מאמר שיטה

גרימת דמיאלינציה מקומית בעצב הראייה באמצעות ליזולציטין

8 ביולי 2025

במאמר זה

תקציר

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

מקור: You, Y. et al., Visual עורר הקלטה פוטנציאלית במודל חולדה של דמיאלינציה ניסיונית של עצב הראייה. J. Vis. Exp. (2015)

סרטון זה מדגים את ההליך של גישה כירורגית לעצב הראייה בחיה מורדמת ואספקה מדויקת של ליסולציטין כדי לגרום לדמיאלינציה מוקדית, יצירת תנאים נוירופתולוגיים למחקר נוסף.

פרוטוקול

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

כל ההליכים הנוגעים למודלים של בעלי חיים נבדקו על ידי הוועדה המוסדית המקומית לטיפול בבעלי חיים ועל ידי ועדת הבדיקה הווטרינרית JoVE.

1. הזרקת עצב הראייה

  1. להרדים את בעל החיים עם הזרקה intraperitoneal של קטמין (75 מ"ג / ק"ג) ו medetomidine (0.5 מ"ג / ק"ג).
    הערה: לאחר השראת ההרדמה יש להתבונן ברפלקסי הגמילה (בדיקת צביטה, רפלקס קרנית ומישוש וכו') ובהיעדרם כאינדיקציה לתחילת ניתוח. יש לעקוב באופן רציף אחר בעלי החיים לאורך כל הניתוח ולתת את תרופת ההרדמה הנוספת (10% ממינון הקטמין הראשוני לכל תוספת) אם הרפלקסים קיימים. חולדות בוגרות (>12 שבועות) משמשות בניסויים.
  2. לגלח את העור של אזור הניתוח. הניחו את בעל החיים על כרית חימום (37°C) כדי לשמור על חום הגוף במהלך הניתוח. להכין את העור באמצעות יישום מקומי של פובידון-יוד. יש למרוח גריפה כירורגית. יש למרוח משחה אופתלמית מקומית למניעת יובש בקרנית בהרדמה כללית. לשמור על אספסיס באמצעות מכשירים סטריליים.
  3. בצע חתך של 1 עד 1.5 ס"מ בעור מעל מסלולה של עין שנבחרה באופן אקראי. פתח את הרקמה התת עורית כדי להגיע לחלל המסלול באמצעות מספריים קשתית עדינה. פתח את הלחמית ואת הקפסולה הקדמית של טנון מתחת למיקרוסקופ הניתוח.
  4. משכו את השרירים החוץ-עיניים ואת בלוטות הדמעות התוך מסלוליות כדי לחשוף כ-3 מ"מ אורך של עצב הראייה. פתח את שכבות החומר dura ו arachnoid סביב עצב הראייה לאורך באמצעות להב אופתלמי.
  5. הכנס את פיפטת הזכוכית לעצב הראייה במרחק של 2 מ"מ אחורי לגלובוס. מיקרופיפטת הזכוכית מחוברת למזרק המילטון.
  6. הזריקו 1% lysolecithin (0.4 - 1.0 μl, עם 0.02% Evan's Blue אשר אין לו השפעה על myelination) לאט לתוך העצב בערך במשך תקופה של 30 שניות.
  7. תפרו את החתך בעור. החל משחה אנטיביוטית כדי למנוע זיהום. עיניים אחרות יכולות לשמש כבקרות פנימיות להקלטות אלקטרופיזיולוגיות.
  8. הניחו את בעלי החיים על כרית חימום כדי להתאושש מההרדמה.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
לא הוכרז על ניגוד עניינים.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
קטמין 100 מ"ג/מ"ל (קטמיל)מעבדות טרויAC 116
מדטומידין 1 מ"ג/מ"ל (דומיטור)פייזרSC-204073
מערכת שמיכה הומואותרמיתמכשיר הרווארדNC9203819
מזרק המילטוןהמילטון87930
ליסולסיטיןסיגמאL4129
הכחול של אווןסיגמאE2129

הדפסות חוזרות והרשאות

בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה

בקש הרשאה

תגיות

מאמרים קשורים