מאמר שיטה

Cre-LoxP תיווך אינדוקציה של מומים מוחיים במערות במודל עכבר

8 ביולי 2025

במאמר זה

תקציר

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

מקור: Choi, J. P., et al. אינדוקציה והדמיית מיקרו-CT של מומים מוחיים במודל עכבר. J. Vis. Exp. (2017)

בסרטון זה, גור עכבר מהונדס גנטית הנושא את הגן Ccm2 ומשני צדדיו אתרי loxP ו-Cre recombinase המאוחה לקולטן אסטרוגן משמש לגרימת מומים מוחיים במערות (CCM). מתן 4-hydroxytamoxifen מפעיל Cre בתאי אנדותל, מה שמוביל למחיקת Ccm2 והיווצרות CCMs במוח.

פרוטוקול

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

כל ההליכים הנוגעים למודלים של בעלי חיים נבדקו על ידי הוועדה המוסדית המקומית לטיפול בבעלי חיים ועל ידי ועדת הבדיקה הווטרינרית JoVE.

1. השראת מומים מוחיים או CCMs במודלים עכבריים

  1. קרוס Cdh5-CreErt2; עכברי Ccm2fl/fl עם Ccm2fl/fl ליצירת המלטות עם Cdh5-CreErt2; Ccm2fl/fl (Ccm2iECKO) גורים ובקרות ליטרמט (Ccm2fl/fl). Cdh5-CreErt2 ו-Ccm2fl/fl בעלי חיים תוארו בעבר19.
  2. יש להמיס 4HT באתנול 100% ולאחסן בטמפרטורה של -80°C באליציטוטים של 30 μL 4-hydroxytamoxifen(4HT) (ריכוז: 10 מ"ג/מ"ל). ביום השימוש, לדלל aliquoted 4HT בשמן תירס (0.5 מ"ג / מ"ל).
  3. הזריקו תוך גזסטרית 50 μL של 4HT (0.5 מ"ג/מ"ל) לגורים בילודים ב-P1 כדי לגרום לנגעי CCM ניסיוניים באמצעות מזרק אינסולין.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
לא הוכרז על ניגוד עניינים.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
4-הידרוקסי טמוקסיפןסיגמא-אולדריץ'H6278כדי להפעיל את Cdh5-CreErt2
שמן תירססיגמא-אולדריץ'C8267-500MLכדי לדלל 4-hydroxy טמוקסיפן
מזרק אינסולין

הדפסות חוזרות והרשאות

בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה

בקש הרשאה

תגיות

Cre LoxPCCM24

מאמרים קשורים