נוירופתולוגיה

כדי לזהות ניוון מוחי, התחילו עם שקופיות הנושאות את חלקי המוח המפורקים ממודלים של עכברים נוירודגנרטיביים בגילאים שונים.

כדי לדמיין NPs אלה, קח קטע מוח אנושי קבוע deparaffinized.

מוסיפים מים מזוקקים פעמיים לשטיפת החלקים.

לטפל ברקמה עם אוסמיום טטרוקסיד כדי לייצב את מבני התא, כולל lipofuscin.

הומוגניזציה של הרקמה כדי לשחרר חלבונים לתוך החיץ. מעכבי הפרוטאז חוסמים את פעילות הפרוטאז ומונעים פירוק חלבונים.

הוסיפו מאגר העמסה המכיל חומר ניקוי, חומר מחזר וצבע מעקב.

לדגור עם אנזים פרוטאוליטי כדי לעכל את הפריונים הרגילים, ולהשאיר את האגרגטים העמידים שלמים.

יש לדגור עם תמיסת מי חמצן כדי לעכב פרוקסידאזות אנדוגניות ולמנוע כתמים לא ספציפיים.

חלקים אלה מכילים סבכים נוירופיברילריים – צברים חריגים של חלבון טאו הנמצאים בתוך נוירונים בהיפוקמפוס.

כדי לדמיין הפראן סולפט, התחל עם קטע רקמת היפוקמפוס אנושית חולה המכיל פלאקים עמילואיד.

צנטריפוגו את הדגימה כדי להשליך פסולת תאית ולאסוף את הסופרנטנט.

פרוטוקול זה מתאר את מיצוי החלבונים מתאי סרטן עצביים. התאים נשטפים בחיץ ועוברים שיבוש אנזימטי ומכני. הסופרנאטנט העשיר בחלבון המופק נאסף לאחר צנטריפוגה.

סרטון זה מדגים את ההליך להכתמה פלואורסצנטית של נוירונים בקליפת המוח של חולדה עבור מיקרוסקופיה. הוא מכוון לחלבונים מסוג F-actin וחלבונים דנדריטיים כדי לנתח שלמות מבנית ולחשב צפיפות F-actin, שהיא חיונית לחקר תפקוד עצבי ובריאות.

סרטון זה מדגים את הפרוטוקול לבידוד סיבי עמילואיד מתמצית רקמת מוח של עכבר באמצעות צנטריפוגה של שיפוע צפיפות ועיכול של חלבונים שאינם עמילואידים.

סרטון זה מתאר את היצירה של מודל פגיעה עצבית באמצעות מיני חמצן תגובתי (ROS) בנוירונים גרגיריים צרבלריים ראשוניים של עכברים. הוא מפרט את התהליך של גרימת עקה חמצונית על ידי הוספת ריכוזים גבוהים של מי חמצן. חשיפה ל-ROS גורמת לשברים בגדילי הדנ"א ולחוסר יציבות גנומית. בנוסף, חמצון חלבונים תאיים פוגע בתפקודם, בעוד חמצון שומנים פוגע בשלמות הממברנה. מפל זה מוביל לשחרור ציטוכרום c והפעלת קספז, וכתוצאה מכך אפופטוזיס עצבי.

סרטון זה מדגים שיטה להערכת ההשפעות הנוירוטוקסיות של ננו-חלקיקים באמצעות מיקרוגליה. הוא מתאר את השלבים להפעלת מיקרוגליה עם ננו-חלקיקים, סינון מדיה מותנית לבידוד ציטוקינים פרו-דלקתיים שמקורם במיקרוגליה, ובדיקת רעילות נוירונים היפותלמיים עם המדיה המותנית.

הסרטון מדגים גרימת ניוון עצבי בעצבים סגמנטליים של זחל דרוזופילה באמצעות פגיעה מכנית. הציפורן הגחונית של זחלים מורדמים נצבטת באמצעות מלקחיים כדי לגרום לפגיעה בעצבים הסגמנטליים. הזחלים הפגועים נשמרים עם מזון, מה שמאפשר לפגיעה לגרום לניוון של הנוירונים המוטוריים בעצבים, ולגרום להפרעה בצמתים העצביים-שריריים שלהם (NMJs).

סרטון זה מדגים הליך ליצירת מודל חולדה של מחלת פרקינסון על ידי הזרקת רעלן עצבי 6-הידרוקסידופמין (6-OHDA) למוח. עירוי הרעלן העצבי לתוך צרור המוח הקדמי המדיאלי (MFB) מכוון באופן ספציפי לנוירונים דופמינרגיים האחראים על שליטה מוטורית, מה שמוביל להשמדתם ולשכפול תסמיני מחלת פרקינסון.

בסרטון זה מודגם פרוטוקול מדורג של תאי גזע עובריים אנושיים לאורגנואידים עצביים. השיטה כוללת גרימת היווצרות רוזטה עצבית, ואחריה הבשלה מבוקרת וטיפוח סופי על קרום הידרופובי כדי להשיג אורגנואידים עצביים מפותחים במלואם.

סרטון זה מדגים את ההתמיינות של תאי גזע עובריים אנושיים (תאי גזע עובריים) לנוירונים דופמינרגיים, כדי לספק מודל לחקר מחלת פרקינסון. תאי גזע עובריים בתרבית בתווך אינדוקציה עצבי בצלחת מיקרו-באר כדי ליצור נוירוספרות תלת-ממדיות. לאחר מכן הם מתורבתים במדיום אינדוקציה עצבי כדי לקדם את ההתמיינות לנוירוני אב דופמינרגיים. ההבשלה הסופית של תאי העצב מתרחשת בהחדרת תרבית בתנאי ממשק אוויר-נוזל, וכתוצאה מכך אורגנואידים תלת-ממדיים המורכבים מנוירונים דופמינרגיים בוגרים.

סרטון זה מדגים הערכה חוץ גופית של קריסת חרוט גדילה עצבי על ידי צברי עמילואיד-β (Aβ). טיפול בנוירונים עם אגרגטים Aβ גורם לערעור יציבות השלד הציטו-שלד, מה שמוביל לקריסת מדוכי צמיחה בקצה האקסונים. התאים המטופלים מושווים לתאי ביקורת כדי להעריך את מידת קריסת חרוט הגדילה.

הסרטון מדגים הליך להכנת פרוסות מוח קליפת המוח האנושיות מחולי אלצהיימר לניתוח שקיעת פפטידים עמילואיד-בטא (Aβ) באמצעות ספקטרומטריית מסה של ספיחת לייזר/הדמיה יינון בסיוע מטריצה (MALDI-IMS). השלבים כוללים הכנת השקפים, טיפול ברקמה לשיפור היינון וניתוח הפיזור המרחבי של פפטידי עמילואיד-בטא.

סרטון זה מדגים את ההכתמה החיסונית של תאי עצב המטופלים בצברי אלפא-סינוקלאין (αS). תאי העצב מטופלים תחילה באמצעות אגרגטים αS. לאחר מכן הם קבועים, חדירים ומטופלים בתמיסת חסימה. נוגדנים ראשוניים מתווספים, ואחריו נוגדנים משניים המסומנים פלואורסצנטית וכתם גרעיני. לאחר מכן הדגימה מורכבת ונצפית תחת מיקרוסקופ.

סרטון זה מדגים הליך לגרימת ניוון רשתית בדגי זברה בוגרים באמצעות פגיעה בלייזר. הלייזר מכוון לתאים קולטי אור ברשתית, וגורם למוות תאי ולתהליך ניווני. נזק זה מפעיל תאי גליה מולר (MG), מה שמוביל להתמיינותם לאבות תאי גזע המסייעים בהתחדשות הרשתית.

סרטון זה מדגים את ההליך של הזרקת פפטידים עמילואידים מונומריים למוחם הקדמי של דגי זברה בוגרים כדי ליצור רעילות עמילואידית, המחקה את הנזק העצבי שנראה במחלת...

סרטון זה מדגים את הפרוטוקול למדידת הפעלת קולטן ריח בתאים נגועים באמצעות ביוסנסור מחזורי אדנוזין מונופוספט (cAMP) וזיהוי לומינסנציה. השיטה מיושמת לחקר אינטראקציות קולטן-ליגנד ומסלולי איתות בנוירוני ריח.

סרטון זה מדגים את ההליך להזרקת פפטידים עמילואיד-בטא, אלומיניום כלורי וגורם גדילה נוירו-דלקתי, אשר ביחד מסייע בהיווצרות רובד עמילואיד רעיל באזור ההיפוקמפוס. זה גורם לפגיעה בזיכרון בחולדה, האופיינית למחלת אלצהיימר.

סרטון זה מדגים את העירוי הסטריאוטקסי המדויק של עמילואיד-בטא לתוך הפיתול המשונן כדי לבסס מודל עכברי של מחלת אלצהיימר. קביעת קואורדינטות מדויקת והעברה מבוקרת של חלבוני עמילואיד-בטא גורמים לפירוק עצבי, משבשים את עיבוד הזיכרון ותורמים להתפתחות מחלת אלצהיימר.

סרטון זה מדגים הזרקה של סיבי אלפא-סינוקלאין לעכבר כדי לגרום לדלקת עצבית. הסיבים מוזרקים תוך צפקית לעכבר מהונדס המבטא חלבוני אלפא-סינוקלאין שעברו מוטציה. עם הגעתם למערכת העצבים המרכזית, הסיבים נכנסים לנוירונים וגורמים לצבירה של החלבונים שעברו מוטציה. הצברים התפשטו לתאי עצב שכנים, מיקרוגליה ואסטרוציטים. זיהוי הצברים מעורר תאי מיקרוגליה לגרום לדלקת עצבית, ולפגוע בנוירונים.

סרטון זה מדגים את ההליך להדמיית in vivo של C. elegans המבטאים חלבונים דמויי פריונים המתויגים בחלבון פלואורסצנטי אדום. הפרוטוקול כולל השתקת נמטודות על משטח אגרוז למיקרוסקופ קונפוקלי בהילוך מהיר, החושף צבירה והובלה של חלבונים בתוך ובין תאים. טכניקה זו חיונית לחקר צבירת חלבונים הקשורים למחלות נוירודגנרטיביות.

סרטון זה מדגים את התהליך של הזרקת וקטור ויראלי לתוך חומר החולדה השחור כדי למדל מחלת פרקינסון. הוא מתאר את השלבים להכנת החולדה, הזרקת המיקרו של הווקטור הנגיפי לתוך החומר השחור, ואת הליך ההתאוששות.

סרטון זה מסביר את תהליך הבידוד וההעשרה של צברי חלבונים בלתי מסיסים בדטרגנטים מרקמת מוח אנושית קפואה לאחר המוות. הוא מדגים שלבים מרכזיים, כולל הומוגניזציה, טיפול בחומרי ניקוי, סוניקציה ואולטרה-צנטריפוגה כדי להפריד ולטהר את האגרגטים הבלתי מסיסים. השלב האחרון כולל מסיסה של האגרגטים במאגר אוריאה לניתוח נוסף.

סרטון זה מדגים הדמיה וכימות של צברי חלבונים במוחות דרוזופילה מהונדסים גנטית. המוח מקובע, נשטף, ומטופל עם סוכן antifading לפני הרכבה. התמונות מצולמות באמצעות מיקרוסקופ קונפוקלי ומכומתות כדי לצפות בהעברת צברי חלבונים מוטנטיים.

סרטון זה מדגים פרוטוקול לחקירת לוקליזציה משותפת של קולטני אורקסין וקנבינואידים ברקמת מוח של דגי זברה בוגרים הנגרמים על ידי השמנת יתר נורמלית ודיאטה (DIO) באמצעות אימונופלואורסנציה.

סרטון זה מדגים את תהליך כימות הצטברות אלפא-סינוקלאין בנוירונים עובריים של עכברי דופמין שטופלו מראש בסיבי אלפא-סינוקלאין שנוצרו מראש. הוא מתאר את השלבים לתיקון, צביעה וכימות של נוירוני הדופמין המכילים אגרגטים אלפא-סינוקלאין באמצעות immunofluorescence.

סרטון זה מדגים כיצד למדוד את פעילות הפרוטאזום בתאים תת-תאיים שונים של האמיגדלה הצידית ממוחות של חולדות מותני פחד ולשלוט בהם באמצעות בדיקת פפטיד פלואורוגני. הפרוטאזום חותך את המצע הפפטידי הפלואורוגני, ומשחרר מולקולות פלואורסצנטיות, אשר מכומתות באמצעות קורא לוחות כדי להעריך את פעילות הפרוטאזום בשברים של חלבון גרעיני וסינפטי. פעילות גרעינית מוגברת מצביעה על שינויים בביטוי גנים, בעוד שפעילות סינפטית מופחתת מצביעה על ייצוב חלבונים הנחוץ לתחזוקת הזיכרון לטווח ארוך.

