$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
כל הנהלים הנוגעים למודלים של בעלי חיים נבדקו על ידי הוועדה המוסדית המקומית לטיפול בבעלי חיים ועל ידי ועדת הבדיקה הווטרינרית JoVE.
1. חומרים
- הכנת הזרקת LPS
- יש להוסיף 25 מ"ל מים מזוקקים ל-25 מ"ג אבקת LPS שמקורה בסלמונלה טיפימוריום לריכוז סופי של 1 מ"ג/מ"ל. יש לאחסן את ההזרקה בצינור סטרילי בטמפרטורה של 4°C.
זהירות: LPS הוא רעיל.
2. בעלי חיים
- מתן LPS לחולדות Sprague-Dawley (SD) זכר, בגיל 10 שבועות (משקל ממוצע: 280 ± 20 גרם) על ידי הזרקה intraperitoneal.
זהירות: אם חולדות נרכשות מארגון אחר, אז שלב ההסתגלות לא צריך להיות פחות מ 7 ימים.
3. זריקות LPS
- הזריקו LPS תוך צפקי לכל חולדה במינון של 1 מ"ג/ק"ג והחזירו את החולדות לכלוב הביתי שלהן.
הערה: אין צורך בהרדמה.
- שש שעות לאחר מכן, הזריקו את אותה מנה של הזרקת LPS לחולדות.
- שש עשרה שעות לאחר מכן הזריקו את אותה מנה של LPS לחולדות.
זהירות: הזרקת LPS לחולדות SD במינון של 1 מ"ג/ק"ג עלולה לגרום לשיעור תמותה של 5%. שיעור התמותה עלול לעלות עוד יותר בחולדות צעירות או מבוגרות יותר או בחולדות הרות.
- החזירו את החולדות לכלובים שלהן לאחר הזרקת LPS וספקו ל-ad libitum גישה למזון ולשתייה.
הערה: חולדות יפגינו תגובה דלקתית מערכתית מובהקת, ולכן הכלובים חייבים להישאר נקיים לאורך כל הניסוי. חולדות צריכות להיות במעקב תכוף (2x יום) אחר משקל, מראה כללי וגישה לאחר הזרקת LPS הראשונה. אם החולדות מתחילות להפגין יציבה כפופה, חוסר רצון לזוז, ירידה משמעותית במשקל (>20%) או כתמי פורפירין, יש להרדים אותן באופן הומני לפני נקודת הסיום של 7 ימי המחקר.