הדמיית מוח

מקור: Provenzano, G., et al. ויזואליזציה אימונוהיסטוכימית של פעילות נוירונים בהיפוקמפוס לאחר למידה מרחבית במודל עכבר של הפרעות נוירו-התפתחותיות. J. Vis. Exp. (2015)סרטון זה מדגים הדמיה אימונוהיסטוכימית כדי להמחיש הפעלה עצבית בהיפוקמפוס. חלקי מוח מוכתמים חושפים אזורים כהים יותר תחת מיקרוסקופ שדה בהיר, מה שמעיד על נוירונים מופעלים.

מקור: } גלנצ'יק-צ'אן, א., ואחרים. הדמיית תהודה מגנטית תפקודית (fMRI) של קליפת המוח הראייתית עם גירוי רטינוטופי בתצוגה רחבה. J. Vis. Exp. (2023). הסרטון מדגים דימות תהודה מגנטית תפקודי (fMRI) של קליפת המוח הראייתית כדי למפות פעילות בהתבסס על רמות החמצון בדם. תמונות MRI מבניות נרכשות כהפניות אנטומיות, ולאחר מכן סריקות fMRI. גירויים חזותיים מוצגים כדי להפעיל נוירונים רטינוטופיים בקליפת המוח הראייה. דרישת האנרגיה המוגברת של נוירונים מגורים אלה מניעה את זרימת הדם המחומצן, מפחיתה דאוקסיהמוגלובין...

מקור: }Wang, J., . הדמיה של העצב האימונוריאקטיבי של פפטיד הקשור לגן קלציטונין של הגולגולת של חולדה עם אימונופלואורסצנציה ומעקב עצבי. J. Vis. exp. (2021). }סרטון זה מדגים שיטה להתחקות אחר מקורותיהם של נוירונים חושיים בדורה מאטר באמצעות מיקרוסקופ פלואורסצנטי. עוקב רטרוגרדי מוחדר לדורה מאטר החשוף של חולדה מורדמת. העוקב נקלט על ידי אקסונים עצביים חושיים ונוסע לאחור לגופי התאים שלהם בתוך הגנגליון הטריגמינלי וגרעיני השורש הגבי הצווארי. לאחר מכן הגנגליונים נחתכים, מוכתמים בנוגדנים המסמנים את העוקב...

מקור: Sabado, V.., et al., Nagoshi, E. הדמיה חיה פלואורסצנטית ברזולוציה של תא בודד של }Drosophila שעונים צירקדיים במוח הזחל תרבות. J. Vis. exp. (2018). } סרטון זה מדגים את ההליך להטמעת המוח }{{}}} במטריצת פיברין, ואחריו הדמיה פלואורסצנטית בהילוך מהיר של תאי עצב בשעון הביולוגי כדי לנתח פעילות קצבית המסונכרנת עם מחזורי אור/חושך.

מקור: } בנקרופט, א.א., . כימות Ca ספונטני2+{{}} שטפים והשפעותיהם במורד הזרם בתאי עצב ראשוניים במוח התיכון של עכבר. J. Vis. exp. (2020){{}}{{TAG_ 46}}סרטון זה מדגים את ההדמיה בזמן אמת של זרימת סידן בתאי עצב גחוניים במוח התיכון שמקורם בעוברי עכברים. באמצעות וקטור ויראלי כדי לבטא אינדיקטור סידן, הנוירונים מצולמים תחת מיקרוסקופ קונפוקלי כדי לעקוב אחר שינויים בעוצמת הקרינה במהלך פעילות סידן ספונטנית ומושרה על ידי נוירוטרנסמיטרים.

מקור: Calvo-Rodríguez, et al. דימות פלואורסצנטי וביו-לומינסנציה של Ca תת-תאי2+ בנוירונים היפוקמפוס מזדקנים. J. Vis. exp.} (2015). סרטון זה מדגים את השימוש בהדמיה פלואורסצנטית למדידת רמות סידן ציטוזולי בתרביות היפוקמפוס של חולדות לטווח קצר וארוך. על ידי השוואה בין נוירונים צעירים ומבוגרים, הוא מדגיש כיצד צפיפות מוגברת של תעלות סידן מגודרות מתח מסוג L והפעלה ממושכת בתאי עצב מזדקנים גורמים לעומס יתר של סידן, סימן היכר של הזדקנות עצבית. אינדיקטורים לסידן פלואורסצנטי חושפים את ההבדלים הללו באמצעות...

מקור: Reindl, V., {{}}. ביצוע ניסויי היפר-סריקה עם ספקטרוסקופיה פונקציונלית של אינפרא אדום קרוב. J. Vis. Exp. (2019), } סרטון זה מדגים את השימוש בספקטרוסקופיה תפקודית כמעט-אינפרה-אדום (fNIRS) כדי למדוד פעילות מוחית במהלך אינטראקציות חברתיות. המשתתפים עוסקים במשימה מתואמת שמגבירה את הפעילות בקליפת המוח הקדם-מצחית, אזור קריטי להתנהגות חברתית, בזמן שהמערכת מזהה שינויים בספיגת האור עקב חמצון הדם. על ידי ניתוח הסנכרון של פעילות המוח בין המשתתפים, המחקר מעריך את הדינמיקה העצבית העומדת בבסיס...

התחל עם מטופל שאובחן עם מפרצת מוחית, מצב שבו כלי הדם במוח בולטים ומתמלאים בדם. אבטח את ראשו של המטופל בתוך סליל הראש של מכשיר MRI. התחלת הדמיה. המערכת מייצרת שדה מגנטי חזק, המיישר פרוטונים ברקמת המוח לכיוונה. התחל את הד השיפוע המהיר המוכן על ידי מגנטיזציה או רצף MPRAGE על ידי הפעלת פולס תדר רדיו הפוך, היפוך יישור הפרוטונים מול השדה המגנטי. כאשר הפולס נעצר, הפרוטונים חוזרים בהדרגה ליישור המקורי שלהם עם השדה המגנטי באמצעות הרפיית T1, ופולטים אותות אלקטרומגנטיים במהלך התהליך. פרוטונים בדם זורם,...