סרטון זה מדגים את התהליך של גרימת דיסקינזיות המושרות על ידי לבודופה במודל חולדות פרקינסון על ידי מתן לבודופה לצד מעכב המרת דופמין. זריקות חוזרות ונשנות מעוררות יתר על המידה את נוירוני המוח, וכתוצאה מכך תפקוד מוטורי לקוי.

סרטון זה מדגים את השראת כאב נוירופתי פה ופנים במודל חולדה על ידי קשירת העצב האינפרא-אורביטלי. התוצאה היא נזק עצבי ודלקת, הגורמים לאיתות כאב חריג ומחקים מצבי כאב כרוניים, שניתן להשתמש בהם כדי לחקור את מבחן הכאב הפה והפנים.

סרטון זה מדגים את השיטה לזיהוי נוירונים מזדקנים בחלקים אורגנואידיים בקליפת המוח על ידי צביעה לפעילות בטא-גלקטוזידאז, המוגברת בתאים מזדקנים. האנזים חותך מצע כדי לייצר תוצר כחול, ואחריו תצפית מיקרוסקופית על הנוירונים המוכתמים.

סרטון זה מדגים את היצירה של מודל עכבר דה-מיאלינציה מוקדית באמצעות הזרקת ליזופוספטידילכולין דו-נקודתית (LPC). גולגולת של עכבר מורדם חשופה. קואורדינטות ההזרקה נקבעות, ונקדח חור כדי לאפשר הזרקות LPC באתרים ממוקדים. LPC גורם לדמיאלינציה מוקדית של נוירונים באמצעות דלקת, בעוד שהזרקה של שתי נקודות מבטיחה את קיימותו.

סרטון זה מדגים את תהליך ההדמיה של נוירון פנימי מלא ביוציטין בקטע היפוקמפוס של חולדה, ומדגיש את זהותו הנוירוכימית באמצעות שימוש בנוגדנים ספציפיים ומיקרוסקופיה פלואורסצנטית.

סרטון זה מדגים את הצביעה האימונוהיסטוכימית של חלבון S-100 בקטעי ביופסיה של יניקה רקטלית. חלקים שנאספו על ידי אנטיגן נחסמים ומטופלים בנוגדנים ראשוניים, ואחריהם נוגדנים משניים נגד S-100, סמן למחלת הירשפרונג. מצע כרומוגני מתווסף כדי לצבוע את התאים הממוקדים. הדגימות מיובשות ומורכבות לפני ההדמיה מתחת למיקרוסקופ.

סרטון זה מדגים את השיטה להשראת דה-מיאלינציה בתאי עצב בחוט השדרה של עכברים באמצעות זריקות ליזולציטין, ואחריה רמיאלינציה באמצעות נדידה והתמיינות של תאי מבשר אוליגודנדרוציטים. התהליך פוגע ואז משחזר בהדרגה את העברת האותות העצביים.

סרטון זה מדגים את תהליך התמרת תאי עצב אנושיים עם נגיף לנטי המקודד חלבון טאו אנושי מוטנטי המתויג בחלבון פלואורסצנטי צהוב (YFP) כדי לחקור צבירת חלבונים. הוא מתאר את השלבים מכניסה ויראלית לביטוי טאו מוטנטי, ומגיע לשיאו בהיווצרות אגרגטים ציטופלזמיים גלויים בתאי העצב.

סרטון זה מדגים את התיוג של תאים עצביים עם נוגדנים לקומפלקסים של שרשרת נשימה מיטוכונדריאלית, חלבון הקשור ל-DNA מיטוכונדריאלי וחלבון הממברנה החיצונית המיטוכונדריאלית, ואחריו זרימה ציטומטרית כדי לכמת את רמותיהם.

סרטון זה מדגים את הליך מדידת פעילות γ-secretase בתאים אנושיים מהונדסים גנטית באמצעות מערכת השראת טטרציקלין. התהליך כולל השראת ביטוי גן APP עם טטרציקלין, יצירת פפטידים β עמילואיד והפעלת ייצור לוציפראז. לאחר מכן נמדדת הביולומינסנציה הנובעת מתגובת לוציפראז-סובסטרט, המשקפת את פעילות γ-secretase.

פרוטוקול זה מתאר את השימוש באימונוהיסטוכימיה לזיהוי אזורי לוקוס קורולאוס במקטעי מוח של עכברים. על ידי התמקדות בדופמין β-הידרוקסילאז עם נוגדנים ירוקים המסומנים בפלואורופור, נוירונים המייצרים נוראדרנלין מוצגים כפלואורסצנטיות ירוקה תחת מיקרוסקופ.

הסרטון מדגים את תהליך השימוש בבדיקת מיקרודיאליזה לאיסוף חלבונים חוץ-תאיים מהנוזל הבין-תאי (ISF) של מוח עכבר. בדיקת מיקרודיאליזה, המצוידת בקרום חדיר למחצה חתוך במשקל מולקולרי גבוה, מוחדרת למוחו של עכבר מורדם באמצעות צינורית מנחה מושתלת. הגשושית, המחוברת למשאבות, מאפשרת לחצץ פיזיולוגי לחלחל את רקמת המוח ולהתערבב עם ה-ISF. חלבונים ב-ISF מתפזרים על פני הממברנה החדירה למחצה ונאספים לניתוח.

סרטון זה מדגים את השיטה של גרימת מתח כרוני בעכבר באמצעות קיבוע חוזר ונשנה, מה שמוביל לשחרור קורטיקוסטרון ולהפחתת פעילות קולטני הגלוטמט בנוירונים, מה שמביא להתנהגות דמוית דיכאון.

סרטון זה מדגים את ההליך להכנה וטיפול בחצי פרוסות מוח של חולדות עם פפטיד נוירוטוקסיל כדי לחקות ניוון עצבי. הפרוטוקול מאפשר ניתוח אירועים ניווניים על ידי השוואה ישירה של פרוסות בקרה ומטופלות באותו מישור אנטומי.

סרטון זה מדגים את השימוש בתאי גנגליון שורש גבי שעברו טרנספטציה כדי לחקור שחרור נוירוטרנסמיטר על ידי גירויים עם אגוניסט קולטן נוירופפטיד.

סרטון זה מדגים את הצביעה האימונוהיסטוכימית של סיבים כולינרגיים בגרעין הבסיסי של אזור מיינרט של מקטעי מוח של עכבר. הקטעים נחסמים ומטופלים בראשוני כנגד כולין אצטילטרנספראז, ואחריו נוגדנים משניים ביוטיניליים. מתווספים קומפלקסים של אבידין-ביוטין-פרוקסידאז, הנקשרים לנוגדנים משניים, ואחריהם המצע הכרומוגני. לאחר מכן החלקים מיובשים ומורכבים לפני ההדמיה מתחת למיקרוסקופ.

סרטון זה מדגים את הערכת ספיגת הדופמין בסינפטוזומים שנאספו ממוחות עכברים. הוא מתאר שלבים להכנת סינפטוזומים לספיגת דופמין באמצעות מובילי דופמין, טיפול בהם בריכוזים משתנים של דופמין עם תווית רדיו, בידוד הסינפטוזומים ומדידת רדיואקטיביות כדי לכמת את ספיגת הדופמין.

סרטון זה מדגים את ההליך לצביעה של פרוסות מוח קבועות של חולדות המכילות אינטרנוירונים מלאים בביוציטין. הפרוטוקול כולל דגירה עם קומפלקס אבידין-ביוטין (ABC), צביעה עם HRP ומצע כרומוגני, שימור מבנים עם אוסמיום טטרוקסיד והטמעת הרקמה בשרף להדמיה.

סרטון זה מדגים את הזיהוי של סינתזת RNA של קולטני סרוטונין באמצעות בדיקות אוליגונוקלאוטידים ברקמת מוח של חולדות המושפעות מתסמונת סרוטונין. הפרוטוקול כולל טיפול מקדים ברקמות, הכלאת בדיקה וזיהוי אנזימטי כדי לדמיין ולכמת את ביטוי ה-RNA של קולטני סרוטונין במיקרוסקופ.

בסרטון זה, נעשה שימוש בפרוסת מוח מוח של עכבר כדי לחקור אינטראקציות סינפטיות בין סיבים מקבילים, סיבים מטפסים ותאי פורקינג'ה, החיוניים לשליטה מוטורית. גירוי של סיבים מטפסים גרם לדיכאון ארוך טווח (LTD) בתאי פורקינג'ה, החליש את החוזק הסינפטי וכתוצאה מכך תגובה מופחתת לגירוי סיבים מקבילים.

סרטון זה מדגים את הצביעה האימונופלואורסצנטית של מוח דרוזופילה טרנסגני להדמיה חד-תאית של תאי גליה. המוח מבטא חלבונים ממוקדי ממברנה המאוחים עם שילובים שונים של אפיטופים אנטיגניים תחת שליטת מערכת רקומבינאז ספציפית לגליה. המוחות המבודדים והקבועים מוכתמים בנוגדנים ראשוניים ספציפיים לאפיטופים האנטיגניים, ואחריהם נוגדנים משניים מצומדים פלואורופור. תיוג זה מאפשר הדמיה בו-זמנית של תת-אוכלוסיות שונות של תאי גליה על פני אזורי מוח שונים.

סרטון זה מדגים הליך כירורגי מונחה סטריאוטקטי להסרת קליפת המוח השמיעתית בחולדה. השלבים כוללים זיהוי ציוני דרך אנטומיים בחולדה מורדמת המאובטחת במסגרת סטריאוטקטית, יצירת חלון על הגולגולת מעל קליפת המוח השמיעתית, שאיבת שכבות קליפת המוח ומתן טיפול לאחר הניתוח להערכת השפעת האבלציה על עיבוד הקול.

בסרטון זה, אנו מתארים את ההליך לביצוע צביעה פלואורסצנטית באמצעות מיקרוסקופ פלואורסצנטי כדי להדגים צביעת פלואידין של תאי פסגה עצבית שגודלו על הידרוג'לים בעלי קשיחות משתנה כדי לדמיין ולנתח את ארגון השלד התאים.

סרטון זה מדגים את הקישור הצולב של חלבוני פני השטח העצביים באמצעות Bis-sulfosuccinimidyl suberate או BS3. מוח עכבר מבודד ומקורר מחולק לעטרה. האזור הרצוי מופק מהחלקים, טוחן ומטופל ב- BS3. BS3 מקשר חלבונים על פני השטח כמו קולטני GABA, ומשאיר חלבונים פנימיים ללא שינוי. התגובה מרווה בגליצין לפני עיבוד הדגימות להמשך ניתוח.

הסרטון מדגים טכניקה למדידת ספיגת הגלוקוז בתאי עצב מוטוריים של זחל Drosophila באמצעות חיישן גלוקוז תוך-תאי מבוסס העברת אנרגיה בתהודה פלואורסצנטית (FRET). לאחר ניתוח הזחלים כדי לחשוף את חוט העצב הגחוני, הנוירונים המוטוריים נראים דרך הקרינה הנפלטת על ידי הפלואורופור התורם של החיישן. כאשר מגורה עם גלוקוז, FRET בין התורם של החיישן לפלואורופורים המקבלים מפעיל את פליטת הקרינה מהמקבל, ומאפשר השוואה של ספיגת הגלוקוז בין זחלי בקרה לזחלים מוטנטיים עם חילוף חומרים מוגבר של גלוקוז.

סרטון זה מדגים את ההליך לצביעה חיסונית של קטע קבוע של רקמת מוח של עכבר עם אסטרוציטים מסומנים פלואורסצנטיים באמצעות נוגדנים ראשוניים ומשניים ולכידת התמונות של האסטרוציטים המוכתמים באמצעות מיקרוסקופיה קונפוקלית.

סרטון זה מדגים כיצד לבודד תאי פורקינג'ה מרקמת מוח מוחי אנושית לאחר המוות באמצעות מיקרו-דיסקציה של לכידת לייזר.

סרטון זה מדגים פרוטוקול מפורט שלב אחר שלב להכנת מקטעי רקמת מוח של עכברים קפואים לניתוחים במורד הזרם.

סרטון זה מדגים את הפיתוח של מודל תרבית איברים פרו-דלקתית וניוונית למחלת דיסק בין-חולייתי בשלב מוקדם (IVD) באמצעות TNF-α. הוא מתאר את הליך הזרקת TNF-α לדיסק הבין חולייתי ומסביר את המנגנונים שדרכם TNF-α גורם לדלקת והשפלה של ה- IVD.

סרטון זה מדגים את הדיסוציאציה של רקמת מוח קפואה של חולדה לתרחיף חד-תאי באמצעות עיכול אנזימטי וטריטורציה מכנית. התאים המוכנים מקובעים וחדירים באתנול ליישומים במורד הזרם כמו ציטומטריית זרימה או ניתוח ביטוי גנים.

