טכניקה ליצירת מודל עכבר דלקת מפרקים הנגרמת על ידי אדג'ובנט

במאמר זה

תקציר

מקור: Lu, Q., et al. איתור הגירה וחדירה של נויטרופילים בעכברים. J. Vis. Exp. (2020).

סרטון זה מדגים שיטה ליצירת דלקת מפרקים הנגרמת על ידי אדג'ובנט במודל מורין. האדג'ובנט של Complete Freund's (CFA) מוזרק במפרק הקרסול של העכבר ובאזורים הפרי-מפרקיים. CFA מפעיל את המערכת החיסונית, מה שמוביל להסננת נויטרופילים ולדלקת מוגזמת.

פרוטוקול

כל הנהלים הנוגעים למודלים של בעלי חיים נבדקו על ידי הוועדה המוסדית המקומית לטיפול בבעלי חיים ועל ידי ועדת הבדיקה הווטרינרית JoVE.

1. אינדוקציה של מודל עכבר דלקת מפרקים אדג'ובנטית (AA)

השהה את האדג'ובנט של פרוינד (CFA) על ידי ערבול של לפחות 5 שניות, ולאחר מכן צייר 100 מיקרוליטר של תרחיף לתוך מזרק אינסולין.
הערה: אנו ממליצים להשתמש ב- CFA חדש לחלוטין בניסויים כדי להבטיח סטריליות.
מרדימים עכברים כמתואר.
סמן את הכף שנבחרה והזריק 20 μL של CFA לחלל מפרק הקרסול. יש להזריק 20 μL של תרחיף לתוך ארבעה כתמים periarticular על הכף שנבחרה (80 μL בסך הכל).
הוציאו עכברים מיחידת הנשימה והכניסו את העכברים המעובדים לחדר חדש. עקבו אחר עכברים כדי לוודא שהם נושמים עד שהם מחזירים לעצמם את היכולת לנוע.
כל 3 ימים, העריכו את קוטר המפרק על-ידי מדידת קוטר מפרק הקרסול באמצעות מד עובי כיס (איור 1A).
כל 3 ימים, הערך את חומרת דלקת המפרקים לפי קריטריון ניקוד דלקת פרקים (איור 1C): 0, נורמלי, ללא עדות לאריתמה ונפיחות; 1, דלקת המפרקים הקלה ביותר, אריתמה ונפיחות קלה המוגבלת לטרסאלים או למפרק הקרסול; 2, דלקת פרקים בינונית, אריתמה ונפיחות קלה המשתרעת מהקרסול ועד לטרסלים; 3, דלקת פרקים חמורה, אריתמה ונפיחות מתונה המשתרעת מהקרסול למפרקים המטטרסליים; 4, דלקת המפרקים החמורה ביותר, אריתמה ונפיחות חמורה מקיפות את הקרסול, כף הרגל והספרות, או אנקילוזיס של הגפה.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

figure-results-1
איור 1: תוצאות מייצגות של מודל עכבר של דלקת מפרקים הנגרמת על ידי אדג'ובנט (AA). (A) קוטר מפרק הקרסול נמדד באמצעות מד עובי כיס. (B) נפיחות המפרק הוערכה על סמך קוטר מפרק הקרסול (n = 7). (C) תמונות של כל ציון דלקת פרקים. (D) חומרת דלקת המפרקים דורגה בסולם של 0-4 נקודות (n = 7). הנתונים מוצגים כממוצע ± SD.