פגיעה מוחית טראומטית, או TBI, פוגעת בזרימת הדם לאזורים שנפגעו ומשבשת את הפעילות של תאי עצב דופמינרגיים. כדי לחקור שיבושים הקשורים ל-TBI, התחילו בהזרקה תוך ורידית של עוקב רדיואקטיבי ליפופילי למטופל. העוקב עובר דרך כלי המוח ומתפזר לתאים של רקמת המוח בקליפת המוח והתת-קורטיקלית. בצע טומוגרפיה ממוחשבת של פליטת פוטון בודד, או SPECT, כדי לזהות את הקרינה הנפלטת על ידי העוקב. עוצמת האות המתקבלת בכל מיקום תואמת ישירות לרמת זרימת הדם האזורית במוח. אזורים במוח שמושפעים מ-TBI מייצרים עוצמת אות נמוכה יותר...

Source: Wiegreffe, C., et. al., הדמיה קונפוקלית של נוירונים נודדים בתרבית פרוסה אורגנוטיפית של מוח עכבר עוברי באמצעות In Utero Electroporation. J. Vis. Exp. (2017) סרטון זה מדגים מיקרוסקופיה קונפוקלית של זמן-lapse כדי לצפות בנדידה רדיאלית של נוירונים בקליפת המוח מהאזור התת-חדרי לצלחת קליפת המוח באמצעות פיגומי גליה רדיאליים בפרוסות מוח עובריות של עכבר.

מקם את ראשו של משתתף אנושי בתוך סליל הראש של מערכת הדמיית תהודה מגנטית פונקציונלית, או fMRI. השתמש בתפוסת חלל כלי הדם או VASO, טכניקה למדידת שינויים בנפח הדם המוחי, או CBV, נפח הדם בתוך המוח. התחל בהפעלת דופק התאוששות היפוך כדי לדכא אותות מהדם, מה שמאפשר לזהות רק אותות מהרקמה שמסביב באזור. לאחר מכן, השתמש באוזניות תואמות MRI כדי לספק גירויים שמיעתיים. הגירויים מגיעים לקליפת המוח השמיעתית, אזור המוח האחראי על עיבוד מידע שמיעתי, ומגרים את הנוירונים. הנוירונים המגורים מגבירים את דרישת החמצן...

מקור: Schott, J. T., . הכנת תרביות אב של אוליגודנדרוציטים של חולדות וכימות של אוליגודנדרוגנזה באמצעות סריקת פלואורסצנציה אינפרא אדום כפולה. J. Vis. exp. (2016). }סרטון זה מדגים את השימוש בהדמיה פלואורסצנטית כפולה כדי להעריך את ההתמיינות של אוליגודנדרוציטים מתאי מבשר (OPCs) שבודדו ממוח של גור חולדות. התהליך כולל קיבוע התאים, תיוג סמנים ספציפיים עם נוגדנים משניים ראשוניים ומצומדים פלואורופור, והדמיה שלהם באמצעות הדמיה פלואורסצנטית. מזוהים אוליגודנדרוציטים מובחנים המבטאים הן את החלבון הבסיסי של...

מקור: Upputuri, P. K., et al. מערכת טומוגרפיה פוטואקוסטית קומפקטית בעלת ביצועים גבוהים עבור In Vivo הדמיית מוח של בעלי חיים קטנים. J. Vis. Exp. (2017)סרטון זה מדגים פרוטוקול להדמיית מוח חולדה לא פולשנית in vivo באמצעות טומוגרפיה פוטואקוסטית, המציג את ההכנה, הגדרת מערכת ההדמיה ורכישת הנתונים לשחזור תמונות מוח דו-ממדיות להדמיית מבני כלי דם ובריאות נוירו-וסקולרית.

מקור: Shimojo, H., et al. הדמיה ביולומינסנציה בזמן אמת של דינמיקת איתות חריץ במהלך נוירוגנזה של עכברים. J. Vis. Exp. (2019)בסרטון זה, תרביות פרוסות קליפת המוח מעוברי עכברים טרנסגניים משמשות לניטור ביטוי גנים באמצעות הדמיה תלת מימדית. תמונות ביולומינסנציה, פלואורסצנטיות ושדה בהיר משמשות להמחשת ביטוי גנים בזמן אמת במהלך התמיינות עצבית בתוך הרקמה הטבעית.

מקור: Jamadar, S. et al. מינהל רדיו-טריסר לטומוגרפיה של פליטת פוזיטרונים ברזולוציה טמפורלית גבוהה של המוח האנושי: יישום ל-FDG-fPET. J. Vis. Exp. (2019)סרטון זה מדגים את כימות חילוף החומרים של גלוקוז במוח באמצעות טומוגרפיה של פליטת פוזיטרונים (PET). המשתתף מוזרק לעוקב F-18 fluorodeoxyglucose (FDG) במהלך הסריקה. FDG מצטבר בתאי עצב פעילים ופולט פוזיטרונים עם דעיכת F-18. פוזיטרונים אלה מקיימים אינטראקציה עם אלקטרונים, ומייצרים פוטונים שזוהו על ידי סורק ה-PET כדי ליצור מפות פעילות מוחית ברזולוציה...