הסרטון מדגים את ניתוח מצב הפלמיטוילציה של חלבוני קרום התא המבודדים מרקמת מוח העכבר. התהליך כולל חשיפת הציסטאין הלא-פלמיטוילטי וחסימתם, ולאחר מכן שימוש בפולימר שנקשר לציסטאין הפלמיטוילטי, ומסייע בהערכת מצב הפלמיטוילציה של החלבונים המבודדים.

סרטון זה מדגים שיטה לייצור מיקרו-חרוזים פולימריים העוטפים תאים מפרישי עמילואיד-בטא נוירוטוקסיים. תרחיף התא-פולימר מעובד באמצעות מכשיר לייצור מיקרו-חרוזים, כאשר ג'לציה פולימרית מושגת באמצעות קישור צולב של סידן, ויוצר מיקרו-חרוזים כדוריים סביב התאים. הפולימר מאפשר התפשטות תאים תוך שחרור מבוקר וארוך טווח של עמילואיד-בטא, המדמה את הצטברותו במחלת אלצהיימר.

הסרטון מדגים הליך שלב אחר שלב לניתוח סימטרי של מוח אנושי קבוע לאחר המוות, הכנת גושי רקמה קטנים יותר לניתוח נוסף.

סרטון זה מדגים את ההליך להערכת יכולת שימור הסידן במיטוכונדריה על ידי ניטור שינויים בזמן אמת בקרינה כאשר המיטוכונדריה סופגת סידן. בדיקה זו שימושית לחקר תפקוד המיטוכונדריה ותהליכים הקשורים לסידן, כולל אפופטוזיס ומחלות ניווניות.

סרטון זה מדגים את ההשפעה של עירוי תרופות רציף למוח העכבר על רמות הגלוקוז בדם. מטבוליזם של גלוקוז מוערך על ידי איסוף דם מזנב עכבר בצום ומדידת רמות הגלוקוז לפני ואחרי מתן גלוקוז דרך הפה. סבילות לאינסולין מוערכת על ידי הזרקת אינסולין לעכבר, כאשר רמות הגלוקוז נרשמות במרווחי זמן ספציפיים.

בסרטון זה, חולדה מורדמת עוברת הליך עיניים שבו מוזרקים חרוזים מגנטיים לתוך החדר הקדמי תחת שדה מגנטי כדי לחסום את הזווית האירידו-קרנית. חסימה זו חוסמת את הרשת הטרבקולרית, מונעת ניקוז הומור מימי ומובילה ללחץ תוך עיני מוגבר, הפוגע בתאי הגנגליון ברשתית ובעצב הראייה. זה מפתח מצב דמוי גלאוקומה.

מקור: Kummari, E., et. al., לכידת לייזר מיקרו-דיסקציה - הדגמה של בידוד של נוירונים בודדים של דופמין וכל האזור הטגמנטלי הגחוני., J. Vis. Exp. (2015) בסרטון זה, אנו מדגימים את פרוטוקול האימונוהיסטוכימיה עבור נוירונים של דופמין בקטעי רקמת המוח עבור מיקרודיסקציה של לכידת לייזר לאחר מכן.

מקור: Bennett, S. A., et al., אפיון שינויים בשינוי פוסט-תרגומי של היסטון במודלים של חלבונים ניווניים של שמרים. J. Vis. Exp. (2019). סרטון זה מדגים את ההליך של הערכת שינויים בהיסטון בתאי שמרים המבטאים יתר על המידה חלבונים ניווניים. השלבים כוללים ליזיס תאים, צנטריפוגה, אלקטרופורזה, העברת ממברנה וזיהוי מבוסס נוגדנים של היסטונים ששונו.

מקור: Yan, Z., et al. הערכת ההשפעה האנטי-דיכאונית של Xiaoyaosan על עכברים הסובלים מלחץ כרוני. J. Vis. Exp. (2019). הסרטון מדגים את תהליך הקמת מודל עכברי של דיכאון כרוני הנגרם על ידי מתח והערכת התנהגויות דיכאון. היישום הכרוני של גורמי לחץ שונים מעורר שחרור של קורטיקוסטרון, מה שמוביל לעירור יתר עצבי ובסופו של דבר למוות עצבי, מה שגורם לתסמינים דמויי דיכאון בעכברים.

מקור: Bétemps, D., et al., זיהוי α-synuclein הקשור למחלה על ידי ELISA משופר במוחם של עכברים טרנסגניים המבטאים יתר על המידה A53T אנושי מוטציה α-synuclein. J. Vis. Exp. (2015). סרטון זה מדגים את ההליך לאיתור חלבון α-synuclein הקשור למחלות נוירודגנרטיביות ברקמת המוח מעכברים טרנסגניים באמצעות ELISA. השלבים כוללים הומוגניזציה של רקמות, צנטריפוגה וזיהוי ELISA של חלבון α-synuclein כדי לכמת את צורותיו הקשורות למחלה.

מקור: Wulf, M., et.al. פרוטוקול מבוסס מיקרו-דיסקציה בלייזר לניתוח LC-MS/MS של הפרופיל הפרוטאומי של גרגירי נוירומלנין. J. Vis. Exp. (2021). סרטון זה מדגים את הניתוח של דגימות פפטיד מגרגירי נוירומלנין (NMGs) שבודדו מרקמת מוח אנושית לאחר המוות. הפפטידים מופרדים תחילה באמצעות כרומטוגרפיה נוזלית בעלת ביצועים גבוהים (HPLC) ולאחר מכן מנותחים על ידי ספקטרומטריית מסה כדי לקבוע את יחסי המסה למטען שלהם (m/z). פפטידים ממוקדים מפוצלים כדי לזהות שינויים לאחר התרגום והנתונים המתקבלים מושווים למסד נתונים...

מקור: Zhi, L. et al., מדידת קצב צריכת החמצן בפרוסות סטריאטליות חריפות מעכברים בוגרים. J. Vis. Exp. (2022). סרטון זה מדגים כיצד למדוד את קצב צריכת החמצן המיטוכונדריאלי (OCR) בפרוסות מוח סטריאטליות של עכברים. הוא מפרט את השלבים להכנת לוחית הרקמה ומחסנית החיישן, טעינתם למנתח השטף, ומסביר את התהליכים התאיים העומדים בבסיס דפוסי OCR.

מקור: Josiah, S. S., et al. חקר הפונקציות והפעילויות של K-Cl Co-Transporter KCC2 באמצעות Western Blotting. J. Vis. exp. (2022). הסרטון מדגים את השלבים לאיתור וכימות חלבון אשלגן-כלוריד זרחני קוטרנספורטר 2 (KCC2) בליזאט תא. תהליך זה כולל משקעים חיסוניים כדי לבודד KCC2 זרחני וכימילומינסנציה כדי לכמת את החלבון המבודד.

מקור: Lani-Louzada, R., et al. צריבה במעגל מלא של מקלעת כלי הדם הלימבלית לגלאוקומה הנגרמת בניתוח במכרסמים. J. Vis. Exp. (2022). סרטון זה מדגים את הכימות של תאי גנגליון רשתית מרשתית חולדה קבועה כימית הנתונה לצריבה במעגל מלא של מקלעת כלי הדם הלימבלית. התהליך כולל חדירה, צביעת נוגדנים וצביעה נגדית גרעינית, ולאחר מכן הדמיה תחת מיקרוסקופ אפיפלואורסצנטי כדי להעריך את ההשפעה של לחץ תוך עיני מוגבר על כדאיות תאי הגנגליון ברשתית.

מקור: Jensen, V. N., et al. מדידה חוזרת של פעילות שרירי הנשימה ואוורור במודלים של עכברים של מחלות עצב-שריר. J. Vis. Exp. (2017). סרטון זה מדגים את השיטה להקלטת אותות פלתיסמוגרפיה ואלקטרומיוגרפיה בו זמנית במודל עכבר ALS הנע בחופשיות. ההליך כולל שימוש באלקטרודות מושתלות ומשדר כדי ללכוד את פעילות השרירים, לצד תא פלתיסמוגרפיה לניטור דפוסי נשימה, כדי לחקור את תפקידם של שרירי העזר בעכבר ALS.

מקור: Jiang, X., et al. השראה והערכה של מודל עכברי של קוצר ראייה ניסיוני. J. Vis. Exp. (2019)סרטון זה מדגים הליך לגרימת קוצר ראייה בעכבר באמצעות התקנה של מסגרת עדשה מותאמת אישית. המסגרת מאובטחת לגולגולת החשופה עם דבק דנטלי, ועדשות קעורות מוחדרות כדי להזיז את נקודת המוקד מאחורי הרשתית. הגדרה זו מגרה את התארכות גלגל העין המובילה לקוצר ראייה.

מקור: Jolly, S., et.al. שילוב של פלואורסצנציה כפולה בהכלאה באתר עם תיוג חיסוני לזיהוי ביטוי של שלושה גנים במקטעי מוח של עכברים. J. Vis. Exp. (2016). סרטון זה מדגים את השימוש בפלואורסצנציה כפולה בהכלאה באתרה כדי לדמיין את הביטוי של שתי מטרות RNA במקטעי מוח של עכברים. הפרוטוקול כולל זיהוי רציף של RNA באמצעות בדיקות המסומנות בפלואורסצאין איזותיוציאנט ודיגוקסיגנין, ואחריו הגברת אות אנזימטית להגברת הרגישות. הקרינה המתקבלת מאפשרת ניתוח לוקליזציה משותפת של רנ"א המטרה בתוך הרקמה.

מקור: Baleriola, J., et. al., זיהוי mRNAs מקומיים אקסונליים בחלקי מוח באמצעות הכלאה ברזולוציה גבוהה באתר. J. Vis. Exp. (2015)סרטון זה מדגים את זיהוי ה-mRNA בתוך אקסונים כולינרגיים בפרוסות היפוקמפוס קבועות של עכבר באמצעות הכלאה פלואורסצנטית באתרה וצביעת נוגדנים. מיקרוסקופיה פלואורסצנטית חושפת את הלוקליזציה המרחבית של mRNAs מתויגים בבדיקה וכולין אצטילטרנספראז בנוירונים כולינרגיים.

מקור: Zhang, J., et al. ניתוח אימונוגולד כמותי ברזולוציה גבוהה של קולטני ממברנה בסינפסות סרט הרשתית. J. Vis. Exp. (2016)סרטון זה מדגים טכניקת מיקרוסקופ אלקטרונים להמחשת לוקליזציה של קולטני נוירוטרנסמיטורים בסינפסות רשתית. חלקי הרשתית מכילים תאי גנגליון ברשתית המציגים קולטנים נוירוטרנסמיטורים הקשורים לממברנה ומסומנים בתת-יחידה B של רעלן כולרה (CTB). עם תיוג הסמנים בנוגדנים מצומדים לננו-חלקיקי זהב וצביעה נגדית של הקטע במתכות כבדות, קולטני ה-RGC מוצגים במיקרוסקופ.

מקור: de March, C. A. et. al., ניטור בזמן אמת במבחנה של הפעלת קולטני ריח על ידי ריח בשלב האדים. J. Vis. Exp. (2019)סרטון זה מדגים את השיטה לניטור הפעלה בזמן אמת של קולטני ריח בתאי יונקים רקומביננטיים באמצעות מדידת לומינסנציה. קשירת ריח מפעילה הפעלת חלבון G וייצור cAMP, ומפעילה חלבוני גלו-סנסור הפולטים זוהר בעת קשירת המצע, ומספקים מדד כמותי לתגובת הקולטן.

מקור: Alluri, H., et al. מחסור בחמצן-גלוקוז וחמצון מחדש כמודל פגיעה באיסכמיה-רפרפוזיה במבחנה לחקר תפקוד לקוי של מחסום דם-מוח. J. Vis. Exp. (2015). הסרטון מדגים את הלוקליזציה הפלואורסצנטית של חלבוני צומת הדוקים וסיבי מתח בתאי אנדותל מיקרו-וסקולריים במוח של חולדות (RBMECs). בשכבה החד-שכבתית הלחוצה, נוגדנים המסומנים פלואורסצנטית משמשים לתיוג חלבוני הצומת ההדוק, בעוד שהפלואידין המתויג בפלואורופור מסמן את סיבי הלחץ. המולקולות המסומנות מומחשות לאחר מכן באמצעות מיקרוסקופיה קונפוקלית.

מקור: Eid, L. & Parent, M. הכנת רקמת מוח של פרימטים לא אנושיים להטמעה מוקדמת של אימונוהיסטוכימיה ומיקרוסקופ אלקטרונים. J. Vis. Exp. (2017). סרטון זה מדגים את הכנת רקמת מוח פרימטים לא אנושית קבועה באלדהיד באמצעות אימונוהיסטוכימיה מוקדמת למיקרוסקופ אלקטרונים. הוא מתאר את השלבים לתיוג חיסוני של חלבון עצבי ספציפי, ואחריו תגובת פרוקסידאז המייצרת משקע צבעוני, המאפשר הדמיה של חלבון המטרה במיקרוסקופ אלקטרונים.

