מאמר שיטה

גרימת שבץ טרומבוטי באמצעות היפוקסיה ואיסכמיה במודל עכבר

8 ביולי 2025

במאמר זה

תקציר

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

מקור: Sun, Y. Y., et al., מודל שבץ טרומבוטי המבוסס על היפוקסיה-איסכמיה מוחית חולפת. J. Vis. Exp. (2015).'

סרטון זה מדגים את ההליך של שכפול שבץ טרומבוטי במודל עכבר על ידי חסימת עורק הצוואר המשותף הימני וחשיפת העכבר לסביבה דלת חמצן. תהליך זה מפחית את זרימת הדם והחמצן למוח, וגורם להיווצרות קרישי דם ולנזק מוחי.

פרוטוקול

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

כל ההליכים הכוללים מודלים של בעלי חיים נבדקו על ידי הוועדה המוסדית המקומית לטיפול בבעלי חיים ומועצת הביקורת הווטרינרית של JoVE.

1. הגדרה

  1. יש להכין את מיטת הניתוח על משטח חימום המחובר למשאבת חום בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס למשך 15 דקות לפחות לפני הניתוח. הניחו גליל צוואר באמצעות קנה של מזרק 3 מ"ל על מיטת הניתוח. הכן את גז ההרדמה עם איזופלורן 2% באוויר הרפואי.
  2. הכן מלקחיים עם חיטוי, מספריים, מחזיקי מיקרו מחטים, המוסטט, צמר גפן ותפרים. כמו כן, הכינו דבק רקמות ומשחת עיניים.
  3. הגדר את מערכת ההיפוקסיה ובקרי הטמפרטורה עם מנורת חימום ובדיקה רקטלית. הכן גז היפוקסיה עם 2% איזופלורן ב-7.5% O2 מאוזן על ידי 92.5% N2.
  4. שעה לפני הניתוח, העכברים עוברים ניתוח על ידי הזרקה תת עורית של מלוקסיקם בשחרור איטי (4.0 מ"ג/ק"ג).

2. איסכמיה מוחית חולפת (איור 1B)

  1. יש להרדים עכברי C57BL/6 זכרים בני 10-13 שבועות במשקל 22 עד 30 גרם בתא האינדוקציה להרדמה עם איזופלורן 3% עד שהחיה אינה מגיבה ללחיצת כף הרגל, ולאחר מכן להסיר את השיער בצוואר ימין באמצעות מכונת גילוח אלקטרונית.
  2. הנח עכברים על מיטת הניתוח המחוברת עם 2% איזופלורן באוויר רפואי בקצב זרימה של 2 ליטר לדקה. גפיים קדמיות מאובטחות מתוחות לאורך הצוואר בצדדים באמצעות סרט רפואי.
  3. נקה את אזור הניתוח לחתך עם בטדין ואחריו אלכוהול ולאחר מכן צמר גפן.
  4. תחת מיקרוסקופ מנתח, בצע חתך צוואר הרחם הימני של 0.5 ס"מ באמצעות מלקחיים ישרים ומספריים מיקרו כ-0.2 ס"מ לרוחב העור של קו האמצע.
  5. השתמש בזוג מלקחיים משוננים דק כדי לפרק את הפאשיה והרקמה כדי לחשוף את עורק הצוואר המשותף הימני (RCCA). הפרד בזהירות את ה-RCCA מהעצב הנרתיק באמצעות זוג מלקחיים חלקים עדינים.
  6. קשרו שני תפרי משי 5-0 חתוכים מראש (ניתנים לשחרור) על ה-RCCA, ולאחר מכן תפרו את העור באמצעות תפרי מונופילמנט ניילון 4-0 (איור 1C).
  7. יש למרוח משחת עיניים על שתי העיניים כדי למנוע יובש.
  8. העבירו במהירות את העכברים למערכת ההיפוקסיה והכניסו את האף והפה שלהם למסכת פנים עם 2% איזופלורן ב-7.5% O2 בקצב זרימה של 0.5-1 ליטר לדקה למשך 30 דקות.
    1. במהלך היפוקסיה, השתמש בבקרי טמפרטורה עם מנורות חימום כדי לשלוט בטמפרטורת פי הטבעת ב-37.5 ±-0.5 מעלות צלזיוס. עקוב אחר קצב הנשימה ב-80-120 נשימות לדקה. שמירה על טמפרטורת הגוף מעל 37 מעלות צלזיוס במהלך היפוקסיה חשובה ליצירת אוטם מוחי עקבי. קצב נשימה נמוך מתרחש בדרך כלל לאחר 20 דקות של היפוקסיה. הסר את מסכת הפנים ואפשר אספקת אוויר רגילה אם קצב הנשימה יורד מתחת ל-40. זה לוקח 1-2 דקות ולא נספר למשך 30 דקות של היפוקסיה

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

figure-results-1
איור 1: נוהל של עלבון חולף של היפוקסיה-איסכמיה מוחית (tHI) בעכברים בוגרים. (A) השילוש של Virchow שמניע פקקת כולל קיפאון בזרימת הדם, פגיעה באנדותל וקרישיות יתר של הדם. (B) דיאגרמה סכמטית של הליך שבץ tHI. שני קשרים הניתנים לשחרור נקשרו לעורק הצוואר המשותף הימני (CCA), ואחריהם אספקת 7.5% חמצן דרך חרוט האף למשך 30 דקות, בעוד שטמפרטורת פי הטבעת של העכבר נשמרה על 37-38 מעלות צלזיוס. לאחר ההיפוקסיה המערכתית...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
לא הוכרז על ניגוד עניינים.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
עכברים זכרים בוגריםנהר צ'ארלסC57BL/6 בן 10~13 שבועות (22~30 גרם)
מערכת הרדמה ניידת של חיות מעבדהVetEquip901807הרדמה
מיכל אוויר רפואי (דחוס)איירגזUN1002הרדמה
איזופלורןפיראמל הלת'קרNDC 66794-013-25הרדמה
מערכת הרדמה לבעלי חיים במעבדה מרובת תחנותסורגיבטV703501מערכת היפוקסיה
7.5% O2 מאוזן על ידי 92.5% מיכל N2איירגזUN1956מערכת היפוקסיה
בקר טמפרטורה עם מנורת חימוםקול פארמרEW-89000-10בקרי טמפרטורה
בדיקה רקטליתקול פארמרNCI-00141PGבקרי טמפרטורה
ניתוח מיקרוסקופאולימפוסSZ40הגדרה כירורגית
משאבת חום עם פד חימוםגיימארTP700הגדרה כירורגית
מלקחיים מעוקלים עדינים (משוננים)FST11370-31מכשיר כירורגי
מלקחיים מעוקלים עדינים (חלקים)FST11373-12מכשיר כירורגי
מיקרו מספרייםFST15000-03מכשיר כירורגי
מחזיקי מחטים זעיריםFST12060-01מכשיר כירורגי
המוסטטים של Halsted-MosquitoFST13008-12מכשיר כירורגי
5-0 תפר משימנגנון הרווארד624143ציוד כירורגי
4-0 תפר מונופילמנט ניילוןLOOK766Bציוד כירורגי
דבק רקמותמעבדות אבוטNC9855218ציוד כירורגי
Puralube Vet ointmentפישרNC0138063מניעת יובש בעיניים

הדפסות חוזרות והרשאות

בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה

בקש הרשאה

תגיות

מאמרים קשורים