שיטת ניקוי רקמות הידרופובית לדגימת רקמת מוח של חולדה

במאמר זה

תקציר

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

מקור: Kirchner, K.N., et al., שיטה לניקוי רקמות הידרופוביות לרקמת מוח של חולדות. J. Vis. Exp. (2020).

סרטון זה מדגים את השיטה לניקוי רקמות הידרופוביות של דגימת רקמת מוח של חולדה. הדגימה מיובשת ברצף במתנול, מטופלת בתערובת דיכלורומתאן ומתנול להמסת שומנים ופיגמנטים, ומועברת לאתר דיבנזיל לניקוי רקמות מלא, המאפשר הדמיה מפורטת ללא חתך דק.

פרוטוקול

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

כל ההליכים הכוללים דגימות של בעלי חיים נבדקו ואושרו על ידי ועדת הביקורת האתית המתאימה לבעלי חיים.

1. ניקוי רקמות

דגור הדגימה בתמיסת מים נטולת יונים של 20% מתנול / 80% למשך שעה אחת בטמפרטורת החדר (RT).
דגרו את הדגימה בתמיסת מים נטולת יונים של 40% מתנול / 60% למשך שעה אחת ב-RT.
דגרו את הדגימה בתמיסת מים נטולת יונים של 60% מתנול / 40% למשך שעה אחת ב-RT.
דגרו את הדגימה בתמיסת מים נטולת יונים של 80% מתנול / 20% למשך שעה אחת ב-RT.
דגרו את הדגימה ב-100% מתנול למשך שעה אחת ב-RT.
דגירה ב-100% מתנול טרי למשך הלילה ב-RT.
דגירה ב-66% דיכלורומתאן (DCM)/ 33% מתנול למשך 3 שעות, עם טלטול, ב-RT.
דגירה באתר דיבנזיל (DBE) ללא טלטול. השאירו את הדגימה ב-DBE עד לניקוי ואחסן ב-DBE עד להדמיה.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה

שם

חברה

מספר קטלוג

הערות

DBE

Sigma-Aldrich

108014-1KG

DCM

Sigma-Aldrich

270997-100mL

מתנול

סיגמא-אולדריץ'

34860-1l-R

הדפסות חוזרות והרשאות

בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה

בקש הרשאה

מאמרים קשורים