מקור: Evilsizor, M. N., et. al., פריימר לאימונוהיסטוכימיה על רקמת מוח של חולדה בהקפאה: דוגמה לצביעה עבור מיקרוגליה ונוירונים. J. Vis. Exp. (2015)סרטון זה מדגים תהליך צביעה אימונוהיסטוכימי שלב אחר שלב על רקמת מוח של חולדה שהוקפאה כדי להמחיש את הסידור המרחבי של מיקרוגליה ונוירונים.

מקור: Kirchner, K.N., et al., שיטה לניקוי רקמות הידרופוביות לרקמת מוח של חולדות. J. Vis. Exp. (2020). סרטון זה מדגים את השיטה לניקוי רקמות הידרופוביות של דגימת רקמת מוח של חולדה. הדגימה מיובשת ברצף במתנול, מטופלת בתערובת דיכלורומתאן ומתנול להמסת שומנים ופיגמנטים, ומועברת לאתר דיבנזיל לניקוי רקמות מלא, המאפשר הדמיה מפורטת ללא חתך דק.

כדי לזהות חיידקים אלה, לקחת קטע מוח אנושי deparaffinized, rehydrated, נגוע חיידקים נגועים עם אנטיגנים חלבון חשוף phosphatase אנדוגני מומת.

הנגיף מדביק נוירונים פירמידליים בקליפת המוח, ומבטא חלבונים נגיפיים הממוקמים בתוך מבנים גרגיריים תוך ציטופלזמיים המכונים גופי הכללה.

לשטוף כדי להסיר את פרפין, ולאחר מכן rehydrate את הרקמה באמצעות ירידה בריכוזי אלכוהול.

סרטון זה מדגים את הבידוד של חלבונים תוך-תאיים ותוך-תאיים מתרבית אסטרוציטים. תרבית האסטרוציטים מונחת על קרח כדי לעכב אנדוציטוזה, ואז חלבוני פני התא מסומנים בריאגנט ביוטינילציה. התאים עוברים ליזה כדי לשחרר את החלבונים הביו-טיניליים שעל פני התא ואת החלבונים התוך-תאיים שאינם ביוטינילטים. לבסוף, חרוזים מצופים סטרפטווידין משמשים להפרדת חלבוני פני התא הביוטיניליים מהחלבונים התוך-תאיים.

סרטון זה מדגים את תהליך ההזרקה התוך-מוחית לחקר התפלגות ציטומגלווירוס מורין (MCMV) במוח עכבר יילודים. MCMV, שתוכנן לבטא חלבון פלואורסצנטי ירוק משופר (EGFP) לנראות, מוזרק לחדר הצידי במוחו של גור עכברים. הנגיף המוזרק מסתובב דרך הנוזל השדרתי, מדביק תאים באזור periventricular, כולל אזור השוליים, מקלעת כורואיד ואזור subventricular.

סרטון זה מדגים את ביסוסו של מודל במבחנה של זיהום בנגיף זיקה במוח מתפתח. אורגנואידים מוחיים אנושיים המכילים רוזטות של תאי גזע, תאי אב עצביים (NPCs) ונוירונים נגועים בנגיף הזיקה. הנגיף מדביק NPCs ומעורר אפופטוזיס, משבש את התפתחות האורגנואידים.

הסרטון מדגים מיקרו-הזרקה של ליפופוליסכרידים (LPS) למוחם של זחלי דגי זברה כדי לגרום לדלקת עצבית. הזחלים ממוקמים על צלחת מרופדת באגרוז, המחט מוחדרת לחדרי המוח, וה-LPS מוזרק. ה-LPS המוזרק מעורר תגובה חיסונית שמובילה לדלקת עצבית.

סרטון זה מדגים את הערכת בריאות המיטוכונדריה באסטרוציטים מהונדסים גנטית, המבטאים חלבון פלואורסצנטי בתוך המיטוכונדריה שלהם. החלבון עוזר לעקוב אחר שינויים בבריאות המיטוכונדריה כאשר הפלואורסצנטיות שלו משתנה מירוק לאדום, מה שמעיד על לחץ או נזק. התמונות נלכדות ומנותחות באמצעות פרמטרים שונים.

סרטון זה מדגים את הליך הזרקת נגיפי HIV כימריים לקליפת המוח של חולדה, שם ה-RNA של הנגיף משתלב בגנום המארח, משתכפל ומתפשט כדי לבסס זיהום HIV פעיל במודל הניסוי.

סרטון זה מדגים את הדור של מודל עכבר עם זיהום CNS. גור יונק מוזרק עם הנגיף הן תוך גולגולתית והן intraperitoneally. הנגיף מתפשט, מדביק את מערכת העצבים המרכזית וגורם למוות תאי עצב ודלקת. הגור מוערך עבור סימפטומים של זיהום עם התקדמות המחלה.

סרטון זה מדגים את יצירת דלקת עצבית במודל עכבר. עכבר מורדם עם מיקרו פצעים נלקח, וחיסון של וירוס pseudorabies (PRV) מוחל על הפצעים. הנגיף מדביק את העצבים ההיקפיים, מתפשט לגרעיני השורש הגבי (DRG), ומדביק עוד יותר את חוט השדרה והמוח. זיהום של נוירונים במערכת העצבים מוביל לתגובה חיסונית הגורמת לנזק עצבי, המוביל לדלקת עצבית.

הסרטון מדגים הזרקה תוך מוחית של תרחיף נגיף זיקה בעכבר בוגר כדי לגרום לניוון עצבי. עכבר מורדם מאובטח במסגרת סטריאוטקסית, וחור נקדח לתוך הגולגולת החשופה להזרקה. השעיה של נגיף הזיקה מוזרקת לרקמת המוח. הזיהום הנגיפי גורם לדלקת, מה שמוביל לניוון עצבי.

סרטון זה מדגים את כימות העומס החיידקי הזיהומי ממוח העכבר המחורר הנגוע בליסטריה מונוציטוגנים.

סרטון זה מדגים שיטה לחקר חלחול באמצעות מודל מחסום דם-מוח במבחנה (BBB) באמצעות אסטרוציטים ותאי אנדותל על גבי ממברנה, עם פריטין חופשי מסוג FITC ו-FITC. FITC-פריטין נקשר לקולטנים על תאי אנדותל וחצה את מחסום הממברנה לחדר התחתון בעוד FITC חופשי הראה חדירה מוגבלת ונשאר בחדר העליון.

סרטון זה מדגים הליך להדבקת תאי גזע עצביים עובריים אנושיים בנגיף זיקה. התאים הנגועים יכולים לשמש למחקרים נוספים.

סרטון זה מדגים מודל מבחנה לחקר פתוגנים החוצים את מחסום הדם-מוח (BBB). תאי אנדותל מיקרו-וסקולריים, המבטאים צמתים הדוקים, יוצרים שכבת אנדותל בחדר העליון, בעוד נוירונים, אסטרוציטים ומיקרוגליה מייצגים את פרנכימת המוח בחדר התחתון, המופרדת על ידי קרום נקבובי. זיהום בנגיף במודל BBB מחקה את הפתוגן העובר מהדם למוח. עם החדרת נגיף נוירוטרופי, הוא חוצה את ה-BBB באמצעות טרנסציטוזיס, מדביק תאים עצביים, משכפל ומשחרר צאצאים ויראליים, ומדגים פלישה עצבית מוצלחת.

מקור: Funes, S., et. al., תאים דמויי מיקרוגליה אנושיים: התמיינות מתאי גזע פלוריפוטנטיים מושרים ובדיקת פגוציטוזיס של תאים חיים במבחנה באמצעות סינפטוזומים אנושיים. J. Vis. Exp. (2022)סרטון זה מדגים מבחן לחקר היכולת הפגוציטית של תאים דמויי מיקרוגליה באמצעות סינפטוזומים פלואורסצנטיים רגישים ל-pH.

לטבול את הרקמה xylene להמיס את פרפין.

להזריק תוך ורידי אלבומין מתויג פלואורופור, אשר חוצה את BBB פגום, להגיע למוח.

הרקמה מראה סיבי עמילואיד וצברי חלבונים חריגים בדפנות כלי הדם המוחיים, שהם אינדיקטורים מרכזיים להפרעות נוירולוגיות.

MCCH מאופיין בזרימת דם מופחתת למוח. זה מגביל את אספקת החמצן והחומרים המזינים לשכבת תאי האנדותל של כלי הדם במוח, ופוגע בתאים.

השהה את תערובת התאים במטריצה חוץ-תאית או בתמיסת ECM.

בצע חתך בצוואר כדי לחשוף ולשחרר באופן רופף את עורקי התרדמה המשותפים הדו-צדדיים.

סרטון זה מדגים את השיטה של גרימת אנצפלומיאליטיס אוטואימונית ניסיונית (EAE) על ידי הזרקת אדג'ובנט לפפטידים שמקורם במיאלין כדי להפעיל תאי T אוטו-ריאקטיביים, הנודדים למוח. רעלן השעלת ניתן כדי להגביר את חדירות מחסום הדם-מוח, ומאפשר לתאי T אלה ולתאי חיסון אחרים להיכנס למוח. תאים חיסוניים אלה גורמים לדמיאלינציה, מה שמוביל לפגיעה בהולכה עצבית ובהתפתחות של EAE.

סרטון זה מדגים הליך להערכת הפרעה במחסום דם-מוח במודל עכבר EAE. צבעים פלואורסצנטיים בגדלים שונים מוזרקים רטרו-מסלולית וזורמים דרך כלי הדם במוח. הצבע הקטן יותר דולף דרך רווחים לתוך רקמת המוח, ואילו הצבע הגדול יותר נכנס רק אם ההפרעה חמורה, בקורלציה עם מידת הנזק למחסום.

סרטון זה מדגים הליך לגרימת נזק לרקמות או אוטם בפונס של חולדה מורדמת באמצעות גירוי חשמלי.

בסרטון זה, עוברים מופרים של דגי זברה עוברים דה-כוריון תחת מיקרוסקופ סטריאו ולאחר מכן נחשפים למעכב סינתזת כולסטרול, מה שמוביל להתפתחות קרעים בכלי הדם ודימומים מוחיים בזחלים. זחלים דימומיים, הניתנים לזיהוי על ידי כתמים אדומים ברורים, מופרדים לאחר מכן תחת מיקרוסקופ לניתוח נוסף.

סרטון זה מדגים את התהליך של גרימת הפרעה במחסום הדם-מוח (BBB) ודימומים מוחיים במודל חולדה באמצעות ליפופוליסכריד (LPS). הוא מדגיש את רצף התגובות החיסוניות שמובילות לחדירות מוגברת של BBB ולאחר מכן לנזק לרקמת המוח.

סרטון זה מדגים בדיקה לזיהוי מיקרו-דימומים מוחיים (CMHs) במודל חולדה. CMHs הם דימומים מוחיים עקב הפרעה במחסום הדם-מוח, המזוהים על ידי תאי דם אדומים שדלפו (RBCs). במודל של חולדה, רקמת מוח קבועה מוגנת בהקפאה, חתוכה ומוכתמת בהמטוקסילין-אאוזין עבור RBCs, מה שמאפשר הדמיה מיקרוסקופית של CMHs. RBCs שדלפו מופיעים כאדומים-כתומים מתחת למיקרוסקופ.

הסרטון מדגים את ההליך ליצירת מודל עכבר לחקר פגיעה מוחית היפוקסית-איסכמית בילוד. הוא מתאר את הצעדים לגרימת איסכמיה כירורגית וחשיפת בעל החיים להיפוקסיה כדי להחמיר נזק מוחי. לבסוף, הוא מראה כיצד להעריך את נגעי המוח המתקבלים, ולהבטיח שמודל העכבר מוכן לחקירה מדעית נוספת.

סרטון זה מדגים כיצד לאפיין את החלל החוץ-תאי בפרוסת מוח באמצעות מיקרואלקטרודות סלקטיביות ויונטופורזיס כדי למדוד ולהשוות אותות חשמליים. תהליך זה מסייע לקבוע את שבר הנפח של החלל ואת מידת הפיתולים.

בסרטון זה, מערך מולטיאלקטרודות (MEA) המצופה בגלוטמט אוקסידאז מושתל ברקמת המוח של עכבר מורדם. תמיסת גלוטמט מוזרקת לחלל החוץ תאי שבו MEA מזהה את רמות הגלוטמט, ומאפשר ניטור בזמן אמת של ספיגת הגלוטמט על ידי האסטרוציטים.

בסרטון זה, גור עכבר מהונדס גנטית הנושא את הגן Ccm2 ומשני צדדיו אתרי loxP ו-Cre recombinase המאוחה לקולטן אסטרוגן משמש לגרימת מומים מוחיים במערות (CCM). מתן 4-hydroxytamoxifen מפעיל Cre בתאי אנדותל, מה שמוביל למחיקת Ccm2 והיווצרות CCMs במוח.

