$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
כל הנהלים הנוגעים למודלים של בעלי חיים נבדקו על ידי הוועדה המוסדית המקומית לטיפול בבעלי חיים ועל ידי ועדת הבדיקה הווטרינרית JoVE.
1. טיפול בבעלי חיים
- השתמש בעכברי C57BL/6J זכרים בני 5 עד 6 שבועות (20-25 גרם משקל) בניסוי זה.
- החזיקו עכברים במחזור אור/חושך של 12 שעות/12 שעות, וודאו שהם מקבלים מזון ומים עד לליביטום. ספקו את אותן כמויות של מזון ומים הן לקבוצות הבושה והן לקבוצות TBI במהלך המחקר.
- לעשות את כל המאמצים כדי למזער את הכאב ואת אי הנוחות של בעלי החיים.
2. השראת פגיעה מוחית טראומטית
- הזריקו קטמין (80-100 מ"ג/ק"ג)/קסילזין (10 מ"ג/ק"ג) IP להרדמה. בדוק את עומק ההרדמה באמצעות רפלקס עין או רפלקס כאב. השתמש דמעות מלאכותיות או משחת עיניים סיכה כדי לשמור על העיניים מפני התייבשות.
- לאחר הרדמה, לשים את העכבר במצב נוטה. השתמשו בכרית חימום מבוקרת טמפרטורה כדי לשמור על טמפרטורה של 37°C במהלך הניתוח ובמשך 30 דקות לאחר TBI.
- יש לגלח את שיער אזור החתך.
- יש לחטא את הקרקפת באתנול 70% באמצעות שלושה פילינג לסירוגין, ולאחר מכן לחתוך את הקרקפת במישור קשת.
- השתמש במלקחיים כדי למשוך את החתך משני הצדדים ולהפריד מעט את periosteum.
- השתמש בטוש כדי לצייר עיגול (קוטר 3 מ"מ) על האזור הקודקוד הימני של הגולגולת, במרחק של 2 מ"מ מקו האמצע.
- קדח את הגולגולת עם מקדחה חשמלית. ודא כי שלב זה מופעל בזהירות כדי להגן על dura מפני נזק.
- הסירו את דש העצם וחשפו חלון עצם קטן (בקוטר 3 מ"מ).
- מניחים צינורית פגיעה פלסטית (קוטר פנימי = 2.5 מ"מ, אורך = 8 מ"מ) מעל הקרניוטומיה ומצמידים את הצינורית לגולגולת באמצעות אקריליק דנטלי.
- ממלאים את הצינורית במי מלח סטריליים 0.9% NaCl (מלוחים רגילים) באמצעות מזרק (5 מ"ל) כדי לוודא שאין בועות בצינורית.
- הפעל את האוסילוסקופ והמגבר וודא שצינור הלחץ הגבוה של מכשיר ה- LFPI נקי מבועות אוויר. בדוק את המכשיר על ידי העברת כ -10 פעימות עד שהוא נותן אות יציב. כוונן את זווית נקודת ההתחלה של המטוטלת כדי להגיע לעוצמת פולס של כ -2.0 אטמוספירה.
- חבר את צינורית הפציעה להתקן LFPI. לגרום לפגיעה מוחית על ידי לחיצה על ההדק ושחרור המטוטלת. לאחר מכן, קבל דופק והעבר אותו לדורה דרך כל מערכת צינורות מלאה בנוזל סגור.
- הפעל את העכברים בקבוצת הדמה באותו הליך כירורגי. אל תבצע את ה- LFPI.