מקור: Delalande, J., et.al. תיוג כפול של תאי פסגה עצבית וכלי דם בתוך עוברי עוף באמצעות השתלת צינור עצבישל אפרוח GFP והזרקת צבע קרבוציאנין DiI. J. Vis. Exp. (2015)סרטון זה מדגים השתלה של צינור עצבי תורם המסומן ב-GFP מעובר עוף טרנסגני מותאם שלב לעובר מקבל ברמה של סומיטים 1 עד 7, ולאחר מכן תיוג כלי דם באמצעות צבע פלואורסצנטי ליפופיל. הגישה המשולבת מאפשרת הדמיה ישירה של העובר תחת מיקרוסקופ סטריאופלואורסצנטי, ומאפשרת לחקור את אינטגרציית השתלים העצביים והתפתחות רשת כלי הדם בביצה.

מקור: Zheng, W. et al., דיפוזיה טנזור הדמיית תהודה מגנטית בדחיסת חוט השדרה הכרונית. J. Vis. Exp. (2019)סרטון זה מדגים הדמיית טנזור דיפוזיה בהערכת דחיסה כרונית של חוט השדרה. על ידי ניתוח דפוסי דיפוזיה של מים, אניזוטרופיה חלקית וערכי מקדם דיפוזיה לכאורה, הממצאים חושפים נזק אקסונלי באזורים דחוסים. הממצאים מספקים תובנות קריטיות לגבי פתולוגיה של חוט השדרה ושלמות מבנית.

מקור: Fowler, B. E., et al. הדמיית סידן in vivo של תגובות נוירונים גנגליון גנגליון של עכבר לגירוי טעם. J. Vis. Exp. (2021) סרטון זה מדגים פרוטוקול להעברת טעמים לגנגליון הגניקולט שנחשף בניתוח בעכבר מורדם ושימוש בפלואורסצנטיות GCaMP עם מיקרוסקופיה אפיפלואורסצנטית כדי להמחיש תגובות עצביות בזמן אמת, ומסייע למחקרים על עיבוד אותות טעם היקפי.

מקור: Blanc, J., et al. ספקטרוסקופיה של תהודה מגנטית פונקציונלית ב-7 T בקליפת המוח של חבית החולדה במהלך הפעלת השפם. J. Vis. Exp. (2019)סרטון זה מדגים את השיטה לניתוח שינויים מטבוליים בקליפת חבית החולדה באמצעות ספקטרוסקופיה תהודה מגנטית תפקודית במהלך גירוי שפם. ספקטרום מטבוליט בסיסי מושווה לספקטרום מגורה כדי לזהות עלייה בלקטט בקליפת החבית, מה שמאשר הפעלה עצבית מוצלחת.

מקור: Villarreal, S., et. al., מדידת אנדוציטוזיס שלפוחית סינפטית בנוירונים בהיפוקמפוס מתורבתים. J. Vis. Exp. (2017)סרטון זה מדגים את הניתוח של אנדוציטוזיס שלפוחית סינפטית בתאי עצב בהיפוקמפוס מתורבתים באמצעות תיוג פרוקסידאז חזרת ומיקרוסקופ אלקטרונים.

מקור: Becker-Kojić, Z. A., et. al., ייצור ללא GM של תאי עצב שמקורם בדם. J. Vis. Exp. (2021)הסרטון מדגים פרוטוקול להכנת תאים עצביים שמקורם בתאי דם היקפיים מתוכנתים מחדש למיקרוסקופיה פלואורסצנטית, המציג סוגי תאים שונים ושלבי התפתחות באמצעות הדמיה אימונופלואורסצנטית.

מקור: McLeod, F., et al. הערכת צפיפות הסינפסה בפרוסות מוח של מכרסמים בהיפוקמפוס. J. Vis. Exp. (2017). סרטון זה מדגים שיטה להמחשת סמנים סינפטיים בפרוסות מוח בהיפוקמפוס באמצעות ניתוח אימונופלואורסצנטי קונפוקלי. הפרוסות מוכתמות במערכת החיסון בנוגדנים ראשוניים המכוונים לסמנים פרה-סינפטיים ופוסט-סינפטיים, ואחריהם נוגדנים משניים מצומדים פלואורופור. הסמנים המסומנים מוצגים לאחר מכן באמצעות מיקרוסקופיה קונפוקלית כדי להעריך את הארכיטקטורה הסינפטית באמצעות הקו-לוקליזציה שלהם.

מקור: Lerchundi, R., et. al. הדמיה של ATP תוך-תאי בפרוסות רקמה אורגנוטיפיות של מוח העכבר באמצעות חיישן מבוסס FRET ATeam1.03YEMK. J. Vis. Exp. (2019)סרטון זה מדגים את השימוש בחיישנים מבוססי FRET (העברת אנרגיה בתהודה פלואורסצנטית) למדידת רמות ATP תוך-תאיות בפרוסות היפוקמפוס אורגנוטיפיות של עכבר, מה שמאפשר הדמיה בזמן אמת של דינמיקת ATP בתאי עצב ואסטרוציטים בתנאים פיזיולוגיים וניסיוניים.

מקור: Espinoza, R., et al. הדמיית פיזור רמאן מגורה בשני צבעים בזמן אמת של מוח עכבר לצורך אבחון רקמות. J. Vis. exp. (2022). הסרטון מדגים הדמיית פיזור רמאן מגורה בשני צבעים (SRS) של מקטעי רקמת מוח של עכבר. שתי קרני לייזר מסונכרנות מכוונות אל קטע הרקמה כדי לעורר תנודות מולקולריות, וכתוצאה מכך שינוי עוצמה יחסי בקרניים. שומנים וחלבונים ברקמה מתגלים באמצעות זוגות תדרים מובחנים של קרני הלייזר. לאחר מכן מוקצים לאותות המתקבלים צבעים נפרדים, ויוצרים תמונה דו-צבעונית המסייעת בזיהוי החלבונים והשומנים...

