שיטת ניקוי רקמות הידרופובית לדגימת רקמת מוח של חולדה

תקציר

מקור: Kirchner, K.N., et al., שיטה לניקוי רקמות הידרופוביות לרקמת מוח של חולדות. J. Vis. Exp. (2020).

סרטון זה מדגים את השיטה לניקוי רקמות הידרופוביות של דגימת רקמת מוח של חולדה. הדגימה מיובשת ברצף במתנול, מטופלת בתערובת דיכלורומתאן ומתנול להמסת שומנים ופיגמנטים, ומועברת לאתר דיבנזיל לניקוי רקמות מלא, המאפשר הדמיה מפורטת ללא חתך דק.

פרוטוקול

כל ההליכים הכוללים דגימות של בעלי חיים נבדקו ואושרו על ידי ועדת הביקורת האתית המתאימה לבעלי חיים.

1. ניקוי רקמות

1. דגור הדגימה בתמיסת מים נטולת יונים של 20% מתנול / 80% למשך שעה אחת בטמפרטורת החדר (RT).
2. דגרו את הדגימה בתמיסת מים נטולת יונים של 40% מתנול / 60% למשך שעה אחת ב-RT.
3. דגרו את הדגימה בתמיסת מים נטולת יונים של 60% מתנול / 40% למשך שעה אחת ב-RT.
4. דגרו את הדגימה בתמיסת מים נטולת יונים של 80% מתנול / 20% למשך שעה אחת ב-RT.
5. דגרו את הדגימה ב-100% מתנול למשך שעה אחת ב-RT.
6. דגירה ב-100% מתנול טרי למשך הלילה ב-RT.
7. דגירה ב-66% דיכלורומתאן (DCM)/ 33% מתנול למשך 3 שעות, עם טלטול, ב-RT.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה

שם	חברה	מספר קטלוג	הערות
DBE	Sigma-Aldrich	108014-1KG
DCM	Sigma-Aldrich	270997-100mL
מתנול	סיגמא-אולדריץ'	34860-1l-R

}}