גרימת אובדן שמיעה בעכברים באמצעות חשיפה ממושכת לקול בעוצמה גבוהה

תקציר

מקור: Lee, D. et. al., תנאי ניסוי מותאמים לאובדן שמיעה הנגרם על ידי רעש בעכברים והערכת תפקוד השמיעה ונזק לתאי שיער חיצוניים. J. Vis. Exp. (2023)

סרטון זה מדגים את ההליך של אובדן שמיעה הנגרם מרעש בעכברים. צליל בעוצמה גבוהה פוגע בתאי השיער באוזן הפנימית ומשבש את מסלולי השמיעה, וכתוצאה מכך לפגיעה בשמיעה.

פרוטוקול

כל ההליכים הכוללים מודלים של בעלי חיים נבדקו על ידי הוועדה המוסדית המקומית לטיפול בבעלי חיים ומועצת הביקורת הווטרינרית של JoVE.

1. אינדוקציה של ליקוי שמיעה המושרה על ידי רעש (NIHL) בעכברים

1. הכינו את הכלוב לעכברי הניסוי
   1. כדי לעשות זאת, השתמשו בכלוב מלכודת חולדות במידות של 14 ס"מ × 17 ס"מ ×-24 ס"מ. חותכים ארבע חתיכות של לוחות פלסטיק גלי לגדלים מתאימים, כך שהם משתלבים בכלוב (13 ס"מ × 23 ס"מ ו -13 ס"מ × 16 ס"מ).
   2. כדי למנוע מהעכברים לחתוך את רגליהם על ידי רשת הרשת, הניחו שניים מהחלקים בתחתית ובצד האחורי, בהתאמה. הניחו את שני החלקים האחרים בניצב זה לזה, כדי לחלק את החלל בתוך הכלוב לרבעים.
2. בצע מחקר זה בקופסה אטומה לרעש. הנח רמקול 8.5 ס"מ מול הכלוב, והנח גם את הרמקול וגם את הכלוב בקופסה אטומה לרעש.
3. פתח את תוכנת היישום CLIO.
4. העבר את הסמן לסמל הרמקול, ולאחר מכן לחץ על TwoSin. הזן ושנה את הערך של Freq 1 ל-1000 Hz, ו-Freq 2 ל-6000 Hz, ולחץ על OK כדי להתחיל להשמיע את הצליל.
5. תחת הכרטיסייה Leq, שנה דציבלים וולט (dBV) לדציבלים רמת לחץ קול (dBSPL). לאחר הגדרת השעה בממשק התוכנה, לחץ על כפתור המשולש הירוק כדי להשמיע את הצליל.
6. הנח מיקרופון מול הרמקול במרחק של 8.5 ס"מ כדי לכייל את רמת הרעש (איור 1). כוונן את רמת הרעש ל-125 dB SPL-A ונטר ברציפות במשך לא פחות מ-3 דקות כדי להבטיח שרמת הרעש יציבה מספיק. השתמש בגנרטור, מנתח ומגבר כדי ליצור ולשלוט ברעש. (איור 2)
   הערה: בצע שלב זה בתיבה אטומה לרעש כדי למנוע נזק לשמיעה של המפעיל.
7. הכניסו ארבעה עכברי C57BL/6J זכרים לכלוב (אחד לכל רבעון) לחשיפה לרעש. הקצה באופן אקראי את העכברים בכל רבעון במהלך החשיפה לרעש. הניחו מיקרופון בחלק העליון של הכלוב כדי לנטר את רמת הרעש במהלך החשיפה לרעש (איור 3).
   הערה: בצע שלב זה בתיבה אטומה לרעש כדי למנוע נזק לשמיעה של המפעיל.
8. חשוף את העכברים לרעש בתדרים של 1 קילו-הרץ ו-6 קילו-הרץ ברציפות במשך 6 שעות ביום, במשך 5 ימים רצופים.

תוצאות

איור 1: חישוב מתח מהכיול. עבור כל תדר ספציפי, הערך של המתח שנבחר (ציר אופקי) יוזן לעקומת הכיול כדי לקבל את רמת הצליל המתאימה (ציר אנכי).

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה

שם	חברה	מספר קטלוג	הערות
1/4" CCP Free-field Standard Microphone Set	GRAS	428158	לחשיפה
כלוב מלכודת עכברושים			14 ס"מ x 17 ס"מ x 24 ס"מ
מגבר קול, MT-1000	unika		לחשיפה לרעש
מחולל/מנתח סאונד/שונות, FW-02	CLIO	620300719	עבור חשיפה
תא אטום לרעש	IEA Electro-Acoustic Technology		עבור חשיפה לרעש ו-ABR
Speaker	IEA Electro-Acoustic Technology		לחשיפה לרעש

לרעש לרעש