השראת דימום תת-עכבישי במודל עכבר באמצעות ניקוב אנדוסקולרי

תקציר

מקור: Liu, S., et al. מודל ניקוב אנדוסקולרי לדימום תת-עכבישי בשילוב עם דימות תהודה מגנטית (MRI).J. Vis. Exp. (2021).

הסרטון מדגים את השראת הדימום התת עכבישי באמצעות ניקוב אנדו-וסקולרי במודל עכבר. חתך נעשה באזור הצוואר של העכבר המרדים כדי לגשת לעורק התרדמה המשותף ואת bifurcation שלה. חוט להט מוכנס דרך העורקים כדי לנקב ענף עורק תוך גולגולתי, גרימת דימום תת-עכבישי.

פרוטוקול

כל הנהלים הנוגעים למודלים של בעלי חיים נבדקו על ידי הוועדה המוסדית המקומית לטיפול בבעלי חיים ועל ידי ועדת הבדיקה הווטרינרית JoVE.

1. הכנת בעלי חיים

1. יש להשרות הרדמה על ידי הזרקת קטמין (70 מ"ג/ק"ג) וקסילזין (16 מ"ג/ק"ג) תוך צפקית. לשמור על טמפרטורת גוף נורמלית, תורם השראה מהירה של הרדמה עמוקה. בדוק הרגעה נאותה עם גירוי כאב, כגון צביטת בוהן, וודא את היעדר התגובה.
2. יש לגלח בזהירות את שיער הצוואר של העכבר עם סכין גילוח, לנקות אותו עם 70% אתנול ואחריו בטאדין/כלורהקסידין, ולמרוח לידוקאין 1% על פני העור לשליטה מקומית בכאב.
3. הנח את העכבר במצב שכיבה. השתמש בסרט כדי לתקן את הגפיים והזנב, מותח בעדינות את עור הצוואר לצד הנגדי של הניתוח. במקביל, להרים את הצוואר מעט.
4. השתמש משחה אופתלמית (למשל, 5% dexpanthenol) כדי למנוע התייבשות של העיניים במהלך הניתוח.