סרטון זה מדגים את ההליך לבידוד תאי מוח ותאי חיסון שחדרו מרקמות מוח איסכמיות של עכברים על ידי עיכול אנזימטי, ולאחר מכן הסרת פסולת תאים ומיאלין על ידי צנטריפוגה הדרגתית של צפיפות, כדי לחקור תגובות דלקתיות בחקר שבץ.

הסרטון מדגים את השראת הדימום התת עכבישי באמצעות ניקוב אנדו-וסקולרי במודל עכבר. חתך נעשה באזור הצוואר של העכבר המרדים כדי לגשת לעורק התרדמה המשותף ואת bifurcation שלה. חוט להט מוכנס דרך העורקים כדי לנקב ענף עורק תוך גולגולתי, גרימת דימום תת-עכבישי.

סרטון זה מדגים שיטה ליצירת מודל חולדה של דימום תוך חדרי בילודים. בהליך זה, גור חולדה מורדם מוזרק עם המוגלובין לחדר הצדדי של המוח. ההמוגלובין גורם לעקה חמצונית ומשחרר הם, המדמה דימום תוך חדרי. הנזק שנגרם לרקמות המוח, המונע על ידי מיני חמצן תגובתיים וציטוקינים דלקתיים, מוביל להגדלת החדר, תוצאה שכיחה של דימום תוך חדרי.

סרטון זה מדגים את ההליך של ביצוע חסימה קבועה של עורק המוח האמצעי הדיסטלי, או MCAO, עם עורק הצוואר המשותף, או קשירת CCA, בחולדות מבוגרות כדי להדגים שבץ איסכמי. זה חוסם את זרימת הדם למוח, מה שמוביל למוות עצבי ויוצר מודל לחקר מנגנוני שבץ וטיפולים פוטנציאליים.

סרטון זה מדגים את הנוהל להקמת מודל חולדה לדימום תת-עכבישי. חולדה מורדמת מושתלת בבדיקות למדידת לחץ תוך גולגולתי וזרימת דם מוחית. אתר המטרה מזוהה, והמחט מוחדרת במצב טרום-כיאזמטי. לאחר מכן מוזרק דם אוטולוגי לחלל התת-עכבישי, מגביר את הלחץ התוך גולגולתי ומפחית את זרימת הדם המוחית, ומבסס את המודל.

סרטון זה מדגים חקירה ניסויית של גלגול לימפוציטים על פני מודל אנדותל מחסום דם-מוח (BBB). חד-שכבה של תאי אנדותל מיקרו-וסקולריים במוח האנושי (HBMECs) נוצרת במבחנה, ותאים חד-גרעיניים בדם היקפי (PBMCs) המכילים לימפוציטים מתווספים לשכבה החד-שכבתית. לאחר מכן התאים מודגרים כדי לאפשר גלגול לימפוציטים, והתאים הנודדים מכומתים באמצעות ציטומטריית זרימה.

סרטון זה מדגים את הערכת אזור האוטם ובצקת המוח בפרוסות מוח מחולדות שהיו נתונות לחסימת עורק המוח האמצעי. אזורים עם אוטם מזוהים באמצעות צביעת חמצון חיזור, בעוד שמסנן כחול ופונקציית סף בתוכנת ניתוח תמונה מכמתים את אזור האוטם והבצקת בחצי הכדור הפגוע.

סרטון זה מדגים שיטה להערכת התנגדות חשמלית טרנסאנדותל (TEER) בתאי אנדותל מיקרו-וסקולריים במוח עכבר במבחנה. ערך TEER גבוה מצביע על צמתים שלמים של תאי אנדותל, בעוד שתוספת של תאי T מופעלים מורידה את ערך ה-TEER, ומשקפת שיבוש של מחסום הצומת.

סרטון זה מדגים הליך לניתוק עצבים סימפתטי של עורק הכליה במודל עכבר יתר לחץ דם המושרה על ידי אנגיוטנסין II, תוך שימוש בפנול כדי לשבש את תפקוד העצבים הסימפתטיים ולהפחית את לחץ הדם.

סרטון זה מדגים את תהליך השראת שבץ איסכמי במודל חולדה על ידי חסימת עורק המוח האמצעי (MCA) באמצעות בורג חוט. ההליך כולל קשירת עורקי הצוואר, החדרת בורג חוט לעורק הצוואר החיצוני וחסימת זרימת הדם מה-MCA למוח, מה שמוביל למוות עצבי ומחקה שבץ איסכמי.

סרטון זה מדגים את ההליך של שכפול שבץ טרומבוטי במודל עכבר על ידי חסימת עורק הצוואר המשותף הימני וחשיפת העכבר לסביבה דלת חמצן. תהליך זה מפחית את זרימת הדם והחמצן למוח, וגורם להיווצרות קרישי דם ולנזק מוחי.

סרטון זה מדגים את הטכניקה המדויקת לגרימת שבץ מוחי של חומר לבן בעכבר מורדם על ידי הזרקת מעכב תחמוצת החנקן בקואורדינטות מוח ממוקדות בתוך החומר הלבן. זה מוביל להתכווצות כלי הדם ולעיכוב אספקת הדם, וכתוצאה מכך לנזק עצבי ולשבץ מוחי.

מקור: Wanderer, S., et al. נרתיק עורקי מודל מפרצת התפצלות מיקרו-כירורגית בארנב. J. Vis. Exp. (2020)סרטון זה מדגים את היצירה של מודל מפרצת ניסיוני בארנב באמצעות נרתיק כלי שטופל באלסטאז. לאחר כריתת קטע מה-CCA הימני, השקית מטופלת באלסטאז, ולאחר מכן נתפרת ל-CCA השמאלי כדי להחזיר את זרימת הדם. הלחץ שנוצר על דפנות השקית המוחלשות גורם להיווצרות מפרצת.

מקור: Sharma, T. P., et al., מודל מערכת אוטונומית טרנסלמינרית לאפנון לחץ תוך עיני ותוך גולגולתי במקטעים אחוריים של תורם אנושי. J. Vis. Exp. (2020). סרטון זה מדגים את הליך הכנת העין האנושית לחקר ההשפעות של לחץ טרנסלמינרי על איתות תאי גנגליון ברשתית על ידי הדמיית לחצים תוך עיניים ותוך גולגולתיים במערכת אוטונומית טרנסלמינארית.

מקור: Lani-Louzada, R., et al., צריבה במעגל מלא של מקלעת כלי הדם הלימבלית לגלאוקומה הנגרמת בניתוח במכרסמים. J. Vis. Exp. (2022)סרטון זה מדגים את האינדוקציה והניטור של לחץ תוך עיני מוגבר (IOP) במודל חולדות. התהליך כולל צריבה של כלי הדם הלימבליים, וכתוצאה מכך חסימת כלי דם ועלייה ב-IOP. לאחר מכן נותנים לחולדה להתאושש, ו-IOP מנוטר באופן קבוע הן בעיני הניסוי והן בעיני הביקורת לצורך השוואה.

מקור: Jungen, C., et al. השפעת נוירונים תוך-לבביים על אלקטרופיזיולוגיה של הלב והפרעות קצב במערכת Ex Vivo Langendorff. J. Vis. Exp. (2018). הסרטון מדגים טכניקה ex vivo לגירוי מערכת העצבים התוך-לבבית כדי להעריך את רגישות הלב להפרעות קצב. באמצעות מנגנון זלוף, לב עכבר מבודד מוחדר עם מאגר מחומצן. לאחר מכן מגורה מערכת העצבים התוך-לבבית בתדירות גבוהה כדי לגרום להפרעות קצב.

מקור: Hakim, M. A. et al., בידוד וניתוח פונקציונלי של אנדותל עורקי של פרנכימה של מוח עכבר. J. Vis. exp. (2022). סרטון זה מדגים את הניתוח התפקודי של צינור אנדותל עורקי המבודד ממוח עכבר. הוא מתאר את השלבים למדידת רמות הסידן התוך תאי ופוטנציאל הממברנה, הן בנקודת ההתחלה והן בתגובה לגירוי תרופתי.

מקור: Tang, X. et. al., דימום פונטיני מסיבי על ידי הזרקה כפולה של דם אוטולוגי. J. Vis. Exp. (2021)פרוטוקול זה מתאר עירוי מבוקר של דם אוטולוגי לאזור הפונטיני במוח של חולדה כדי לדגמן דימום פונטיני מסיבי. המטרה היא לדמות דימום מוחי מקומי על ידי הגברת לחץ מקומי.

מקור: Alluri, H., et.al. מחסור בחמצן-גלוקוז וחמצון מחדש כמודל במבחנה פגיעה באיסכמיה-רפרפוזיה לחקר תפקוד לקוי של מחסום דם-מוח. J. Vis. Exp. (2015). הסרטון מדגים את ההשפעה של מחסור בחמצן-גלוקוז וחמצון מחדש לאחר מכן על תאי אנדותל מיקרו-וסקולריים במוח של חולדות (RBMECs) על ידי הדמיית מצבים היפוקסיים וחסרי חומרים מזינים. תנאים אלה גורמים לדלדול ATP, עלייה בסידן תוך תאי ויצירת מיני חמצן תגובתיים (ROS), אשר מפרקים חלבוני צומת תאים וגורמים להיווצרות סיבי עקה, ובכך מחלישים אינטראקציות תא-תא.

מקור: Gucciardo, E., et. al., מודל תרבית רקמות ex vivo לסיבוכים פיברווסקולריים ברטינופתיה סוכרתית פרוליפרטיבית. J. Vis. Exp. (2019)סרטון זה מפרט פרוטוקול צביעה חיסונית עבור תרביות ex vivo של רקמה פיברווסקולרית המוטמעת בג'ל פיברין. זה מאפשר הדמיה מפורטת של שינויים בכלי הדם הקשורים לרטינופתיה סוכרתית...

מקור: Talley Watts, L., et al. Rose Bengal Photothrombosis by Confocal Optical Imaging In Vivo: A Model of Single Vessel Stroke. J. Vis. Exp. (2015)סרטון זה מדגים טכניקה לגרימת היווצרות קרישי דם במוח של עכבר. עכבר מורדם עם חלון גולגולת וגולגולת דלילה עובר פוטוטרומבוזיס באמצעות הפעלת צבע רגיש לאור באמצעות אור בעוצמה גבוהה. תהליך זה מייצר מיני חמצן תגובתיים, הפוגעים בדפנות כלי הדם וגורמים להיווצרות קרישים, ובסופו של דבר חוסמים את זרימת הדם למוח.

מקור: Kuts, R. et al. פגיעה מוחית הנגרמת על ידי לייזר בקליפת המוח המוטורית של חולדות. J. Vis. Exp. (2020)סרטון זה מדגים את הערכת תקינות מחסום הדם-מוח (BBB) בעקבות פגיעה מוחית הנגרמת על ידי לייזר בחולדות. צבע מעקב מוזרק לווריד הזנב, ומאפשר לו להסתובב למוח ולדלוף לרקמה דרך ה-BBB הפגוע. לאחר מכן המוח מופק ומעובד כדי לשחרר את הצבע. עוצמת הקרינה של הצבע נמדדת כדי לכמת את היקף נזק ה-BBB הנגרם על ידי לייזר.

אסטרוציטים מפרישים מולקולות איתות המשפרות את ההבשלה וההתמיינות של תאי גזע לנוירונים ואסטרוציטים.

סרטון זה מציג שיטה לבדיקת נדידת נוירונים בתגובה לרמזים כימותרפיים מתאי אנדותל פריוונטריקולריים (PVEC). תאי עצב פנימיים ממוקמים בתא מרכזי, עם PVEC ותאי בקרה משני הצדדים. הגירה מוגברת לכיוון PVECs מצביעה על תגובה חיובית לאותות הכימותרפיים שלהם.

סרטון זה מדגים את הצביעה האימונופלואורסצנטית של פרוסות אורגנואידים במוח הקטן כדי לזהות אנטיגני מטרה ספציפיים המתבטאים בנוירונים צרבלריים שונים, המעידים על הבשלת אורגנואידים.

סרטון זה מדגים את השיטה לזיהוי תאי עצב מתרבית מעורבת של תאי עצב גרגיריים צרבלריים ותאי גלייה באמצעות צביעה כפולה עם דיאצטט פלואורסצאין (FDA) ופרופידיום יודיד (PI), כאשר נוירונים חיים מופיעים ירוקים ונוירונים מתים מופיעים באדום.

סרטון זה מדגים פרוטוקול חיסוני מפורט כדי להמחיש פגמים פנוטיפיים בגופי הפטריות של מוחות דרוזופילה מוטנטיים. הפרוטוקול כולל שימוש בנוגדנים נגד Fas2, חלבון המעורב בהנחיה אקסונלית המאפשרת התפתחות מורפולוגית ותפקודית תקינה של גוף הפטרייה.

סרטון זה מדגים את ההליך להכתמת תאי גזע עצביים חדשים במקטעי רקמת מוח באמצעות שילוב EdU, ואחריו immunofluorescence כדי לדמיין חלבונים ספציפיים, שיפור ההבנה של דינמיקה התא והתפשטות.

