגוד עניינים.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
סל"דהייקלוןSH30027FS
פ.ב.ס.הייקלוןSH3007103
ל-גלוטמיןהייקלוןSH3003401
נתרן פירובטהייקלוןSH3023901
10X PBS ויוונטיס PB0344 – 1L
ספריית הקרנת קינאז (96-Well)קיימן כימיקל10505התוכן המדויק של הספרייה עשוי להשתנות
DMSOסיגמא אולדריץ'D2650
דקסמתזוןסיגמא אולדריץ'D4902
חרוזים נגד CD3/CD28תרמו פישר סיינטיפיק11452ד
ערכת אפופטוזיס קספאז-3 פעילה FITCBD Pharmingen550480מכיל חיץ קיבוע/חדירה, 10X Perm/Wash buffer ונוגדן anti-caspase 3
מכונת כביסה DA-Cell קוריוקס HT1000
צלחת DA-Cell 96 בארותקוריוקס96-DC-CL-05
נוגדנים
CD3e ביולג'נד 100236
TCRbBD Biosciences553174
CD4BD Biosciences740007
CD8BD Biosciences563786
CD69eBioscience25-0699-42
מעכבי
TG003קיימן כימיקלמתוך ספריית ההקרנה של קינאז
TG003קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
פק"ק 412קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
דוראמפימודקיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
פאקליטקסלקיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
ארלוטיניבקיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
נקרוסטטין-5קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
NVP-BEZ235קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
Phthalazinone pyrazoleקיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
AG-879קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
1-NA-PP1קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
טורין 1קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
Bisindolylmaleimide IIקיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
BIBF 1120קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
SMI-4aקיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
Bisindolylmaleimide XI (הידרוכלוריד)קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
CAY10657קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
AS-703026קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
כלריתרין כלורידקיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
טוניקמיציןקיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
GSK 1059615קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
רוקסוליטיניבקיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
נקרוסטטין-1קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
SB 505124קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
דיו128קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
קנרטיניב (הידרוכלוריד)קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
SB 431542קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
פ"ד 173074קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
חומצה ולפרואית (מלח נתרן)קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
פ"ד 0325901קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
SB 203580קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
VX-702קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
אמודיןקיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
CHIR99021קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
ביוקיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
Imatinib (mesylate)קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
סוניטיניב מלאטקיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
גפיטיניבקיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
עמ' 2קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
3-מתילאדניןקיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
Bisindolylmaleimide Iקיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
Bisindolylmaleimide IVקיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
Bisindolylmaleimide Vקיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
663284 המל"לקיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
ד 4476קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
NU 7026קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
H-9 (הידרוכלוריד)קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
אינדירובין-3'-מונוקסימהקיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
KN-62קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
KN-93קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
CGP 57380קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
איזו-אולומוציןקיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
(S)-גליציל-H-1152 (הידרוכלוריד)קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
Bisindolylmaleimide VIII (אצטט)קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
ST638קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
SU 6656קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
LY364947קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
SB 203580 (הידרוכלוריד)קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
CAY10621קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
YM-201636קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
ZM 447439קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
AS-041164קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
NVP-AEW541 (הידרוכלוריד)קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
עמ' 242קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
ABT-869קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
CAY10622קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
17β-הידרוקסי וורטמניןקיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
CAY10626קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
SU 6668קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
CAY10572קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
N,N-דימתילספינגוזיןקיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
LY294002קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
U-0126קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
סטאורוספוריןקיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
KN-92 (הידרוכלוריד)קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
AS-605240 (מלח אשלגן)קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
O-1918קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
Y-27632 (הידרוכלוריד)קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
לילמיןקיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
ת.ד. 98059קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
פ"ד 169316קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
TGX-221קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
(S)-H-1152 (הידרוכלוריד)קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
AS-605240קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
די-אריתרו-ספינגוזין C-18קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
OSU03012קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
JNJ-10198409קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
לאלמין (הידרוכלוריד)קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
חומצה ארכידונית לילאמידקיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
חומצה לאורית, לילאמידקיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
AS-252424קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
CAY10505קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
PI-103קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
PIK-75 (הידרוכלוריד)קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
מעכב ספינגוזין קינאז 2קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
פיקאטאנולקיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
SC-1קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
(R)-רוסקוביטיןקיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
ביי-43-9006קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
CAY10561קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
AS-604850קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
מעכב PI3-Kinase α 2קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
ML-9קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
טריציריביןקיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
ארבסטטין אנלוגיקיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
קנפולוןקיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
אולומוציןקיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
AG-494קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
AG-825קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
AG-1478קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
SB 216763קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
SB 415286קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
AG-17קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
H-8 (הידרוכלוריד)קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
LFM-A13קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
SC-514קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
אפיגניןקיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
AG-18קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
CAY10554קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
DRBקיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
RG-13022קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
RG-14620קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
AG-490קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
AG-82קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
AG-99קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
AG-213קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
AG-183קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
Lavendustin Cקיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
ZM 336372קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
5-יודוטוברסדיןקיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
SB 202190קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
CAY10571קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
נילוטיניבקיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
SP 600125קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
ל-תראו-ספינגוזין C-18קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
H-89קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
HA-1077 (הידרוכלוריד)קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
AG-370קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
וורטמניןקיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
AG-1296קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
KT 5823קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
ג'אנקס 1קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
CAY10574קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
CAY10575קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
CAY10576קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
NH125קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
TWS119קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
210902 המל"לקיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
CAY10577קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
CAY10578קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
פ"ד 184161קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
CCT018159קיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז
מיריצטיןקיימן כימיקל-מתוך ספריית ההקרנה של קינאז

הדפסות חוזרות והרשאות

בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה

בקש הרשאה

תגיות

TCRCaspase 3CD69Anti CD3 Anti CD28FACS

מאמרים קשורים