אינטובציה אוראלית של דגי זברה בוגרים למתן תרכובות ניסיוניות

תקציר

מקור: Ji, J., Thwaite, R. et al. אינטובציה אוראלית של דגי זברה בוגרים: מודל להערכת ספיגת מעיים של תרכובות ביו-אקטיביות. J. Vis. Exp. (2018).

סרטון זה מדגים טכניקה לאינטובציה פומית של דגי זברה בוגרים למתן תרכובות ניסיוניות לוושט ולניטור ספיגת המעיים שלהם. שיטה זו מציעה מודל רב ערך לחקר הדינמיקה של מניעה אוראלית או תרכובות אחרות בתוך המעי.

פרוטוקול

כל ההליכים הנוגעים למודלים של בעלי חיים נבדקו על ידי הוועדה המוסדית המקומית לטיפול בבעלי חיים ועל ידי ועדת הבדיקה הווטרינרית JoVE

1. פתרונות נדרשים

1. הכינו 150 מ"ג/ליטר (להרדמה) או 300 מ"ג/ליטר (להמתת חסד) של תמיסת אתיל 3-אמינובנזואט מתאן-סולפונט (MS-222) עם מים מהאקווריום שבו מוחזקים דגי הזברה. מלאו מיכל קטן בליטר אחד של תמיסת הרדמה ושמרו אותו מאוורר.
2. מלא מיכל קטן נוסף עם 1 ליטר של מי אקווריום ללא MS-222 להתאוששות דגים ולשמור אותו מאוורר.
3. הפוך 50 מ"ל של PBS 1x מתמיסת מלאי סטרילית פי 10.
4. לניתוח ציטומטריה/בידוד תאי מעיים, הכינו מספיק תמיסת 0.15% קולגנאז סוג IV טרייה עבור 1 מ"ל לדג מתמי....

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה

שם	חברה	מספר קטלוג	הערות
צינור סיליקון	דאו קורנינג	508-001	קוטר פנימי 0.30 מ"מ וקוטר חיצוני 0.64 מ"מ
מחט נעילת Luer	המילטון	7750-22	31 גרם, רכזת Kel-F
מזרק Luer Lock	המילטון	81020/01	100 μL, רכזת Kel-F
קצה פיפטה מסונן	נרבה פלוס	07-613-8300	10 מיקרוליטר
MS-222	סיגמא אולדריץ'	E10521	אבקה
10x PBS	סיגמא אולדריץ'	P5493
נייר סינון	מעבדת מסננים	RM14034252
Atto-488 NHS אסטר	סיגמא-אולדריץ'	41698
DMEM	גיבקו	31966	מדיום הנשר המותאם של דולבקו
ערכת רקמות Maxwell RSC simplyRNA	פרומגה	AS1340