מקור: Olesen, M. V., et al. טכניקת המפרק האופטי להערכת מספרי תאים במודל חולדה של טיפול בנזעי חשמל. {{}}J. Vis. exp. (2017). הסרטון מדגים את הטכניקה לכימות נוירונים חדשים שנוצרו ברקמת המוח. פרוסות רקמת ההיפוקמפוס המכילות נוירונים המסומנים בברומודוקסיורידין (BrdU) נצבעו באמצעות אימונוהיסטוכימיה ולאחר מכן כומתו על פני עובי הרקמה באמצעות טכניקת המפרק האופטי.

מקור: Guan, W., et. al. הדמיה Drosophila Leg motor neuroon axons דרך הציפורן הבוגרת. J. Vis. Exp. (2018) סרטון זה מדגים הדמיה שלDrosophila רגליים עם נוירונים מוטוריים ירוקים המבטאים חלבון פלואורסצנטי באמצעות מיקרוסקופיה קונפוקלית. לייזר ושני גלאים לוכדים GFP ואוטו-פלואורסצנטיות של הציפורן. התמונות מעובדות על-ידי פיצול ערוצים, הפחתת אוטו-פלואורסצנטיות ומיזוג לתמונה מורכבת צבעונית כדי להמחיש אקסונים בתוך מקטע הרגליים.

מקור: Lauer, S. M., et al. ויזואליזציה של מודולים קליפת המוח בקליפות יונקים שטוחות. J. Vis. Exp. (2018) סרטון זה מדגים שיטה להמחשת המודולים בקליפת המוח בחלקי מוח שטוחים באמצעות צביעה היסטוכימית. קטעים קבועים מראש מטופלים במגיב מאמץ המדגיש אשכולות עצביים פעילים, ויוצר אזורים כהים בעלי ניגודיות גבוהה. לאחר הרכבה והתייבשות, מודולים בקליפת המוח מופיעים תחת מיקרוסקופ שדה בהיר כדפוסים כהים וטלאים.

מקור: Hidmark, A. S., et al. ניתוח של תאים חיסוניים בעצבים סיאטיים בודדים ובגנגליון שורש הגב מעכבר בודד באמצעות ציטומטריית זרימה. J. Vis. exp.{{TAG_ 27}} (2017). }סרטון זה מדגים את השימוש בזרימה ציטומטרית לניתוח תאי חיסון בעצבים סיאטיים של עכברים ובגרעיני שורש גב (DRGs). התהליך כולל תיוג תאים חיסוניים עם נוגדנים מתויגים פלואורופור וביוטין, ייצוב וחדירה של התאים, ושימוש בסמנים פלואורסצנטיים כדי לזהות מאפיינים של פני התא והגרעין. הטכניקה מאפשרת הערכה כמותית של הטרוגניות של תאי מערכת החיסון...

מקור: Morsch, M., et. al., הפעלת מתח ומוות של תאים באמצעות מיקרוסקופיה קונפוקלית של לייזר UV קונבנציונלית. J. Vis. Exp. (2017) בסרטון זה, אנו בוחנים את הטכניקה של אבלציה בלייזר UV בעוצמה גבוהה למיקוד מדויק ולימוד של נוירונים בודדים בדג זברה טרנסגני. אנו מדגימים כיצד להכין, לשתק ולדמיין תגובות עצביות, תוך הדגשת הדינמיקה התאית של פציעה והתאוששות.

Source: Lunelli, L., et. al. הצצה בפוליזומים במוח עם כוח אטומי מיקרוסקופיה. J. Vis. Exp.(2016).סרטון זה מדגים הדמיה של פוליזומים באמצעות מיקרוסקופ כוח אטומי. יריעת נציץ מצופה יוני ניקל מעגנת RNA עם ריבוזומים מחוברים. הדגימה נשטפת, מיובשת ומותקנת על במת המיקרוסקופ. קצה השלוחה סורק את פני הדגימה, רושם סטיות לייזר כדי למפות את הטופולוגיה. תוכנה משמשת לתיקון עיוותים ולהמחשת מבני פוליזום ברזולוציה גבוהה.

מקור: Kimmelmann-Shultz, B., et. al. שימוש בקרינה קרובה לאינפרא-אדום וסריקה ברזולוציה גבוהה למדידת ביטוי חלבון במוח המכרסמים. J. Vis. Exp. (2019) סרטון זה מדגים פלואורסצנציה קרובה לאינפרא-אדום ושיטת סריקה ברזולוציה גבוהה למדידת ביטוי חלבון במוח המכרסם.

מקור: Hamid, H. S., {{}}. הדמיה תלת מימדית וניתוח של מיטוכונדריה בתוך סיבי עצב תוך-אפידרמיסיים אנושיים. }J. Vis. exp. (2017)} } סרטון זה מדגים את השיטה להמחשת מיטוכונדריה ספציפית לעצב באמצעות הדמיה תלת מימדית. הוא מתאר את התהליך של רכישת סריקות עוקבות של סיבי עצב תוך-אפידרמיסיים מסומנים מראש ויצירת תמונות פני שטח תלת מימדיות כדי לבודד ולהציג מיטוכונדריה ביחס למבני עצבים.

מקור: Mukherjee, K., et. al. ניתוח המיטוכונדריה במוח באמצעות מיקרוסקופ אלקטרונים סריקת פנים סדרתית. J. Vis. exp. (2016){סרטון זה מדגים את ההכנה, הדמיה וניתוח של רקמת מוח של עכבר באמצעות מיקרוסקופ אלקטרונים סורק בלוק-פנים סדרתי (SBFSEM) כדי להמחיש אולטרה-מבנה מיטוכונדריאלי, המאפשר מיפוי מדויק של המורפולוגיה וההתפלגות המרחבית שלהם בתאים עצביים אקסונליים ודנדריטיים.

