הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
מאמר שיטה
718 צפיות
⸱
8 ביולי 2025
מקור: Brunel, S. F. et al., הדמיה חיה של פעילות אנטי פטרייתית על ידי נויטרופילים ראשוניים אנושיים ומונוציטים בתגובה ל- A. fumigatus.J. Vis. Exp. (2017)
סרטון זה מדגים הדמיה חיה של תאים לניתוח פעילות אנטי-פטרייתית בנויטרופילים אנושיים באמצעות קונידיה פלואורסצנטית של כתב אספרגילוס. בתחילה, הן פלואורסצנטיות אדומה והן מגנטה מזוהות בתוך נויטרופילים, בעוד פלואורסצנטיות אדומה פוחתת עם הזמן, מה שמצביע על השפלה של קונידיה ומאשר את הפעילות האנטי פטרייתית של נויטרופילים.
כל ההליכים המערבים משתתפים אנושיים בוצעו בהתאם להנחיות המוסדיות, הלאומיות והבינלאומיות לרווחת האדם ונבחנו על ידי ועדת הבדיקה המוסדית המקומית.
1. A. fumigatus תרבות ותנאים
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| גליצרול | סיגמא | G6279 | http://www.sigmaaldrich.com |
| בקבוק T75 | גריינר ביו-וואן | 658 175 | http://www.greinerbioone.com/ |
| PBS | גיבקו | 20012-019 | https://www.thermofisher.com/ |
| טווין-80 | פישר סיינטיפיק | 10592955 | https://nl.fishersci.com/ |
| מסנן 40 מיקרומטר | תרמו פישר סיינטיפיק | 22363547 | https://www.thermofisher.com/ |
| 15 מ"ל שפופרת פלקון | גריינר ביו-וואן | 188 261 | http://www.greinerbioone.com/ |
| 50 מ"ל שפופרת פלקון | גריינר ביו-וואן | 227 261 | http://www.greinerbioone.com/ |
| מיליקיו | מיליפור | QGARD00R1 | מים ננו-טהורים פועלים באופן דומה. http://www.merckmillipore.com/ |
| ביוטין | בדיקות מולקולריות | B-6352 | https://www.thermofisher.com/uk/en/home/brands/molecular-probes.html |
| DMSO | סיגמא | D5879 | http://www.sigmaaldrich.com |
| סטרפטאווידין-AF633 | בדיקות מולקולריות | S-21375 | AF633 הוא הפלואורופור היחיד שנבדק עד כה שנותר גלוי בפאגוזומים. https://www.thermofisher.com/uk/en/home/brands/molecular-probes.html |
| צינורות דם EDTA | גריינר ביו-וואן | 455036 | כל צינורות הדם עם סוכן נוגד קרישה צריך לעבוד. http://www.greinerbioone.com/en/start/ |
| פיקול-פאק פלוס | GE שירותי בריאות | 17-1440-03 | http://www3.gehealthcare.com/ |
| כחול טריפאן | תרמו פישר סיינטיפיק | SV3008401 | https://www.thermofisher.com/ |
| HBSS | גיבקו | 14170112 | https://www.thermofisher.com/uk/en/home/brands/gibco.html |
| מיקרו-כדוריות CD14 | Myltenyi ביוטק | 130-050-201 | שיטות בידוד מונוציטים אחרות ניתן להשתמש גם כן, אנו מעדיפים שיטה זו כפי שהוא נותן טוהר גבוה עקבי של מונוציטים מבלי להיות אינטנסיבי עבודה. http://www.miltenyibiotec.com/en/ |
| עמודות MS | Myltenyi ביוטק | 130-042-201 | ראה תגובה ב CD14 microbeads. http://www.miltenyibiotec.com/en/ |
| RPMI + גלוטמקס | גיבקו | 72400-021 | https://www.thermofisher.com/uk/en/home/brands/gibco.html |
| מדיום שאינו תלוי ב-CO2 | תרמו פישר סיינטיפיק | 18045054 | הכרחי אם אין מספיק חילופי CO2 במהלך ההדמיה. https://www.thermofisher.com/uk/en/home |
| μ - שקופית 8 היטב תחתית זכוכית | איבידי | 80827 | זוהי צלחת ההדמיה בה אנו משתמשים, אולם כל צלחת הדמיה מזכוכית בגודל הנכון צריכה לעבוד. http://ibidi.com/ |
| UltraVIEW VoX 3D Live Cell Imaging System | פרקין אלמר | L7267000 | כולל תוכנת volocity לרכישה וניתוח. http://www.perkinelmer.com/ |
