ביצוע אקסוטומיה של ריסוק על עצב הפנים במודל עכבר

תקציר

מקור: Olmstead, D. N., et al., אקסוטומיה של עצב הפנים בעכברים: מודל לחקר תגובת הנוירונים המוטוריים לפציעה. J. Vis. Exp. (2015).

סרטון זה מדגים את הליך ריסוק עצב הפנים בעכבר, שבו דיסקציה קהה דרך ציוני דרך מרכזיים חושפת את תא המטען של עצב הפנים בנקב הסטילומסטואיד. לאחר מכן משתמשים במלקחיים כדי לדחוס את תא המטען של העצב, לגרום לנזק אקסונלי ולשבש את העברת האותות העצביים.

פרוטוקול

כל ההליכים הכוללים מודלים של בעלי חיים נבדקו על ידי הוועדה המוסדית המקומית לטיפול בבעלי חיים ומועצת הביקורת הווטרינרית של JoVE.

1. גישה כירורגית

1. יישור ומיקוד הסטריאוסקופ עם התחום הכירורגי. כוונן את חרוט האף והדביק אותו כך שימוקם לאורך קצה שדה הראייה.
2. כשהעכבר שוכב על צדו השמאלי, הדביקו את קצה האוזן הימנית לקונוס האף, וחשפו את האזור שמאחורי האוזן שבו יבוצע החתך. ודא כי וריד האפרכסת האחורי נע אופקית על פני האוזן. שימו לב שהמיקום הנכון של החיה והדבקת האוזן הם חיוניים על מנת למצוא במהירות את עצב הפנים.
3. הרטיבו את הפרווה על האוזן ומאחוריה עם 70% אתנול וגלחו את מקום הניתוח באמצעות סכין גילוח או אזמל. הרטבה מוקדמת של הפרווה מקלה על הגילוח במיקום אנטומי זה.
4. נקו את העור עם תמיסת יוד, כגון קרצוף כירורגי בטדין (7.5% פובידון-יוד), ואחריו 70% אתנול. חזור על ניקוי זה פעמיים נוספות כדי לחטא היטב את האזור.
5. כדי לקבוע היכן לבצע את החתך, עקוב אחר וריד האפרכסת האחורי מהאוזן בזנב לאזור האחורי לבליטת האוזן. בעזרת מספריים קפיציים, בצע חתך של 4 מ"מ 2 - 3 מ"מ אחורי הבליטה.
6. לנתח דרך השומן התת עורי והפאשיה באמצעות דיסקציה קהה. הימנע מחיתוך ישיר עם המספריים מכיוון שכלי דם או רקמת שריר עלולים להיפגע בקלות.
7. אם מתרחש דימום, הפעל לחץ על מקום הניתוח בעזרת צמר גפן סטרילי למשך 30 שניות לפחות. אם מתרחש אובדן נוזלים משמעותי, הזריק לעכבר תוך הצפק עד 0.5 מ"ל של תמיסת מלח סטרילית של 0.9% באמצעות מחט של 25 או 27 גרם.
8. השתמש במספר ציוני דרך מרכזיים, עצב אביזר עמוד השדרה, תעלת האוזן והשריר הדיגסטרי הקדמי (המתואר להלן), כדי לאתר את עצב הפנים. נתח סביב ציוני דרך אלה עד לדמיון ענפי עצב הפנים. העצב יופיע כמבנה לבן מוצק משמעותי כאשר הוא נחשף, ושכבת פאשיה נדבקת למבנים הבסיסיים.
   1. מצא את עצב האביזר בעמוד השדרה, העובר מהחלק הזנבי של הגולגולת כדי לעצב את שריר הטרפז לאחר ניתוח השומן התת עורי והפאשיה. עצב הפנים עמוק לעצב האביזר בעמוד השדרה.
   2. מצא את תעלת האוזן הסחוסית שנראית לבנה פנינה וניתן לראות אותה לעצב הפנים.
   3. מצא את בטן השריר של השריר הדיגסטרי הקדמי שנמצא על גבי עצב הפנים והזנב אליו.
9. כאשר מדמיינים את הענפים העיקריים של עצב הפנים, עקבו אחריהם בגב כדי למצוא את מקורם מהנקב הסטילומסטואידי. שימוש במלקחיים דקים של Dumont #5/45 כדי להחזיק את אתר הניתוח פתוח, קדם את קצות המספריים הקפיציים בעקבות נתיב העצב, ולאחר מכן הזז את המלקחיים בגב כדי לשמור על האזור המתקדם החדש פתוח.
10. דמיין את תא המטען של עצב הפנים עם הענפים הזיגומטיים, הבוקאליים והשוליים של הלסת התחתונה בשלב זה.
    הערה: הענף הטמפורלי יימצא קרוב יותר לנקב. עצב הלסת התחתונה השולי מסתעף לחלקיו העליונים והתחתונים קרוב יותר ללסת, ולכן ענפי העצב הללו לא יהיו גלויים ברמה זו.
    1. אם אתה מבצע פציעת ריסוק, השתמש במלקחיים Dumont #5/45 כדי לדחוס את העצב למשך 30 שניות באמצעות לחץ קבוע כדי לנתק את כל האקסונים, ולאחר מכן חזור על ריסוק זה בזווית שנייה בניצב לאתר הריסוק הראשון. הימנע מהפעלת כמויות משתנות של לחץ במהלך הריסוק של 30 שניות, אחרת הפציעה לא תהיה עקבית בין בעלי חיים.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה

שם	חברה	מספר קטלוג	הערות
Stereo Microscope	Leica	M60
סרט תיוג	Fisher Scientific	15-952
Vannas-Tübingen Spring Scissors - ישר/חד/8.5 ס"מ/5 מ"מ קצה חיתוך	Fine Science Tools	15003-08	עיקור לפני השימוש
Dumont #5/45 מלקחיים - סטנדרטי טיפים/זוויתי 45°/Dumoxel/11 ס"מ	Fine Science Tools	11251-35	עיקור לפני השימוש
0.9% הזרקת נתרן כלורי, USP	Hospira	0409-4888-10
Betadine, 16 oz, with dispenser	Fisher Scientific	19-027132
70% Ethanol
מעקר חרוזי זכוכית