מקור: Laboissonniere, et. al. רצף RNA של תא בודד של תת-קבוצות מוגדרות של תאי גנגליון ברשתית. J. Vis. exp.{{}} (2017). }סרטון זה מדגים טכניקת מעקב פלואורסצנטית לזיהוי תת-סוגים של תאי גנגליון ברשתית (RGC) ברשתית של עכבר טרנסגני. התהליך כולל אבטחת הרשתית המבודדת בתא הקלטה, שמירה על כדאיות התא עם זלוף מחומצן, והתמקדות ב-RGCs עם תווית פלואורסצנטית באמצעות פיפטה עם עוקב. על ידי ניתוח מורפולוגיה וריבוד דנדריטי, השיטה מאפשרת סיווג של תת-סוגים מובהקים של RGC.

קח קטע קבוע של רקמת מוח קליפת המוח של עכבר המציג אקסונים עצביים ודנדריטים. לדנדריטים יש בליטות, הידועות כקוצים דנדריטיים, היוצרות סינפסות עם אקסונים. דגרו על הרקמה עם אוסמיום-פרוציאניד, הנקשר לשומנים, ואחריו מריחת אוסמיום נוספת, המשפרת את הניגודיות המבנית להדמיה. מכתים בתרכובת מתכת כבדה הנקשרת למקרומולקולות ומשפרת את הניגודיות. התייבש באמצעות הגדלת ריכוזי אלכוהול להטמעת שרף. הטמע את הרקמה בשרף, הרכיב אותה על מחזיק וצפה אותה בזהב כדי לייעל את איכות ההדמיה. השתמש במיקרוסקופ אלקטרונים סורק קרן...

מקור: Mizuno, H., et al. In Vivo הדמיה דו-פוטונית של נוירונים בקליפת המוח בעכברים יילודים. J. Vis. פקיעה. (2018)סרטון זה מציג מיקרוסקופיה דו-פוטונית המשמשת להדמיית נוירונים במוחו של גור עכבר טרנסגני מורדם. הלייזר הדו-פוטוני מאפשר הדמיה עמוקה יותר עם רזולוציה מרחבית גבוהה ופיזור אור מינימלי, המאפשר לכידה מפורטת של מורפולוגיה עצבית, כולל הקרנות דנדריטיות.

מקור: Lark, A. R., et. al., In vivo Functional Brain Imaging Approach המבוסס על אינדיקטור סידן ביולומינסנט GFP-aequorin. J. Vis. Exp. (2016)סרטון זה מדגים הדמיה בזמן אמת של דינמיקת סידן באמצעות חלבון פלואורסצנטי ירוק-aequorin bioluminescence ב Drosophila's מבני מוח עמוקים.

מקור: Muto, A., . אבלציה של אוכלוסייה עצבית באמצעות לייזר דו-פוטוני והערכתה באמצעות הדמיית סידן ורישום התנהגותי בזחלי דג זברה. J. Vis. exp. (2018)} } בסרטון זה, מודגם הליך אבלציה בלייזר דו-פוטוני, המאפשר הרס סלקטיבי של נוירונים פלואורסצנטיים בזחלי דג זברה משותקים באגרוז. הדמיה ברזולוציה גבוהה לפני ואחרי ההליך מאשרת נזק עצבי יעיל, כפי שנצפה בהיעדר פלואורסצנטיות.

מקור: Winkle, C. C., et al. שימוש במתודולוגיות משולבות להגדרת תפקיד אספקת קרום הפלזמה במהלך הסתעפות אקסון ומורפוגנזה עצבית. J. Vis. Exp. (2016)סרטון זה מדגים טכניקת הדמיה חיה באמצעות מיקרוסקופ ניגודיות הפרעות דיפרנציאלית (DIC) כדי לצפות בהסתעפות אקסונלית בזמן אמת בנוירונים בקליפת המוח. סרטוני זמן-lapse לוכדים את ההשפעות של טיפול ב-netrin-1, מולקולת איתות הגורמת לאקסוציטוזיס מקומי וסידורים מחדש של שלד התא באקסונים. תהליכים אלה יוזמים בליטות ממברנה, המתפתחות לענפים אקסונליים בוגרים, ומספקים...

מקור: Zhilyakov, N. V. et al., רישום מעברי סידן בצומת עצבי-שרירי של עכבר עם רזולוציה זמנית גבוהה באמצעות מיקרוסקופיה קונפוקלית. J. Vis. Exp. (2021)סרטון זה מדגים את טכניקת ההדמיה של הקלטת מעברי סידן מהירים בקצות העצבים באמצעות מיקרוסקופיה קונפוקלית. על ידי גירוי העצב ולכידת שינויים פלואורסצנטיים מצבעים קושרי סידן, הוא מדמיין זרם סידן דינמי ופינוי בקצה העצב, ומציע תובנות מדויקות לגבי פעילות סינפטית ואיתות עצבי-שרירי.

מקור: Ting, C., et al., ניתוח מורפולוגיה דנדריטית בעמודות ושכבות. J. Vis. Exp. (2017)סרטון זה מדגים את ההליך של הכנת מוח דרוזופילה, לכידת ערימות תמונות אופקיות וקדמיות של דנדריטים מדולה עם תווית GFP תחת מיקרוסקופ קונפוקלי, ויצירת שחזור תלת מימדי לניתוח המורפולוגיה שלהם על פני שכבות ועמודות.

מקור: Lacin, E., et al. בניית מדווחים מהונדסים פלואורסצנטיים מבוססי תאים (CNiFERs) לזיהוי אופטי של נוירוטרנסמיטורים in vivo. J. Vis. Exp. (2016)סרטון זה מדגים טכניקה להדמיית שחרור נוירוטרנסמיטר in vivo באמצעות מדווחים מהונדסים פלואורסצנטיים מבוססי תאים (CNiFERs), תאי דיווח מיוחדים שהוזרקו מראש לקליפת העכבר. העכבר ממוקם תחת מיקרוסקופ של שני פוטונים, ומאפשר הדמיה של איתות סידן המושרה על ידי נוירוטרנסמיטר באמצעות פליטת פלואורסצנטיות. השיטה ממנפת קשירת נוירוטרנסמיטורים לקולטנים מצומדים לחלבון G...

