יצירת מודל עכברי של מלריה מוחית ניסיונית באמצעות ספורוזואיטים שמקורם ביתושים מארחים

תקציר

מקור: Hoffmann, A. et al., In vivo מעקב אחר התפתחות בצקת ופתולוגיה של כלי דם במודל של מלריה מוחית ניסיונית באמצעות הדמיית תהודה מגנטית.J. Vis. Exp.(2017)

סרטון זה מדגים את הדור של מודל עכבר ניסיוני של מלריה מוחית. ספורוזואיטים שבודדו מנקבות יתושים נגועות בפלסמודיום ברגהיי מוזרקות לוורידי הזנב של עכבר מרוסן, מה שמוביל להפרעה במחסום הדם-מוח ולדלקת במוח, מה שגורם למלריה מוחית. מודל עכבר נגוע זה מציע כלי רב ערך לחקר פתולוגיה מיקרו-וסקולרית in vivo הקשורה למלריה מוחית.

פרוטוקול

כל הנהלים הנוגעים למודלים של בעלי חיים נבדקו על ידי הוועדה המוסדית המקומית לטיפול בבעלי חיים ועל ידי ועדת הבדיקה הווטרינרית JoVE.

1. זיהום

1. להדביק יתושי Anopheles stephensi עם Plasmodium berghei ANKA על ידי האכלתם במשך 15 דקות על עכבר gametocytemic. שמור על יתושים נגועים ב 80% לחות ו 21 °C (75 °F).
2. אספו נקבות יתושים מהכלוב שלהן 17 עד 22 יום לאחר ארוחת הדם. הניחו אותם על קרח כדי להרדים אותם.
3. בעזרת מלקחיים, מניחים שלושה עד ארבעה יתושים על מגלשת זכוכית מכוסה בטיפת מדיום סל"ד קר. מקם את השקופית מתחת למיקרוסקופ.
4. בעזרת מלקחיים, בזהירות למתוח את היתוש בין הראש לגוף. בודדו ....

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה

שם	חברה	מספר קטלוג	הערות
איזופלורן	בקסטר	1001747	להרדמה
דוטארם	גברט	1086923	סוכן ניגודיות Gd-DTPA; 0.5mmol / מ"ל
אמירה (תוכנית עיבוד תמונה)	קבוצת FEI		גרסה Amira 5.3.2
MATLAB	The MathWorks, Inc.,		מהדורת 2012b
ארגז כלים FDT	ספריית התוכנה של FMRIB