יצירת מודל עכבר עם פגיעה בחוט השדרה

כל ההליכים הכוללים מודלים של בעלי חיים נבדקו על ידי הוועדה המוסדית המקומית לטיפול בבעלי חיים ומועצת הביקורת הווטרינרית של JoVE.

1. הכנת מכשירים כירורגיים ולא כירורגיים

1. לעקר את המכשירים הכירורגיים והלא כירורגיים בחיטוי.
2. נקו את שולחן הניתוחים עם 70% אתנול וחממו כרית חימום ל-37 מעלות צלזיוס.
3. הניחו את כרית החימום על שולחן הניתוחים וכסו אותה בווילונות כירורגיים סטריליים.
   הערה: בכל הליכי ההישרדות, טכניקת "ללא מגע" משמשת כאן לשמירה על סטריליות.

2. הכנת בעלי חיים וביצוע כריתת למינקטומיה בעמוד השדרה T9-T10

1. רכש עכברים זכרים בוגרים (Balb/c) בני 10 שבועות. יש להשרות הרדמה בכל בעל חיים באמצעות משאף, החל מאיזופלורן של 5% ולאחר מכן לרדת ל-2-3% כדי לשמור על טשטוש למשך שארית ההליכים.
2. אשר הרדמה מלאה על ידי אי תגובה לגירוי כאב המושרה על ידי צביטת זנב/כף.
3. גלחו את השיער מעל הגב (מכף רגל ועד ראש) בעזרת קוצץ חשמלי, ולאחר מכן מרחו את קרם האפילציה (3 דקות) כדי להסיר את השיער שנותר. לבסוף, שטפו את הגב במים זורמים/קרצוף רטוב והחזירו את בעלי החיים לכלובים שלהם.
   הערה: זה הכרחי כדי למנוע גירוי נוסף בעור וזיהום כימי בזמן פציעה בעור
4. }למחרת, יש למרוח משחת עיניים על הקרניות כדי להגן על העיניים מפני התייבשות במהלך ההליך הכירורגי. לאחר מכן, שפשפו את העור עם 3 תכשירים אלטרנטיביים של פילינג בטדין ואתנול 70%.
5. בעזרת אזמל, בצע חתך בעור (~1.0-1.5 ס"מ) לאורך קו האמצע בגב ברמה של חוליות T8-T12.
   הערה: רמת החוליות מזוהה על ידי ספירה לאחור של החוליה מ-T13 באמצעות מיקום הצלעות הצפות המתאימות לחוליה T13.
6. נקה את רקמת השומן התת עורית כדי לגשת לשרירי עמוד השדרה, ולאחר מכן נתח אותם לאט כדי לחשוף את התהליכים הקוצניים והלמינה משני הצדדים.
   הערה: בצע הליך זה בזהירות רבה כדי למנוע דימום עודף או פגיעה בחוט השדרה בשלב זה.
7. בצע כריתת למינקטומיה כדי לחשוף את חוט השדרה (חוליות T9-T10) על ידי קילוף עדין של למינה עמוד השדרה באמצעות מלקחיים מיקרו-ניתוחים.
   הערה: בצע את כריתת הלמינקטומיה כך שעודף של חוט השדרה ייחשף כדי להקל על יצירת הפציעה. בקבוצת הביקורת מבוצעת רק כריתת הלמינקטומיה.

3. ביצוע פגיעה מלאה בחוט השדרה T9-T10 (SCI)

1. {{}} באמצעות מלקחיים, אבטח את עמוד השדרה ב-T8 והרם כדי להגזים את עקמומיות עמוד השדרה.
2. בעזרת מספריים עדינים, חתכו את חוט השדרה בין חוליית T9 ו-T10 עד לרצפת תעלת החוליה כדי להבטיח חתך מלא.
3. לאחר התבוננות בחתך המלא תחת מיקרוסקופ כירורגי, יש למרוח חתיכת שומן תת עורי על אתר כריתת הלמינקטומיה כדי לספק הגנה נוספת לחוט השדרה לפני סגירת אתר הניתוח.
4. לבסוף, סגור את הפצע ותפר את השרירים הפרה-חולייתיים ואת הפאשיה השטחית באמצעות תפרים רציפים, ולאחר מכן סגור את העור באמצעות קליפסים לתפרים.
5. לאחר SCI, התבונן בתנועת המעיים למחרת; עם זאת, נהל את שלפוחית השתן על ידי פינוי ידני של שלפוחית השתן.
   הערה: ניתן להשתמש בסולם עכבר הבאסו (BMS) כדי לעקוב אחר התקדמות ההתאוששות התפקודית של הגפיים האחוריות לאחר SCI ביום השני ולאחר מכן מדי שבוע.