2. אינדוקציה SAH

1. פתחו את עור הצוואר בעזרת אזמל סטרילי, מהסנטר ועד לקצה העליון של עצם החזה (1.5 ס"מ), והפרידו בבוטות את בלוטות הרוק מרקמת החיבור הסובבת אותן.
2. יש להפריד את קבוצת השרירים לאורך צד אחד [במקרה זה, הצד הימני] של קנה הנשימה, ולחשוף את מעטפת עורק התרדמה המשותף (CCA) המכוסה בכלי דם מזינים וורידים. ה-CCA והעצבים ממוקמים בסמיכות זה לזה.
3. נתקו את ה-CCA והשאירו 8-0 חופשי תפר משי סביב CCA ללא קשירה מראש. שימו לב להגנה על העצב הואגלי, שכן הוא ניזוק בקלות (איור 1A).
4. ביפורקציה משולשת של CCA, עורק התרדמה הפנימי (ICA) ועורק התרדמה החיצוני (ECA) נראית לאורך השליש האחורי התחתון של הדיאסטזיס. נתחו את הקצה הדיסטלי של ה-ECA וקשרו את הכלי מרחק כפול ככל האפשר.
5. נתק את ECA בנקודת האמצע של הקטע הכפול ויצר גדם כלי.
6. סדרו מראש קשירה אחת לחוט הלהט סביב גדם ECA, אל תסגרו אותו עד להחדרת חוט להט מוצלחת.
7. השתמשו בתפר או בקליפס זעיר כדי לחסום את ה-ICA וה-CCA באופן זמני (איור 1B).
8. בצע חתך קטן (כמחצית מקוטר ECA) ב- ECA באמצעות מספריים מיקרו-וסקולריים. הכניסו חוט להט פרולן 5-0 (לחילופין 4-0) לתוך ECA וקדמו אותו לתוך CCA.
9. סגור מעט את הרצועה ב-ECA תוך שחרור תפס המיקרו ב-ICA וב-CCA (איור 1C).
10. משכו בעדינות לאחור את חוט הלהט וכווננו את גדם ECA לכיוון הגולגולת, תוך שהם פולשים לחוט הלהט דרך הביפורקציה לתוך ה-ICA (איור 1D).
11. כוונו את קצה חוט הלהט מדיאלית בזווית של ~30° לקו האמצע של קנה הנשימה ו~30° למישור האופקי. דחפו את חוט הלהט קדימה בתוך האגודה למלחמה בסרטן. לאחר ההגעה לעורק המוח הקדמי (ACA) - ביפורקציה של עורק המוח האמצעי (MCA), נתקלים בהתנגדות (~ 9 מ"מ).
12. מקדמים את חוט הלהט 3 מ"מ הלאה, מנקבים את ACA הימני. משכו מיד את חוט הלהט לגדם ECA, ואפשרו זרימת דם לחלל התת עכבישי.
13. שמרו על חוט הלהט בתנוחה הזו במשך כ-10 שניות (איור 1E). נוכחות של רעידות שרירים, מיוזה ipsilateral, התנשפות לנשימה, קצב לב שונה, בריחת שתן יכול להיות ראיות תומכות של ניתוח מוצלח.
14. סגור באופן זמני את CCA כדי למנוע איבוד דם עודף. משוך את חוט הלהט באופן מיידי וקשר את ECA עם התפר שנקבע מראש. פתחו מחדש את ה-CCA ואפשרו רפרפוזיה והזרמה נוספת של דם לחלל התת-עכבישי (איור 1F).
15. לאחר בדיקת דליפת דימום, יש לחטא את העור סביב הפצע כדי למנוע זיהומי עור לאחר הניתוח, ולתפור את הפצע בתפר 4-0 סיבי פוליאסטר שאינו נספג.
16. הניחו את העכבר בקופסה תרמית עד להכרה חוזרת. המתינו עד שבעל החיים יהיה ער לחלוטין וודאו שהוא חזר להכרה מספקת כדי לשמור על עצם החזה. אין להחזיר בעלי חיים לחברתם של עכברים אחרים עד להחלמה מלאה.
17. מתן אקמול במשקל גוף של 200-300 מ"ג/ק"ג להקלה על כאבים לאחר הניתוח.
18. בדוק את העכברים מדי יום לאחר הניתוח.

תוצאות

איור 1: תמונות שלב אחר שלב של טכניקה כירורגית.(A) תיאור האנטומיה של עורק התרדמה הימני החשוף: ה-CCA והפיצול שלו ל-ICA ול-ECA מזוהים, כמו גם הענפים הקטנים של ECA (OA ו-STA). (B) ה-ECA מגויס מהרקמה שמסביב וקושר בשני תפרים לפני החיתוך. קשירה שלישית צריכה להיות ממוקמת באופן רופף ליד הביפורקציה מבלי להסתיר אותה. (C) ה-ICA וה-CCA חסומים באופן זמני (עם קשירה...

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה

שם	חברה	מספר קטלוג	הערות
קרם עיניים	באייר	815529836	בפנטן
תפר קשירה (5-0)	SMI		שחור משי USP
מקור אור למיקרוסקופ	זיס	CL 6000 LED
קטמין	CP-פארמה	797-037	100 מ"ג/מ"ל
פרצטמול (40 מ"ג/מ"ל)	בני ארזניימיטל	4993736
חוט להט פרולן (5-0)	Erhicon	EH7255
תער	וולה	HS61
מכשיר כירורגי (מספריים עדינים)	FST	14060-09
כלי ניתוח (מלקחיים #1)	אסקולאפ	FM001R
כלי ניתוח (מלקחיים #2)	אסקולאפ	FD2855R
כלי ניתוח (מלקחיים #3)	המאכר	ה"צ 082-12
כלי ניתוח (מחזיק מחט)	FST	91201-13
כלי ניתוח (מספריים קפיציים Vannas)	FST	15000-08
מיקרוסקופ כירורגי	זיס	סטמי 2000 C
תפר פוצע(4-0)	Erhicon	CB84D
קסילבט	CP-פארמה	797-062	20 מ"ג/מ"ל