מקור: Doser, R., et al. הדמיה תת-תאית של טיפול בסידן עצבי in vivo. J. Vis. Exp. (2023)סרטון זה מדגים הדמיה in vivo של שטף סידן תת-תאי בנוירונים של חוט העצב הגחוני של זני Caenorhabditis elegans טרנסגניים. נעשה שימוש בשני מדדי סידן נפרדים: אינדיקטור ציטופלזמי בזן אחד ואינדיקטור מיטוכונדריאלי באחר. נוירונים נצפים תחת מיקרוסקופ פלואורסצנטי כדי לנטר שינויים בזמן אמת בעוצמת הקרינה בתוך הציטופלזמה העצבית והמיטוכונדריה, המשקפים שטף סידן במהלך פעילות עצבית ספונטנית.

מקור: Gouder, et. al. כימות תלת מימדי של קוצים דנדריטיים מנוירונים פירמידליים שמקורם בתאי גזע פלוריפוטנטיים המושרים על ידי בני אדם. J. Vis. Exp. (2015).סרטון זה מדגים את ההדמיה והניתוח של קוצים דנדריטיים בתאי עצב פירמידליים עם תווית חיסונית באמצעות מיקרוסקופיה קונפוקלית. רעשי הרקע מצטמצמים, והדנדריטים עוקבים על ידי הערכת קוטרם ואורכם. פילוח עמוד שדרה אוטומטי כולל קביעת פרמטרים למידות דנדריט ועמוד שדרה וסיווג עמודי שדרה. מודל תלת מימד נוצר ומיוצא לניתוח.

מקור: Creighton, B. A., et al. הדמיה וניתוח הובלה תוך-תאית של אברונים ומטענים אחרים באסטרוציטים. J. Vis. Exp. (2019)סרטון זה מדגים את ההדמיה של הובלת מטען תוך-תאית באסטרוציטים מתורבתים באמצעות בדיקה חומצתית פלואורסצנטית המסמנת באופן סלקטיבי שלפוחיות אנדוליזוזומליות חומציות. הדמיית זמן-lapse ורכישת Z-stack עם מיקרוסקופ קונפוקלי מאפשרים מעקב אחר מטען עם תווית פלואורסצנטית לאורך נפח התא התלת מימדי. הניתוח מבדיל בין מטען נייח למטען הנע לעבר פריפריית התא או הגרעין, ומספק תובנות לגבי דינמיקת הובלה...

מקור: Katsalifis, A., et al. הדמיה חיה של מצב חמצון חיזור גלוטתיון מיטוכונדריאלי בנוירונים ראשוניים באמצעות אינדיקטור רציומטרי. J. Vis. Exp. (2021)סרטון זה מדגים את ההדמיה של מצב חמצון חיזור מיטוכונדריאלי בתאי עצב ראשוניים באמצעות מחוון פלואורסצנטי רציומטרי. על ידי החלת שני אורכי גל עירור תחת מיקרוסקופ פלואורסצנטי, נמדד יחס עוצמת הקרינה כדי להעריך חמצון מיטוכונדריאלי. הפרוטוקול כולל גירוי N-methyl-D-aspartate (NMDA) כדי לגרום לזרם סידן וייצור מיני חמצן תגובתיים (ROS), ולאחר מכן כיול באמצעות...

מקור: Bagheri, M., et. al. פרוטוקול לניתוח מורפומטרי קונפוקלי תלת מימדי של אסטרוציטים. J. Vis. Exp. (2015).סרטון זה מדגים הדמיה של אסטרוציטים עם תווית פלואורסצנטית בקטע מוח של עכבר באמצעות מיקרוסקופ קונפוקלי. חלק המוח ממוקם תחת עדשת האובייקט המתאימה, ונבחרים פלואורופורים ומסננים מתאימים. לאחר אופטימיזציה של החשיפה באופן אוטומטי, פרמטרי הסריקה מוגדרים כדי להבטיח תמונות דו-ממדיות ברזולוציה גבוהה. פרמטרים של מחסנית Z מוגדרים, ותמונות תלת מימד מתקבלות.

מקור: Weber, R. Z., et al., Intracerebral Transplantation and In vivo Bioluminescence Tracking of Human Neural Prognitor Cells in the Mouse Brain. J. Vis. Exp. (2022)סרטון זה מדגים את השיטה להדמיית ביולומינסנציה in vivo של תאי אב עצביים אנושיים מהונדסים גנטית המוזרקים למוח עכבר. התהליך כולל הזרקת לוציפרין, הכנת הדמיה וזיהוי אותות ביולומינסנט מהתאים המושתלים באתר ההזרקה.

מקור: Bannai, H., et. al., Dissection of Local Ca2+ Signals in Cultures by Membrane-Targeted Ca2+ Indicators. J. Vis. Exp. (2019)הסרטון מדגים הדמיה פלואורסצנטית כדי לצפות בדינמיקת סידן ספונטנית ספציפית לתא באסטרוציטים על ידי ניטור רציף של חלבונים רגישים לסידן הממוקמים על קרום הפלזמה והרטיקולום האנדופלזמי.

מקור: Marinello, M., et al. אפיון צמתים עצביים-שריריים בעכברים על ידי מיקרוסקופיה משולבת קונפוקלית וסופר-רזולוציה. J. Vis. Exp. (2021)סרטון זה מדגים את ההכנה, הצביעה החיסונית וההדמיה של צמתים עצביים-שריריים ברקמת שריר החולדה באמצעות מיקרוסקופיה קונפוקלית וסופר-רזולוציה כדי לדמיין ולנתח מבנים פרה-סינפטיים ופוסט-סינפטיים.