סרטון זה מדגים את צביעת האימונופלואורסצנטיות של קריוסקציות מרקמות גולגולתיות עובריות של עכברים, תוך שימוש במיקרוסקופ פלואורסצנטי כדי להעריך את ביטוי הסמנים הגרעיניים ולקבוע את התפשטות התאים ואת פעילות האיתות.

סרטון זה מדגים כיצד שלפוחיות עצביות מסומנות בחלבונים פלואורסצנטיים ספציפיים כדי לדמיין את תנועתן. ראשית, פלסמיד המקודד לחלבון פלואורסצנטי מודגר עם סוכן טרנספקציה ולאחר מכן מוכנס לתרבית של נוירונים. לאחר מכן, תמונות של הנוירונים נרכשות ומנותחות כדי לעקוב אחר תנועת השלפוחיות.

סרטון זה מדגים את מדידת הפרשת חומצה רטינואית (RA) מתאי נוירוספרה באמצעות תאי כתב RA. הוא מתאר את השלבים הכרוכים בטיפוח משותף של תאי נוירוספרה עם תאי כתב RA וביצוע בדיקת RA קולורימטרית למדידת רמות RA.

סרטון זה מדגים את ההכתמה החיסונית של מערכת העיכול העוברית של מורין כדי לדמיין ולנתח את התפלגות האוכלוסייה העצבית באמצעות immunofluorescence ומיקרוסקופ קונפוקלי.

סרטון זה מדגים את התיוג הנגיפי וההשתלה של תאי בולטות גנגליונית מדיאלית (MGE) למחקרי in vivo. הוא מתאר את השלבים הכרוכים בהתמרת תאי MGE עם מדווח ויראלי, השתלת תאים מתמרים אלה לקליפת המוח של גור עכבר, ומאפשר ביטוי מדווח בתת-סוגים ספציפיים של תאי עצב.

סרטון זה מדגים את הבידוד של גרעינים עשירים בקולטני אוקסיטוצין ממוח החולדה היילודים. חיתוך עטרה, ואחריו זיהוי וניקוב מדויק של גרעיני מוח עשירים בקולטני אוקסיטוצין, מאפשר מיצוי יעיל של גרעינים עשירים בקולטן אוקסיטוצין להמשך ניתוח.

מקור: Pericoli, G. et. al., בדיקות אימונוציטוכימיה של תאים תלת-ממדיים חיים של גליומה מפושטת בקו האמצע בילדים. J. Vis. Exp. (2021)סרטון זה מדגים הדמיית תאים חיים כדי לצפות בנדידת תאי גליומה מפושטת בקו האמצע של ילדים באמצעות תיוג אימונוהיסטוכימי עם נוגדנים נגד CD44.

מקור: Jantzie, L. L., et. al. מידול אנצפלופתיה של פגות באמצעות היפוקסיה-איסכמיה טרום לידתית עם ליפופוליסכריד תוך מי שפיר בחולדות. J. Vis. Exp. (2015)סרטון זה מדגים פרוטוקול לגרימת מצבים היפוקסיים-איסכמיים ודלקתיים בחולדות עובריות על ידי הגבלת זרימת הדם ברחם והזרקת LPS, מודלים של דלקת עצבית ושיבוש התפתחות המוח הרלוונטיים למחקרי לידה מוקדמת.

מקור: Larpthaveesarp, A., et. al. מודל חסימת עורק מוח אמצעי חולף של שבץ מוחי בילודים בחולדות P10. J. Vis. exp. (2017)סרטון זה מדגים את הקמת מודל חסימת עורק המוח התיכון בגור חולדות. עורק הצוואר הפנימי (ICA) חשוף, וקשירה מאובטחת כדי להגביל את הצפת הדם. חסימה מוחדרת דרך ה-ICA כדי להגיע לעורק המוח האמצעי. לאחר מכן נותנים לגור להתאושש לפני ניתוח נוסף.

המחלה מעוררת תאים חיסוניים אוטו-תגובתיים לתקוף חלבוני מיאלין, ומפרקים את מעטפת המיאלין המקיפה אקסונים עצביים.

קטע הבקרה מציג אקסונים עם נדן מיאלין צפוף המכיל שכבות קרום פלזמה קונצנטריות. החלק הפגוע מציג מיאלין דחוס עם רווחים גדולים.

סטרס פוגע בתפקוד האוליגודנדרוציטים, ומשבש את מעטפת המיאלין העשירה בשומנים המקיפה אקסונים עצביים בקליפת המוח הקדם-מצחית האמצעית, אזור במוח המווסת רגש.

סרטון זה מדגים את המשקעים החיסוניים של מקטעי DNA המקושרים עם חלבון מטרה מליזטים של נוירון מוטורי שמקורו בתאי גזע באמצעות חרוזים מגנטיים מצופים נוגדנים ספציפיים לחלבון מטרה.

סרטון זה מדגים פרוטוקול להערכת השלמות המבנית של צמתים עצביים-שריריים בשרירי האורך הגביים של דרוזופילה. ההליך כולל צביעת נוירונים ושרירים בשני נוגדנים נפרדים והשוואת דפוסי פלואורסצנטיות בין זבובים מוטנטיים לזבובי בר. הפחתה בכתמים עצביים בזבובים מוטנטיים מצביעה על ניוון עצבי, בעוד מבנה השריר נשאר שלם.

סרטון זה מדגים הערכת ההשפעות הנוירודגנרטיביות של כימיקל בדיקה על Caenorhabditis elegans עם נוירונים מתויגים פלואורסצנטית. נוירונים נורמליים מראים פלואורסצנטיות בהירה של סומא ותהליכים שלמים, בעוד פלואורסצנטיות מופחתת, סומה נפוחה ותהליכים מנוקדים מצביעים על ניוון עצבי.

סרטון זה מדגים שיטה לביסוס מודל נוירופתיה של סיבים קטנים בעכברים באמצעות RPV1 אגוניסט resiniferatoxin (RTX). הוא מתאר את השלבים הכרוכים במתן RTX לעכברים ומסביר כיצד RTX גורם למוות עצבי בנוירונים חושיים בקוטר קטן, ובכך מבסס את מודל הנוירופתיה.

בסרטון זה, מודל עכבר של טרשת נפוצה נקבע באמצעות אנצפלומיאליטיס אוטואימונית ניסיונית (EAE). העכבר מוזרק עם תחליב המכיל פפטיד עצבי ואדג'ובנט, המפעיל תגובה חיסונית המפעילה תאי T אוטוריאקטיביים. לאחר מכן מתבצעת הזרקה של רעלן שעלת (PTX) כדי להגביר את חדירות מחסום הדם-מוח, מה שמאפשר לתאי T האוטו-תגובתיים לחדור למוח. חדירה זו יוזמת מפל איתות שבסופו של דבר גורם לנזק למיאלין, המחקה את המצב הדה-מיאלינציה של טרשת נפוצה.

סרטון זה מדגים את ההליך של גרימת שיתוק על ידי העברת תאי Th17 פעילים המכוונים לאקוופורין-4 למודל עכבר. במערכת העצבים המרכזית, תאי Th17 המופעלים מתקשרים עם אסטרוציטים המבטאים אקוופורין-4, ומעוררים תגובה חיסונית המובילה לשיתוק זנב וגפיים בעכבר.

סרטון זה מדגים את התהליך של הערכת תפקוד מוטורי לקוי במודל עכברי באמצעות מתן רעלן שעלת וחיסון המכיל פפטידים ואדג'ובנטים המחקים מיאלין, ולאחר מכן בדיקות הליכון להערכת תפקוד מוטורי והערכת הנזק העצבי הנובע כתוצאה מהפעלה חיסונית ודה-מיאלינציה.

סרטון זה מדגים את מבחן גרם המדרגות להערכת תפקוד מוטורי בחולדה המיפרקינסונית עם נגע במוח ימין. הנגע משבש את איתות הדופמין, פוגע בשליטה בכף הרגל השמאלית, מה שגורם ליותר כדורים להישאר במדרגות השמאליות, מה שמעיד על תפקוד לקוי של המוטוריקה.

סרטון זה מדגים את השימוש בבדיקת תנועה רדיאלית כדי להעריך תפקוד לקוי של מוטוריקה ב-C. elegans המבטא חלבון TDP-43 אנושי מסוג פרא או מוטנטי ALS. תולעים עם רמות שונות של ביטוי TDP-43 מסוג בר או מוטנטי מורשות לזחול, ותנועתן נמדדת על ידי המרחק הרדיאלי שעובר מהנקודה המרכזית על לוחית הבדיקה. הבדיקה מבחינה בין ליקויים מוטוריים קלים, בינוניים וחמורים על סמך המרחק שעברו הזנים השונים C. elegans.

סרטון זה מדגים את הערכת השריר באמצעות נוירונים מוטוריים מתורבתים, תאי שוואן ומיו-צינורות, ולאחר מכן טיפול בחוסם עצבי-שרירי לעיכוב התכווצות. גרפיקת זמן-תנועה מקודדת צבע מציגה גרפיקת זמן-תנועה מקודדת בצבע. אדום מציין את התנועה המהירה ביותר, וכחול מציין את האיטית ביותר.

סרטון זה מדגים את ההדמיה של אינטראקציות חלבון-חלבון בצומת העצבי-שרירי Drosophila (NMJ) באמצעות בדיקת קשירת קרבה (PLA). לאחר בידוד דפנות הגוף, חלבונים המקיימים אינטראקציה נבדקים עם נוגדנים ראשוניים ונוגדנים משניים מצומדים PLA. הקרבה של החלבונים האינטראקטיביים מקלה על קשירת בדיקות עם אוליגונוקלאוטידים מחברים, ויוצרים DNA מעגלי, אשר מוגבר לאחר מכן על ידי הגברת מעגל מתגלגל. בדיקות פלואורסצנטיות נקשרות ל-DNA המוגבר, ומאפשרות הדמיה של אינטראקציות חלבון-חלבון ב-NMJ.

מקור: Wagner, K. et al., חקר סחר בחלבוני ממברנה בתאי קולטני אור של דרוזופילה באמצעות חלבונים מתויגים eGFP. J. Vis. Exp. (2022). סרטון זה מדגים את ההדמיה של סחר בחלבון ממברנה בתאי קולטני אור של דרוזופילה באמצעות חלבוני TRPL מתויגים eGFP. הוא מפרט את הכנת הזבובים הטרנסגניים להדמיה, לכידת תמונות פלואורסצנטיות של תאים קולטני אור וכימות סחר TRPL על ידי מדידת פלואורסצנטיות eGFP יחסית ברבדומרים.

מקור: Deseure, K., et al. פגיעה כרונית בהתכווצות של העצב האינפרא-אורביטלי של החולדה (IoN-CCI) לחקר כאב נוירופתי טריגמינלי. J. Vis. Exp. (2015). סרטון זה מדגים שיטה לגרימת כאב נוירופתי במודל חולדה על ידי כיווץ העצב האינפרא-אורביטלי. לאחר חשיפת העצב האינפרא-אורביטלי וקשירת קשירה כדי לכווץ אותו, התגובה החיסונית באתר הפגיעה מגבירה את הריגוש של נוירונים שכנים, המעבירים אותות כאב למוח.

מקור: Brakkee, E. M., et al. ניתוח ובדיקות התנהגותיות במודל טרנספוזיציה של נוירומה טיביאלית בחולדות. J. Vis. Exp. (2023). סרטון זה מדגים הליך ליצירת מודל טרנספוזיציה של נוירומה טיביאלית של חולדה (TNT). לאחר חשיפת עצב השוקה ברגל האחורית של חולדה מורדמת, יש לחצות את העצב. לאחר מכן, צרו מנהרה תת עורית, השחילו את העצב הקטוע דרך המנהרה ותפרו אותו במקומו. בהיעדר יעד לעצבוב מחדש, צמיחה אקסונלית לא מאורגנת מהעצב הקטוע יוצרת נוירומה, המעוררת כאב נוירופתי על ידי גירוי נוציצפטורים.

מקור: Lee, D. et. al., תנאי ניסוי מותאמים לאובדן שמיעה הנגרם על ידי רעש בעכברים והערכת תפקוד השמיעה ונזק לתאי שיער חיצוניים. J. Vis. Exp. (2023)סרטון זה מדגים את ההליך של אובדן שמיעה הנגרם מרעש בעכברים. צליל בעוצמה גבוהה פוגע בתאי השיער באוזן הפנימית ומשבש את מסלולי השמיעה, וכתוצאה מכך לפגיעה בשמיעה.

מקור: Lee, D., et. al. תנאי ניסוי מותאמים לאובדן שמיעה הנגרם מרעש בעכברים והערכת תפקוד השמיעה ונזק לתאי השיער החיצוניים. J. Vis. exp. (2023)הסרטון הזה מדגים את מדידת תגובת גזע המוח השמיעתית (ABR) בעכבר. אלקטרודות מונחות על הראש, מאחורי האוזן וליד זנבו של עכבר מורדם. גירויים אקוסטיים בעוצמות שונות מועברים ואותות חשמליים הנוצרים נרשמים כצורות גל.

