יצירת מודל תרבית תאים חוץ גופית של זיהום משותף במלריה-HIV

תקציר

מקור: Finney, C. et al., מודל In Vitro למדידת תגובות חיסוניות למלריה בהקשר של זיהום משותף ב- HIV.J. Vis. Exp.(2015)

סרטון זה מדגים את הדור של מודל תרבית תאים בהדבקה משותפת של מלריה-HIV במבחנה. תאי דם חד-גרעיניים היקפיים נגועים ב- HIV בתרבית משותפת עם אריתרוציטים טפיליים של פלסמודיום פלציפרום עשויים לתמוך זה בצמיחתו של זה ולספק תובנות לגבי התגובות החיסוניות והתקדמות המחלה בזיהומים משותפים של HIV ומלריה.

פרוטוקול

כל ההליכים הכרוכים באיסוף דגימות בוצעו בהתאם להנחיות IRB של המכון.

זהירות: עבודה עם דגימות דם אנושיות וטפילי מלריה אנושיים דורשת אמצעי זהירות. תמיד ללבוש מעיל מעבדה, כפפות, ולעבוד בארון בטיחות ביולוגית רמה 2. במקרה של חשיפה מלעורית בשוגג למלריה אנושית, יש לדווח לבריאות ובטיחות לטיפול מניעתי. כמו כן, יש לנקוט שיקולי בטיחות נוספים לעבודה עם נגיף הכשל החיסוני האנושי HIV(+) דם. לבשו מעיל מעבדה עם סגירה אחורית. כפפה כפולה (הכפפה העליונה צריכה להיות לטקס). בצע את כל הטיפול בארון בטיחות ביולוגית ברמה 2. אין להשתמש בזכוכית או בחפצים חדים. אין להשתמש בשואף. יש להניח את כל הפריטים המזוהמים בתמיסת virox או אקונומיקה למשך שעה לפחות לפ....

תוצאות

איור 1. תיאור של ספין פוסט שיפוע פיקול המדגים את מיקומם של PBMCs.

....

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה

שם	חברה	מספר קטלוג	הערות
אלנין	סיגמא	A7377
BD Vacutainer ACD פתרון A	ב.ד.	364506
BD Vacutainer נתרן הפרין	ב.ד.	17-1440-02
DPBS (ללא סידן, ללא מגנזיום)	קורנינג	21-031-CV
סרום בקר עוברי	סיגמא	F1051	יש להשבית את החימום לפני השימוש
Ficoll-Paque PLUS	GE שירותי בריאות	17-1440-02
גנטמיצין (10 מ"ג/מ"ל)	גיבקו	15710-064
סט צביעה Hema3	פישר	122-911
HEPES	פישר	BP310-500
היפוקסנטין	סיגמא	H9636
יונומיצין	סיגמא	I3909
MEM חומצות אמינו לא חיוניות (10mM)	גיבקו	11140
PMA	סיגמא	P8139
אבקת RPMI-1640	טכנולוגיות חיים	31800-022
RPMI-1640 עם L-גלוטמין ו-HEPES	תרמו סיינטיפיק	SH30255.01
סודיום ביקרבונט (אבקה, תרבית תאים)	סיגמא	S5761
נתרן פירובט (100mM)	גיבקו	11360
Tris (בסיס Trizma)	סיגמא	T6066
טריזול	אמביון	15596018
טריפאן בלו (0.4%)	גיבקו	15250-061
תערובת גז טפילים	בהזמנה מיוחדת		3% CO2, 1% O2, איזון N2