מאמר שיטה

הקמת מודל עכברי של נוירופתיה של סיבים קטנים באמצעות Resiniferatoxin

8 ביולי 2025

במאמר זה

תקציר

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

מקור: Lee, Y. et al., הקמת מודל עכבר של נוירופתיה טהורה של סיבים קטנים עם אגוניסט אולטרהפוטנטי של קולטן חולף פוטנציאל ונילואיד סוג 1.J. Vis. Exp.(2018).

סרטון זה מדגים שיטה לביסוס מודל נוירופתיה של סיבים קטנים בעכברים באמצעות RPV1 אגוניסט resiniferatoxin (RTX). הוא מתאר את השלבים הכרוכים במתן RTX לעכברים ומסביר כיצד RTX גורם למוות עצבי בנוירונים חושיים בקוטר קטן, ובכך מבסס את מודל הנוירופתיה.

פרוטוקול

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

כל הנהלים הנוגעים למודלים של בעלי חיים נבדקו על ידי הוועדה המוסדית המקומית לטיפול בבעלי חיים ועל ידי ועדת הבדיקה הווטרינרית JoVE.

1. הקמת רזיניפרטוקסין (RTX) נוירופתיה

זהירות: RTX הוא נוירוטוקסי ומסוכן. במגע, הוא פועל כמגרה את העיניים, הריריות ודרכי הנשימה העליונות. הימנעו משאיפה והרכיבו משקפי מעבדה ומעילים במהלך הכנת RTX. יש לשטוף עם כמות גדולה של מים במקרה של מגע עם העור או לאחר הטיפול.

  1. הוסף 1 מ"ג של אבקת RTX לתערובת של 200 μL בנפח שווה של Tween 80 ואתנול מוחלט (100 μL לכל ממס).
  2. Aliquot את פתרון RTX (12 μL / בקבוקון) ולאחסן אותו ב -20 ° C עד 3 חודשים. זה מהווה את מניית RTX; מחק את פתרון RTX הנותר בעת התפוגה.
  3. דללו את מלאי RTX במי מלח רגילים לנפח סופי של 600 μL. הריכוז הסופי של תמיסת RTX צריך להיות 0.01%, השווה ל-1 מיקרוגרם RTX בתמיסת רכב של 10 מיקרוליטר.
  4. השתמשו בעכברי ICR זכרים בוגרים בני 8 שבועות (35-40 גרם) כחיות ניסוי ותנו מנה אחת של תמיסת RTX (מינון: 200, 50 ו-10 מק"ג/ק"ג, בהתאמה) תוך צפקית (כלומר) עם מזרק מיקרו-הזרקה לעכברים. עכברים הורדמו על ידי משאף עם 5% איזופלורן להרדמה עמוקה. אם עכברים הראו פעולת נסיגה של הגפיים במהלך הזרקת RTX, עכברים צריכים לקחת שאיפה ארוכה יותר של הרדמה.
    דוגמה: אם העכבר שוקל 40 גרם, הוא יקבל 20 מיקרוליטר של תמיסת RTX, המייצגת מינון של 50 מיקרוגרם / ק"ג.
  5. תן לקבוצה אחת של עכברים נפח שווה של כלי רכב (10% Tween 80 ו-10% אתנול מוחלט בתמיסת מלח) כבקרה.
  6. לאחר הזרקת RTX, החזירו את העכברים לכלוב פלסטיק במחזור חושך של 12 שעות אור / 12 שעות וספקו מזון ומים עד לליביטום.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
לא הוכרז על ניגוד עניינים.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
מגיב כימי
רזיניפרטוקסיןסיגמא₪2256
טווין 80סיגמאעמ' 1754

הדפסות חוזרות והרשאות

בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה

בקש הרשאה

תגיות

TRPV1TRPV1

מאמרים קשורים