מקור: Olmstead, D. N., et al., אקסוטומיה של עצב הפנים בעכברים: מודל לחקר תגובת הנוירונים המוטוריים לפציעה. J. Vis. Exp. (2015). סרטון זה מדגים את הליך ריסוק עצב הפנים בעכבר, שבו דיסקציה קהה דרך ציוני דרך מרכזיים חושפת את תא המטען של עצב הפנים בנקב הסטילומסטואיד. לאחר מכן משתמשים במלקחיים כדי לדחוס את תא המטען של העצב, לגרום לנזק אקסונלי ולשבש את העברת האותות העצביים.

מקור: Cheah, M., et al. הזרקת גנגליון שורש גבי ופגיעת ריסוק שורש גבי כמודל להתחדשות אקסון חושי. J. Vis. Exp. (2017). סרטון זה מדגים הליך שלב אחר שלב להזרקת תרחיף ויראלי לגרעיני השורש הגבי (DRGs) וגרימת פגיעה אקסונלית מבוקרת באמצעות ריסוק שורש הגב בחולדה מורדמת. הפרוטוקול כולל חשיפת ה-DRGs, אספקת וקטור ויראלי מקדם צמיחה כדי להקל על התחדשות אקסונלית, וניתוק קשרים אקסונליים לחוט השדרה כדי לדגמן פגיעה עצבית חושית והתחדשות.

כדי לזהות מוות תאי אפופטוטי באמצעות בדיקת TUNEL, טפל בפרוסת המוח עם האנזים פרוטאינאז-K.

באמצעות מיקרוסקופ פלואורסצנטי, לדמיין את העצב הפגוע, אשר מציג עלייה פרוגרסיבית נפיחות אקסונלית ניתוקים.

התרופה אנקפסולציה משפר את הספציפיות של תאי הגידול ומפחית רעילות עצבית.

סרטון זה מדגים העברה של פגיעה מוחית טראומטית (TBI) בעכברים. לאחר חשיפת הגולגולת, אתר TBI מסומן. לאחר מכן העכבר ממוקם מתחת להתקן TBI. הפגיעה מועברת על ידי הרמת מוט המתכת ומאפשרת לו ליפול בחופשיות על המשפיע, שנמצא במגע עם הגולגולת.

סרטון זה מדגים צביעה אימונופלואורסצנטית של נוירונים בהיפוקמפוס של חולדה שגודלו בתרבית בתוך שבב מיקרופלואידי כדי לנתח התבגרות עצבית וקישוריות.

סרטון זה מדגים את יצירתו של מודל פגיעה עצבית בנוירונים ראשוניים של גרגרי המוח הקטן בעכברים. הוא מתאר את השלבים המעורבים בגרימת פגיעה עצבית באמצעות NMDA, אגוניסט קולטן נוירוטרנסמיטר מעורר, וגליצין, אגוניסט משותף. NMDA וגליצין נקשרים לקולטנים עצביים ספציפיים, גורמים לגירוי יתר שלהם וכתוצאה מכך זרם סידן תוך תאי מסיבי, מה שמוביל לנזק לתאי עצב ולמוות.

סרטון זה מדגים את הצביעה האימונופלואורסצנטית של פרוסת מוח עכבר כדי לכמת את ההתפלגות של חלבון קדם-סינפטי מסוים. התהליך כולל חסימת אתרים לא ספציפיים, החלת נוגדנים ראשוניים לחלבון המטרה וסמן ייחוס, ולאחר מכן תיוג נוגדנים משני והכתמת נגד גרעינית. סמן הייחוס מבטיח כימות מדויק על ידי מתן קו בסיס עקבי, והתפלגות החלבון הפרה-סינפטי מנותחת על פני אזורי מוח באמצעות מיקרוסקופ קונפוקלי.

סרטון זה מדגים שיטה לחקור פגיעה מוחית של זחלי זברה באמצעות מיקרוסקופ אלקטרונים להעברת שידור בקנה מידה גדול (STEM), טכניקה המשלבת אלמנטים של מיקרוסקופ אלקטרונים סורק (SEM) ומיקרוסקופ אלקטרונים תמסורת (TEM) כדי להפיק תמונות ברזולוציה גבוהה. הוא מתאר את השלבים הכרוכים בהכנת דגימות וברכישת תמונות STEM ברזולוציה גבוהה לזיהוי פגיעה מוחית.

סרטון זה מדגים פרוטוקול כירורגי על מודל חולדה, המפרט שלבים מהכנה להרדמה ועד השראת פגיעה בעצב הפנים. פרוטוקול זה שימושי לחקר התחדשות עצבית וטכניקות כירורגיות במחקר רפואי.

סרטון זה מדגים את ההליך לגרימת פגיעה מוחית טראומטית בגולגולת פתוחה בעכבר על ידי ביצוע חתך בגולגולת קו האמצע, קידוח דרך הגולגולת והסרת דש העצם כדי לחשוף את קליפת המוח, והפעלת לחץ גבוה כדי לגרום לטראומה. לאחר מכן תופרים את הפצע כדי להכין את מודל העכבר לניסויים הבאים.

סרטון זה מדגים את ההליך לגרימת מוות מוחי במודל עכבר על ידי הגברת לחץ תוך גולגולתי מבוקר באמצעות קטטר בלון, המחקה מוות מוחי טבעי.

סרטון זה מדגים הליך ליצירת פגיעה מוחית מדויקת ומבוקרת בקליפת המוח המוטורית של חולדה באמצעות לייזר.

סרטון זה מדגים את הביוטינילציה והתיוג הפלואורסצנטי של סיאלוגליקופרוטאינים שעברו שינוי בתאי גזע עצביים ראשוניים ובתאי אב, כמו גם נוירונים, והדמייתם באמצעות מיקרוסקופ פלואורסצנטי.

בסרטון זה, מכשיר צינור הלם משמש ליצירת גל הלם על ידי קריעת דיאפרגמה פולימרית באמצעות לחץ מבוקר. גל ההלם פוגע בפרוסות מוח הכלולות בשקית מאובטחת, וגורם לפגיעה טראומטית בפרוסת המוח.

סרטון זה מדגים את ההליך להכנת תאי עצב בתרבית לניתוח אופטי של שלפוחיות סינפטיות ממוחזרות. התהליך כולל תיוג פלואורסצנטי של חלבוני שלפוחית סינפטית וצביעת מערכת החיסון כדי לתייג ולדמיין את השלפוחיות הממוחזרות בתוך הנוירונים.

סרטון זה מדגים את התהליך של גרימת פציעת מתיחה על נוירונים שמקורם בתאי גזע פלוריפוטנטיים המושרים על ידי בני אדם (hiPSCNs). התאים נלקחים בצלחת מרובת בארות ללא תחתית עם קרום סיליקון מחובר. לחץ מכני מבוקר מופעל על הממברנה כדי לגרום להפרעה בשלד הציטו-שלד ולנזק לקרום התא, וגורם לפנוטיפ של פציעת מתיחה בתאים.

סרטון זה מדגים הליך לגרימת פציעה טראומטית בראש סגור בזבובי דרוזופילה מורדמים באמצעות מכשיר תקיפה עם מפגע מונע גז. הפגיעה פוגעת בתפקוד העצבי ופוגעת ביכולת ההליכה.

סרטון זה מדגים את הליך פגיעת הדקירה בקליפת המוח בעכברים, הכולל חשיפה לגולגולת ויצירת נגעים במוח. הוא גורם לאסטרוגליוזיס תגובתי, תגובה נוירו-פרוטקטיבית של אסטרוציטים, לחקור טראומה במערכת העצבים המרכזית, דלקת ומנגנוני תיקון.

הסרטון מדגים שיטה ליצירת מודל עכברי של פגיעה מוחית טראומטית (TBI) באמצעות מכשיר הקשה של נוזל רוחבי (LFPI). בעת הרדמת העכבר, המוח נחשף על ידי יצירת חלון על הגולגולת. צינורית מלאה במי מלח מחוברת לחלון ולאחר מכן מחוברת ל- LFPI. המטוטלת של המכשיר משתחררת כדי ליצור דופק לחץ שגורם לפגיעה מוחית טראומטית.

סרטון זה מדגים את ההליך לגרימת פגיעה מוחית טראומטית (TBI) במודל עכבר. עכבר מורדם עם גולגולת חשופה נלקח כדי ליצור פתח בגולגולת, ולאחר מכן נגרמת פגיעה מבוקרת בקליפת המוח באמצעות מכשיר פגיעה. הפגיעה פוגעת ברקמת המוח וגורמת לפגיעה בתפקוד הקוגניטיבי ובקואורדינציה המוטורית.

סרטון זה מדגים את ההליך הכירורגי לביצוע חצי חוט שדרה בית החזה בחולדות. הוא מתאר את השלבים לחשיפת מקטע חוט השדרה T8, ביצוע ההמיסקציה כדי לשבש את דרכי העצבים בצד אחד ולספק טיפול לאחר הניתוח.

סרטון זה מדגים שיטה לגרימת פגיעה עצבית ממוקדת בזחלי Drosophila באמצעות לייזר בעל עוצמה גבוהה. לאחר מיקום הזחל מתחת למיקרוסקופ, לייזר בעל הספק נמוך סורק אחר נוירונים פלואורסצנטיים, ואז עוצמת הלייזר מוגברת כדי לגרום לנזק מקומי. הפציעה מאושרת על ידי פלואורסצנטיות מוגברת ומכתש באתר הפציעה.

הסרטון מדגים את השימוש במכשיר טראומה בעל השפעה גבוהה (HIT) כדי לגרום לפגיעה מוחית טראומטית בראש סגור (TBI) ב-Drosophila. TBI גורמת לטראומה מוחית מכנית שמשפיעה על תפקוד תאי העצב, מה שמוביל לאורך זמן לניוון עצבי ולתמותה.

סרטון זה מדגים את השראת פגיעה מוחית טראומטית חודרת במוח הדרוזופילה. זבובים שזה עתה הופיעו נבחרים, מורדמים וממוקמים תחת מיקרוסקופ סטריאו המצויד בפלואורסצנטיות. גוף הפטרייה המבטא GFP מזוהה, וסיכת Minutien מוחדרת כדי לגרום לפציעה. הזבובים מורשים להתאושש למחקרים נוספים.

מקור: Shandra, O. et al., השראת אפילפסיה פוסט-טראומטית במודל עכבר של פגיעה מוחית טראומטית מפושטת חוזרת ונשנית. J. Vis. Exp.

הסרטון הזה מדגים את האינדוקציה של פגיעה מוחית טראומטית (TBI) בחולדה באמצעות מכשיר של פגיעת הקשה נוזלית רוחבית (FPI). ההליך כולל יצירת חור בגולגולת של חולדה מורדמת כדי לחשוף את הדורה מאטר, שאליה מחוברת צינורית. לאחר מכן החולדה מחוברת למכשיר, שמייצר גל לחץ שמגיע למוח, ומחקה TBI על ידי גרימת מוות של תאים עצביים ונזק לכלי...

מקור: Yang, Z., et.al. מודל פגיעת ראש חוזרת בעכברים. J. Vis. Exp. (2016). סרטון זה מדגים את השראת פגיעות ראש חוזרות ונשנות בעכבר באמצעות מכשיר פגיעה אלקטרומגנטי. ההליך כולל מיקום קצה הפגיעה בין התפרים הבין-פרונטליים והלמבדואידים על גולגולתו של עכבר מורדם ושימוש בקצה בדיקה כדי להגדיר במדויק את עומק הפגיעה. הפגיעה מועברת במהירות ובעומק מבוקרים כדי לדמות פגיעות מוח טראומטיות קלות, ולאחר מכן תקופת החלמה, כאשר הפציעות חוזרות על עצמן במרווחי זמן מוגדרים.

מקור: Logsdon, A. F., et al. מודל גלי פיצוץ בעוצמה נמוכה להערכה פרה-קלינית של פגיעה מוחית טראומטית קלה בראש סגור במכרסמים. J. Vis. Exp. (2020)סרטון זה מדגים את השראת פגיעה מוחית טראומטית קלה בראש סגור במודל עכבר באמצעות מערך צינור הלם גז בלחץ. גל הלחץ שנוצר קורע את קרום הפוליאסטר, ומעביר גל הלם לראש העכבר שגורם לתנועה מוחית מהירה בתוך הגולגולת, וגורם לפגיעה מוחית טראומטית קלה.

מקור: Macheda, T., et. al. מודל ראש סגור מבוקר אלקטרומגנטי של פגיעה מוחית טראומטית קלה בעכברים. J. Vis. Exp. (2022)סרטון זה מדגים את ההליך לגרימת פציעת ראש סגור במודל עכבר באמצעות מסגרת סטריאוטקסית. ההשפעה המבוקרת משכפלת פגיעה מוחית טראומטית קלה, ומאפשרת לחוקרים לחקור השפעות נוירולוגיות והתאוששות על ידי מדידת רפלקסים והתנהגות לאחר פציעה.

