Method Article

הדמיית פוליזומים שבודדו ממוח של עכבר באמצעות מיקרוסקופ כוח אטומי

May 29th, 2025

In This Article

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Source: Lunelli, L., et. al. הצצה בפוליזומים במוח עם כוח אטומי מיקרוסקופיה. J. Vis. Exp.(2016).

סרטון זה מדגים הדמיה של פוליזומים באמצעות מיקרוסקופ כוח אטומי. יריעת נציץ מצופה יוני ניקל מעגנת RNA עם ריבוזומים מחוברים. הדגימה נשטפת, מיובשת ומותקנת על במת המיקרוסקופ. קצה השלוחה סורק את פני הדגימה, רושם סטיות לייזר כדי למפות את הטופולוגיה. תוכנה משמשת לתיקון עיוותים ולהמחשת מבני פוליזום ברזולוציה גבוהה.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

זהירות: כדי למנוע פירוק RNA של הדגימות, הכינו את כל המאגרים באמצעות מים שטופלו ב-DEPC כדי למזער את זיהום ה-RNase. ....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

figure-results-1

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
CycloheximideSigma1810הכנה של lysate
DNAseIThermo Scientific89836הכנה של ליזאט
RiboLock RNAse InhibitorLife technologiesEO-0381prepararation of lysate
DEPCSigma40718prepararation of lysate
Triton X100סיגמאT8532הכנה של lysate
DTTSigma43815הכנה של ליזאט
נתרן דאוקסיכולאטSigmaD6750הכנה של ליזאט
microcentrifugeEppendorf5417Rהכנה של ליזאט
SucroseSigmaS5016הכנת שיפוע סוכרוז
Ultracentrifugeבקמן קולטראופטימה LE-80Kצנטריפוגה של שיפוע סוכרוז
רוטור אולטרה-צנטריפוגהבקמן קולטרSW 41 Tiצנטריפוגה של שיפוע סוכרוז
צינור פוליאלומרבקמן קולטר331372Sucrose צנטריפוגה הדרגתית
Density Gradient Fractionation SystemTeledyne Isco67-9000-176פיצול שיפוע סוכרוז
AFMAsylum ResearchCypherהדמיה פוליסומית

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Atomic Force MicroscopyPolysome ImagingMouse Brain TissueRNA Ribosome ComplexMica Sheet CoatingCantilever Tip ScanningLaser Deflection DetectionImage Acquisition SoftwareNanoscale Resolution ImagingSample Preparation Protocol

Related Articles