מקור: Chiu, S., et al. הדמיית תהודה מגנטית של ניגוד פאזה בעורק הצוואר המשותף של חולדה. J. Vis. Exp. (2018). סרטון זה מדגים הדמיית תהודה מגנטית של ניגודיות פאזה (PC-MRI) למדידת זרימת הדם בעורק הצוואר המשותף של חולדה. לאחר אבטחת חולדה מורדמת על מיטת ה-MRI והבטחת פרמטרים פיזיולוגיים יציבים, עורק הצוואר המשותף נסרק כדי לצלם תמונות במרווחי זמן מוגדרים. לאחר מכן מחושבת זרימת הדם מהתמונות הללו כדי להעריך שינויים לאורך מחזור הלב.

מקור: Hage, B. D. et. al., אולטרסאונד דופלר טרנס-גולגולתי פונקציונלי לניטור זרימת הדם במוח. J. Vis. exp. (2021)} } סרטון זה מדגים את השימוש באולטרסאונד דופלר כפונקציונאלי כלי הדמיה למדידת מהירות זרימת הדם במוח, או CBFV בזמן אמת. הוא מדגיש כיצד שינויים בתדירות בעורק המוח האמצעי במהלך משימות כמו עצירת נשימה חושפים שינויים ב-CBFV, ומציעים תובנות לגבי פעילות המוח ודינמיקה של כלי הדם.

מקם את ראשו של המטופל בתוך סליל תדר הרדיו, או RF, של מכונת הדמיית תהודה מגנטית, או MRI. התחל את אנגיוגרפיית התהודה המגנטית של זמן הטיסה או TOF MRA, טכניקה לא פולשנית להדמיית כלי דם. בחרו פרוסת רקמה להדמיה כדי להמחיש עורקים וורידים. הפעל פולס RF כדי לעורר את הפרוטונים בתוך פרוסת ההדמיה שנבחרה. פרוטונים אלה משחררים אנרגיה, שמזוהה כאות MR. יישום חוזר ונשנה של פולסי RF מרווה את אות ה-MR מרקמה נייחת, וכתוצאה מכך רקע כהה. דם טרי הזורם לתוך פרוסת ההדמיה מכיל פרוטונים בלתי רוויים שעם עירור RF מייצרים...

חללים פריבסקולריים (PVS) הם חללים מלאים בנוזל סביב כלי הדם במוח המעורבים בניקוז נוזלים. כדי לבחון שינויים ב-PVS במהלך שבץ מוחי בכלי דם קטן, בצע הדמיית תהודה מגנטית (MRI) של אזור גרעיני הבסיס במוח המטופל. פרוטוקול ההדמיה כולל את רצפי הד הספין המהיר המשוקלל T2 והתאוששות היפוך מוחלש נוזל (FLAIR). הדמיה משוקללת T2 משפרת את הניגודיות בין PVS מלא בנוזל המוח השדרתי (CSF) לבין הרקמה שמסביב. FLAIR מדכא את אות ה-CSF, ומאפשר בידול של PVS מאוטמים לקוניים ישנים. הבטח פרמטרי הדמיה מתאימים להדמיה ברזולוציה...

Source: Nishimura, C. et al. כימות של ארכיטקטורת כלי דם מוחיים באמצעות מיקרוסקופיה דו-פוטונית במודל עכבר של דלקת עצבית הנגרמת על ידי HIV. J. Vis. Exp. (2016). סרטון זה מדגים את ההדמיה in vivo של נימים בקליפת המוח במוח העכבר באמצעות מיקרוסקופ דו-פוטוני. הוא מתאר את השלבים להזרקת צבע פלואורסצנטי לעכבר מורדם עם חלון קליפת המוח דק הגולגולת, הכנת ההתקנה להדמיה ורכישת תמונות מפורטות של מבנים מיקרו-וסקולריים במוח לניתוח.

מקם מטופל אנושי עם היצרות קרוטיד פנימית, מצב המאופיין בהיצרות של עורק הצוואר הפנימי, על שולחן ההדמיה לאנגיוגרפיה חיסור דיגיטלית (DSA). הכנס אנגיוקטטר לעורק הצוואר המשותף ברמת החוליה הצווארית הרביעית. צלם תמונת רנטגן לפני ניגודיות כדי לתעד מבני רקע כמו עצמות ורקמות רכות באמצעות קרינת רנטגן. נהל מדיום ניגוד מבוסס יוד לעורק הצוואר. מדיום הניגוד נע באופן אחיד דרך כלי הדם של המוח, ומאפשר הדמיה דינמית של דפוסי זרימה. היוד בתווך סופג קרינת רנטגן, מה שגורם לכלי הדם להיראות בהירים ומוגדרים היטב בעוד...

התחל עם חולה אנושי עם דלקת כלי דם מוחית, הגורמת לדלקת ולחדירות מוגברת של כלי הדם במוח. הנח את ראשו של המטופל בתוך סליל תדר הרדיו, או RF, של מכונת הדמיית תהודה מגנטית, או MRI. ליזום אנגיוגרפיה של תהודה מגנטית, או MRA, המשתמשת בפולסים של RF כדי לדמות את זרימת הדם. פרוטונים בדם זורם מייצרים אותות חזקים, מה שגורם לכלי הדם להיראות בהירים, בעוד שאותות חלשים מרקמות נייחות גורמים לרקע כהה. עברו להדמיית דם כהה משוקללת T1, המשתמשת בפולסי RF היפוכים כדי לדכא אותות מהדם והשומן. פולס RF עוקב מעורר פרוטונים...

מקור: Tan, Z., et al.,{{}} בנייה ויישום של אטלס זרימת דם מוחי מבוסס אזור תפקודי מוחי באמצעות הדמיית תהודה מגנטית-תיוג ספין עורקי. J. Exp. (2024). סרטון זה מדגים את השיטה לבניית אטלס זרימת דם מוחי על ידי שילוב הדמיית תהודה מגנטית או נתוני תיוג ספין של MRI עורקי עם אזורי מוח מפולחים, הדמיית דפוסי זרימת דם וכימות רמות זרימה על פני אזורים תפקודיים.

