$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
כל הנהלים הנוגעים למודלים של בעלי חיים נבדקו על ידי הוועדה המוסדית המקומית לטיפול בבעלי חיים ועל ידי ועדת הבדיקה הווטרינרית JoVE.
1. השראת הרדמה
- מרדימים את העכבר עם קטמין (125 מ"ג/ק"ג) וקסילזין (10 מ"ג/ק"ג) בהזרקה תוך-צפקית.
2. ניטור סימנים חיוניים כל 15 דקות
- יש לעקוב אחר הטמפרטורה, קצב הנשימה וצבע העור. העכבר צריך להרגיש חם למגע. העור צריך להיראות ורוד ומחורר היטב. קצב הנשימה צריך לנוע 50-70 נשימות לדקה.
3. הליכים טרום ניתוחיים
- שקלו את כל העכברים ביום שלפני השראת הפציעה.
- לעקר קבוצה אחת של כלי ניתוח על ידי autoclaving עבור כל נבדק הניסוי. יש לעקר את המכשיר הפוגע לפני השימוש.
- הכינו כלוב התאוששות על ידי הנחת כלוב נקי מעל כרית חימום חשמלית המוגדרת למצב "נמוך" וממוקמת באופן כזה שהעכברים יוכלו להתרחק מהחום ברגע שהוא אמבולטורי.
- הגדר את חדר הניתוח בתוך מכסה מנוע זרימה למינרי מעוקר.
- מקם את מסגרת ההפעלה הסטריאוטקסית.
- חבר את ההתקן הפוגע למסגרת הסטריאוטקסית.
- הגדר את המכשיר המפעיל עם הפרמטרים הביומכניים הרצויים עבור מהירות וזמן שהייה.
הערה: בפרוטוקול זה מתוארת פגיעה מוחית חמורה באמצעות קצה פגיעה בקוטר 3 מ"מ באמצעות כריתת גולגולת בקוטר 5 מ"מ כאשר המהירות נקבעת על 2.5 מ"מ לשנייה וזמן שהייה של 0.1 שניות. ניתן להשתמש במגוון רחב של פרמטרים ביומכניים כדי לגרום לספקטרום המלא של TBI.
- לבשו ציוד מגן אישי חדש וכפפות סטריליות.
- יש לגלח את הפרווה מאתר הניתוח באמצעות קוצץ חשמלי.
- יש למרוח משחת מגן אופתלמית על עיני העכבר כדי למנוע פגיעה בקרנית וייבוש.
- הכניסו את העכבר לחדר הניתוח.
- הכינו את העור עם פילינג כירורגי על בסיס יוד לסירוגין עם אלכוהול שלוש פעמים.
4. יישום של השפעה קורטיקלית מבוקרת
- חותכים את הקרקפת 1 ס"מ בקו האמצע עם אזמל החושף את הגולגולת.
- מקם את העכבר בתוך מסגרת הפעלה סטריאוטקסית על ידי אבטחת העצמות הרקתיות הדו-צדדיות בין מוטות אוזניים מיניאטוריים ונעילת החותכות בתוך מהדק חותך ליצירת אחיזה יציבה של שלוש נקודות בראש העכבר.
- יש להרחיק את הקרקפת מהאתר הניתוחי באמצעות המוסט או מלקחיים ננעלים כדי להבטיח שהקרקפת לא תבוא במגע עם המקדחה במהלך כריתת הגולגולת.
- זהה את התפרים הקשת והעטרה על הגולגולת החשופה.
הערה: פרוטוקול זה מרכז את כריתת הגולגולת 2 מ"מ משמאל לתפר הקשת ו-2 מ"מ רוסטרל לתפר העטרה.
- בצע כריתת גולגולת באמצעות מקדחה עם מקדח טרפין.
- כדי לבצע את כריתת הגולגולת, תחילה להפעיל את המקדחה במהירות מקסימלית ולאחר מכן להחיל את מקדח טרפין בניצב לגולגולת באתר של craniectomy.
- הפעילו לחץ עדין ואחיד על המקדחה ברגע שנוצר מגע עם הגולגולת. "לתת" קל יורגש ברגע שהמקדח יחדור דרך הגולגולת. אין לחדור את dura.
הבסיסית
הערה: פרוטוקול זה משתמש במקדח טרפין 5 מ"מ לביצוע כריתת הגולגולת.
- השתמש במלקחיים ומחט היפודרמית קטנה כדי להסיר את דש העצם, לחשוף באופן מלא את dura mater הבסיסי.
- סובב את קצה המשפיע לשדה הניתוח והנמיך אותו עד שהוא יוצר מגע עם הדורה מאטר החשוף. לאחר יצירת המגע, חיישן המגע של המכשיר ישמיע צליל קולי כדי להתריע בפני המנתח שנוצר מגע. פעולה זו תסמן את נקודת האפס שממנה נקבע עומק העיוות.
הערה: פרוטוקול זה משתמש בחוד פגיעה של 3 מ"מ כדי ליצור פציעה חמורה. ניתן להשתמש בטיפים קטנים כמו 1 מ"מ כדי להחיל פציעה מקומית יותר.
- משוך את קצה ההשפעה והגדר את עומק הפגיעה הרצוי על-ידי הנמכת מיקום המשפיע במסגרת הסטריאוטקסית.
הערה: בפרוטוקול זה אנו מתארים פגיעה חמורה על ידי הגדרת עומק העיוות ל -2 מ"מ.
- החל את הפציעה על ידי הפעלת המשפיע על המכשיר המפעיל.
- סובב את התקן ההשפעה מחוץ לשדה והסר את החיה מהמסגרת הסטריאוטקסית.
5. סגירת אתר כירורגי
- שליטה בדימום מהגולגולת ומשטח קליפת המוח הפגוע בלחץ ישיר ממוליך כותנה סטרילי.
- יבש את הגולגולת עם מוליך כותנה סטרילי.
- סגור את הקרקפת מעל כריתת הגולגולת באמצעות דבק כירורגי זמין מסחרית או תפר מונופילמנט.
הערה: בפרוטוקול זה משתמשים בדבק כירורגי וטרינרי לסגירת הקרקפת. דש העצם אינו מוחלף ומושלך לפח.
6. טיפול ומעקב לאחר הניתוח
- ניהול שיכוך כאבים לאחר הניתוח (למשל, buprenorphine שחרור מושהה 0.1-0.5 מ"ג / ק"ג מנוהל תת עורית מתן 72 שעות של שיכוך כאבים מתמשך).
- הניחו את בעל החיים במצב התאוששות דקוביטוס רוחבי בכלוב נקי שחומם מראש.
- התבוננו בבעלי החיים עד שהם ערים וניידים, ואז החזירו כל עכבר לכלוב הביתי שלו.
- הבטיחו גישה חופשית למזון ולמים. צריכת מזון ומים רגילה מתחדשת בדרך כלל תוך שעה עד שעתיים לאחר הפציעה.
- מדדו את משקל הגוף כל שלושה ימים במהלך הניסוי.