מקור: Elzat, E. Y. Y., et al., הקמת מודל פגיעה בחוט השדרה של חבלת עכבר המבוסס על טכניקה זעיר פולשנית. J. Vis. Exp. (2022). סרטון זה מדגים את השיטה לגרימת פגיעת חבלה בחוט השדרה ברמת T9 במודל עכבר, באמצעות פלטפורמה קואקסיאלית של פגיעה בחוט השדרה. משקל נופל על חוט השדרה ברמת T9 שיוצר חבלה הגורמת מיד לשינוי צבע הרקמה ונפיחות.

מקור: Lakshman, N., et al. מבחן נוירוספרה להערכת הפעלת תאי גזע עצביים אנדוגניים במודל עכבר של פגיעה מינימלית בחוט השדרה. J. Vis. exp. (2018). סרטון זה מדגים את ההפעלה והנדידה של תאי גזע עצביים (NSCs) במודל פגיעה בחוט השדרה של עכבר. כדי לחשוף את חוט השדרה, מסירים חוליה מאזור בית החזה של עמוד השדרה מעכבר מורדם. לאחר מכן נוצרת פגיעה שטחית בחומר הלבן של חוט השדרה באמצעות מחט כפופה, המשמרת את התעלה המרכזית. בעקבות הפציעה, תאי גזע גזעיים המקיפים את התעלה מופעלים ונודדים לאתר הפציעה כדי לסייע בתיקון...

מקור: Kumar, S., et. al. מודל עכבר של פצעי לחץ לאחר פגיעה בחוט השדרה. J. Vis. Exp. (2019)סרטון זה מדגים אינדוקציה מפורטת של פגיעה בחוט השדרה בעכברים. העכבר המורדם מנותח כדי לחשוף את חוליות T9-T10, והתהליכים הקוצניים שלהם מוסרים. לאחר מכן חוט השדרה החשוף עובר טרנסקטציה כדי לגרום לפציעה. לאחר מכן סוגרים את אזור הניתוח, והעכבר מורשה להתאושש.

סרטון זה מדגים שיטה להערכת הפנמת חלבון המטרה באסטרוציטים בקליפת המוח של עכברים באמצעות ביוטינילציה, ואחריה ליזה של תאים, מיצוי חלבון מבוסס סטרפטווידין, דנטורציה וניתוח כתמים מערביים כדי לאשר הפנמה מוצלחת.

סרטון זה מדגים שיטה להערכת פעילות החלבונים באמצעות תאי עצב בהיפוקמפוס על פני אזורי חלבון בדוגמאות. תאי עצב מפגינים דחייה באזורי חלבון הבדיקה והתקשרות באזורי חלבון ביקורת, מה שמדגיש את ההשפעות של פעילות חלבון אטרקטיבית או דוחה.

סרטון זה מדגים השראת גלאוקומה בחולדה מורדמת על ידי הזרקת מלח היפרטוני לווריד האפיסקלרלי. המלח נכנס לרשת הטרבקולרית דרך תעלת שלם, גורם לצלקות רקמות, החוסמות את זרימת ההומור המימית ומעלה את הלחץ התוך עיני. הלחץ הגבוה פוגע בתאי גנגליון ברשתית, מה שמוביל לגלאוקומה.

הומוגניזציה של הרקמה עם הומוגנייזר כדי לשחרר חלבונים, כולל חומצה גלוטמית דקרבוקסילאז, או איזופורמים של אנזים GAD, החיוניים לתפקוד המוח.

סרטון זה מדגים את ההליך של גישה כירורגית לעצב הראייה בחיה מורדמת ואספקה מדויקת של ליסולציטין כדי לגרום לדמיאלינציה מוקדית, יצירת תנאים נוירופתולוגיים למחקר נוסף.

לדגור על הפרוסה ב- aCSF המכיל מוליכים עצביים כוזבים פלואורסצנטיים או FFN.

סרטון זה מדגים את השראת השראת התקפים הנגרמים על ידי טיפול בעכבר שנדבק בנגיף דלקת המוח העכברי של טיילר (TMEV). העכבר הנגוע, שיש לו נוירונים מעוררי יתר, חשוף לגירויים פיזיים חיצוניים. חשיפה זו גורמת למתח, מה שמוביל לפעילות חשמלית חריגה בתאי העצב, מה שגורם להתקפים.

סרטון זה מדגים את ההליך לגרימת התקפים הנגרמים מחום בעכבר טרנסגני עם מוטציות גנטיות הקשורות לאפילפסיה על ידי העלאה הדרגתית של טמפרטורת הגוף בתא מבוקר. פרוטוקול זה משמש לחקר מנגנוני התקפים וטיפולים פוטנציאליים לאפילפסיה.

סרטון זה מדגים את השראת אירועי ictal בפרוסות קליפת המוח העטרה מעכבר טרנסגני המבטא תעלות קטיון המופעלות על ידי אור בנוירונים פירמידליים מעוררים בקליפת המוח. הפרוסה מונחת בתא הקלטה, ואלקטרודת הקלטה מוכנסת לשכבת קליפת המוח השטחית. עם זלוף עם תרופה הגורמת להתקפים החוסמת תעלות אשלגן, הנוירונים הופכים למעוררי יתר ומייצרים אירועים איקטליים ספונטניים. כדי ליצור אירועים איקטליים לפי דרישה, נעשה שימוש בפולס אור קצר להפעלת תעלות הקטיונים בנוירונים פירמידליים, מה שמפעיל שחרור של נוירוטרנסמיטורים מעוררים,...

סרטון זה מדגים את תהליך השראת האפילפסיה בעכברים באמצעות זריקות פנטילנטטראזול (PTZ), אנטגוניסט לקולטן GABA-A. מתן תוך-צפקי חוזר של PTZ מוריד בהדרגה את סף ההתקפים על ידי עיכוב זרם יוני כלוריד, שיבוש הולכה עצבית מעכבת ומוביל לריגוש יתר בתאי עצב המעוררים התקפים. תהליך זה מביא להתלקחות והתפתחות של התקפים ספונטניים, המדמים אפילפסיה כרונית.

מקור: Soukupová, M., et al. מיקרודיאליזה של חומצות אמינו מעוררות במהלך רישומי EEG בחולדות הנעות בחופשיות. J. Vis. Exp. (2018)סרטון זה מדגים את ההערכה של רמות נוירוטרנסמיטורים מעוררים חוץ-תאיים בחולדות עם השראת אפילפסיה כרונית. לאחר השתלת בדיקת מיקרודיאליזה במוח ואישור היעדר התקפים באמצעות אלקטרואנצפלוגרפיה (EEG), נאסף נוזל חוץ-תאי כדי להעריך רמות נוירוטרנסמיטורים גבוהות בחולדות אפילפטיות. לאחר מכן מוזרקת תמיסה עתירת אשלגן כדי לשמור על ריגוש עצבי ולעורר שחרור מוגבר של נוירוטרנסמיטורים, כאשר...

מקור: Schönherr, S., et. al. תיוג אימונולוגי משולב של העתק אופטוגנטי ושבר הקפאה כדי לבחון סידור ספציפי לקלט של קולטני גלוטמט באמיגדלה של העכבר. J. Vis. exp. (2016)סרטון זה מדגים את התיוג החיסוני של העתקים שבורים בהקפאה של רקמת מוח עכבר למיקרוסקופ אלקטרונים. ההעתקים השבורים והמצופים מתעכלים כדי לחשוף קולטנים. נוגדנים משניים ראשוניים ובעלי תווית זהב מתווספים כדי לסמן קולטנים ספציפיים של ממברנה עצבית. ההעתק מותקן על רשת ומוצג תחת מיקרוסקופ אלקטרונים.

בסרטון זה, תאי גליובלסטומה ומיקרוגליה מעורבבים עם תמיסת מטריצת פולימר ומועברים להכנסת תא נקבובית שבה נוצר ג'ל, ומטמיעים את התאים. מיקרוגליה מעוררת את נדידת תאי הגליובלסטומה דרך התוספת הנקבובית, מחקה פלישת תאי גידול לרקמה שמסביב, לאחר מכן התאים מקובעים ומוכנים לניתוח נוסף.

בסרטון זה, מודגמת שיטה המאפשרת העברה של מיטוכונדריה עם תווית פלואורסצנטית לתאי גזע של גליובלסטומה (GSCs) באמצעות צנטריפוגה. הקליטה המוצלחת והאינטגרציה התפקודית של המיטוכונדריה התורמת מאושרות על ידי זיהוי הפלואורסצ באמצעות מיקרוסקופיה קונפוקלית.

מקור: Guyon, J., et al. מודל ספרואיד תלת מימדי לגליובלסטומה. J. Vis. Exp. (2020)הסרטון מדגים את היצירה של מודל ספרואיד תלת מימדי של פלישת תאי גידול. ספרואידים נוצרים מתאי גידול מוח אנושיים ומוטמעים במטריצת קולגן. תאי הגידול בפריפריה הספרואידית מאמצים פנוטיפ פולשני, מפרישים פרוטאזות כדי לפרק את הקולגן ומתקדמים לפלוש למטריצה שמסביב.

מקור: Lim, M., et al. מידול גרורות במוח על ידי הזרקת עורק הצוואר הפנימי של תאים סרטניים. J. Vis. Exp. (2022)בסרטון זה, עכבר מורדם עובר הליך כירורגי שבו מוזרקים תאים סרטניים לעורק הצוואר המשותף (CCA) כדי להקל על העברה ממוקדת למוח. ההליך כולל תפירה מדויקת ומניפולציה של עורקי הצוואר כדי לכוון את התאים המוזרקים לעבר עורק הצוואר הפנימי (ICA), ולקדם היווצרות גידול במוח לאורך זמן.

מקור: Ear, P. H., et. al. הקמה ואפיון של ספרואידים של גידול נוירואנדוקריני במעי הדק. J. Vis. Exp. (2019)סרטון זה מדגים את הצביעה האימונופלואורסצנטית של ספרואידים של גידול נוירואנדוקריני במעי הדק. הספרואידים מקובעים, חדירים ונחסמים ולאחר מכן מודגרים בנוגדנים ראשוניים ומשניים. צבע מתווסף לגרעיני צביעה לפני הרכבתם והדמתם תחת מיקרוסקופ פלואורסצנטי.

מקור: Mudduluru, G., et. al. מדידה בזמן אמת מבוססת עכבה של נדידה ופלישה של תאים סרטניים. J. Vis. Exp. (2020)סרטון זה מדגים בדיקה מבוססת עכבה למדידת פלישה ונדידה של תאי גליובלסטומה. תאים משפילים את המטריצה החוץ-תאית, עוברים דרך ממברנות מיקרו-נקבוביות ונצמדים לאלקטרודות, ויוצרים עכבה. ניתוח זה בזמן אמת משקף את הפוטנציאל הפולשני שלהם ליישומי חקר סרטן.

מקור: Bolcaen, J., et. al., הקרנה מונחית PET ו-MRI של מודל חולדת גליובלסטומה באמצעות מיקרו-רדיאטור. J. Vis. Exp. (2017)סרטון זה מדגים את ההליך להקמת מודל חולדות גליובלסטומה על ידי הזרקה סטריאוטקטית של תאי גליובלסטומה הגורמים לגידול במוח לקליפת המוח הקדם-מצחית.

מקור: Mendez, F. M. et al., Native Chromatin immunoprecipitation using Moine Tumor Tumor Neurospheres. J. Vis. exp. (2018). סרטון זה מדגים את הבידוד של קומפלקסים של חלבון-DNA מתאי נוירוספרה שמקורם בגידול מוח של עכבר באמצעות משקעים חיסוניים מקוריים של כרומטין. הוא מפרט את השלבים להכנת כרומטין, משקעים חיסוניים, שטיפה ועיכול חלבון לשחרור DNA לניתוח במורד הזרם.

מקור: Núñez, F. J., et al.{{}} הערכת סמנים ביולוגיים בגליומה על ידי אימונוהיסטוכימיה על תרביות נוירוספרה תלת-ממדיות של גליומה משובצת פרפין. J. Vis. exp. (2019). סרטון זה מדגים טכניקה אימונוהיסטוכימית לתיוג סמנים ביולוגיים של גידול בנוירוספירות של גידולי מוח משובצים בפרפין. החלקים הנוירוספריים עוברים הסרת פרפין והחזרת נוזלים, ולאחר מכן טיפול לחשיפת אתרי סמנים ביולוגיים. לאחר מכן מוחלים נוגדנים ראשוניים ומשניים כדי לסמן את הסמנים הביולוגיים הללו. הנוגדנים המשניים קשורים על ידי אנזימי פרוקסידאז...