מדידת תגובת גזע המוח השמיעתי בעכברים

תקציר

מקור: Lee, D., et. al. תנאי ניסוי מותאמים לאובדן שמיעה הנגרם מרעש בעכברים והערכת תפקוד השמיעה ונזק לתאי השיער החיצוניים. J. Vis. exp. (2023)

הסרטון הזה מדגים את מדידת תגובת גזע המוח השמיעתית (ABR) בעכבר. אלקטרודות מונחות על הראש, מאחורי האוזן וליד זנבו של עכבר מורדם. גירויים אקוסטיים בעוצמות שונות מועברים ואותות חשמליים הנוצרים נרשמים כצורות גל.

פרוטוקול

כל ההליכים הכוללים מודלים של בעלי חיים נבדקו על ידי הוועדה המוסדית המקומית לטיפול בבעלי חיים ומועצת הביקורת הווטרינרית של JoVE.

1. הערכה מבוססת תגובת גזע המוח השמיעתית (ABR) של סף השמיעה

1. השתמש במערכת בדיקת ABR מסחרית שתוכננה במיוחד עבור בעלי חיים קטנים.
2. יש להזריק תוך צפקית תערובת של טילטמין וזולאזפאם (40 מ"ג/ק"ג) וקסילזין (9.3 מ"ג/ק"ג) לעכברים לצורך הרדמה כללית.
   הערה: הערכת ABR לוקחת ~2 שעות. הקפידו לספק תמיכה תרמית באמצעות כרית חימום ולמרוח משחת עיניים למניעת יובש בזמן שהעכבר תחת הרדמה.
3. מדוד את ה-ABR בעכבר בהרדמה כללית. הנח אלקטרודות מחט תת-עוריות (12 מ"מ) בקודקוד, מאחורי אפרכסת האוזן השמאלית והגב ליד הזנב כדי למדוד את סף השמיעה.
4. הציגו גירויים אקוסטיים באמצעות רמקול הממוקם במרחק של 1 ס"מ מהאוזן השמאלית של בעל החיים.
5. השתמש באוסילוסקופ כדי לשלוט בגירויים האקוסטיים. בחרו Sine Wave עבור הגירויים ו-10 k עבור סולם החלון. סובב את כפתור תדר כדי לקבל את התדר הרצוי של הגירויים האקוסטיים.
6. התאם את עוצמת הגירוי על ידי סיבוב משרעת או כפתור AMLP במחולל הפונקציות. השג את עוצמת הגירוי הרצויה על ידי סיבוב כפתור AMLP למתח מתאים, המחושב מהכיול.
7. אסוף את מדידות ה-ABR תחת סדרה של עוצמות גירוי, מ-10 dB Sound Pressure Levelor SPL ועד 100 dB SPL, עם גודל צעד של 10 dB.
   הערה: מדוד את סף השמיעה בתיבה אטומה לרעש. ההנחה הייתה שרמת עוצמת הגירוי המינימלית שיכולה להוביל לגל V שניתן להבחין בו באות שנאסף היא סף ה-ABR ( איור 1). לאחר הערכת ABR, עקוב אחר בעל החיים עד שהוא מתאושש מההרדמה (~ שעה).

תוצאות

איור 1: מדידת ABR של שמיעה. תוצאות ABR מייצגות ב-12 קילו-הרץ, שנאספו ביום ה-13 (שבוע לאחר החשיפה לרעש). הגל V בכל עוצמה מסומן אם ניתן להבחין בו.

חומרים