מקור: Kim, D., et. al. הדמיה פלואורסצנטית קרובה לאינפרא אדום וטומוגרפיה מיקרו-ממוחשבת להדמיה ישירה של טרומבואמבולי מוחי. J. Vis. Exp. (2016)סרטון זה מדגים הדמיה של פקקת מוחית בעכברים באמצעות הדמיית טומוגרפיה מיקרו-ממוחשבת (מיקרו-CT). מודל של עכבר פקקת מוח מוזרק עם ננו-חלקיקי זהב ממוקדי פיברין הפועלים כחומר מנוגד. העכבר מונח על מצע של מכונת מיקרו-CT, והתמונות מתקבלות מזוויות מרובות. באמצעות תוכנה מתאימה, התמונות משוחזרות ומעובדות.

מקור: Giustetto, P., et. al., אולטרסאונד פרנכימלי, כלי דם ומטבולי בתדר גבוה והדמיית מוח עמוקה של חולדה פוטו-אקוסטית. J. Vis. Exp. (2015) בסרטון זה, אנו מדגימים את השימוש באולטרסאונד בתדר גבוה ובהדמיה פוטו-אקוסטית כדי לחקור את כלי הדם ותכולת ההמוגלובין במוח של חולדות. שיטה זו מספקת תובנות מפורטות לגבי זלוף מוחי וחמצון דם, ומאפשרת ניתוח לא פולשני של מבני כלי הדם במוח ופיזור החמצן.

מקור: Kalva, S. K., et al., טומוגרפיה פוטואקוסטית שולחנית מבוססת דיודות לייזר פועמות לניטור שטיפה ושטיפת צבע בכלי דם בקליפת המוח של חולדות. J. Vis. Exp. (2019)סרטון זה מדגים את ההליך לשימוש בהדמיה פוטואקוסטית כדי לצפות בשינויים בכלי קליפת המוח של חולדה מורדמת. התהליך כולל הדמיה בסיסית, הזרקת צבע וניתוח ספיגת צבע ופינוי במהלך שטיפה ושטיפה.

מקור: Menezes Forti, R. et al. ניטור בזמן אמת של חולים נוירו-קריטיים עם ספקטרוסקופיות אופטיות מפוזרות. J. Vis. Exp. (2020)סרטון זה מדגים את השימוש בספקטרוסקופיה של מתאם מפוזר (DCS) למדידת זרימת דם מוחית בבני אדם. הוא מתאר את השלבים להכנת המערכת, כיול הגשושית, מיקומה על מצחו של המשתתף, רכישת נתוני אור מפוזרים וניתוח תנודות עוצמה כדי לפרש את דינמיקת זרימת הדם במוח.

מקור: Kim, D. E., et al. הדמיה פלואורסצנטית קרובה לאינפרא אדום וטומוגרפיה מיקרו-ממוחשבת להמחשה ישירה של טרומבואמבולי מוחי. J. Vis. Exp. (2016)סרטון זה מדגים הדמיה פלואורסצנטית קרובה לאינפרא אדום (NIRF) כדי להמחיש פקקת ברקמת מוח שנכרתה המסומנת בבדיקה ספציפית לפיברין. אור קרוב לאינפרא אדום מעורר את הגשושית, גורם לפקקת להאיר, ומאפשר הדמיית פקקת בעלת ניגודיות גבוהה בעורק המוח הראשי ובכלי הדם הקטנים בקליפת המוח.

מקור: Villaseñor, R and Collin. L. הדמיה קונפוקלית ברזולוציה גבוהה של מחסום הדם-מוח: הדמיה, שחזור תלת מימד וכימות של טרנסציטוזיס. J. Vis. Exp. (2017)סרטון זה מדגים הדמיה תלת מימדית ברזולוציה גבוהה של מחסום הדם-מוח (BBB) באמצעות מיקרוסקופיה קונפוקלית, המציגה קטעי מוח של עכבר מוכתמים בנוגדנים לניתוח רכיבי BBB ומבנים תוך-תאיים, ישים לחקר הומאוסטזיס מוחי, אינטראקציות נוירו-וסקולריות ותפקוד לקוי של BBB הקשור למחלה.

מקור: Sweeney, A. M., et al. הדמיה in vivo של הובלת נוזל מוחי שדרתי דרך גולגולת העכבר השלמה באמצעות מקרוסקופיה פלואורסצנטית. J. Vis. Exp. (2019)סרטון זה מדגים את תהליך הדמיית זרימת נוזל המוח השדרתי (CSF) במוח עכבר באמצעות הדמיה פלואורסצנטית. עוקב פלואורסצנטי מוזרק לתוך בור המים (CM), ומאפשר לעקוב אחר תנועתו עם CSF דרך החללים התת-עכבישיים והפרי-וסקולריים. הדמיית זמן-lapse לוכדת את מסעו של העוקב, ומדגישה את התפשטותו לרקמת המוח דרך העורקים.

מקור: Breid, S., et. al. הדמיה ביולומינסנציונית של דלקת עצבית בעכברים טרנסגניים לאחר חיסון היקפי של סיבי אלפא-סינוקלאין. J. Vis. Exp. (2017)סרטון זה מדגים את הדמיית הביולומינסנציה של דלקת עצבית בעכברים טרנסגניים, ומציג תגובות לוציפראז-לוציפרין באסטרוציטים פעילים. הפרוטוקול מאפשר כימות לא פולשני של הפעלה אסטרוציטית, ומסייע למחקרים על דלקת במערכת העצבים המרכזית ויעילות טיפולית.

מקור: Nyström, S., et al., הדמיית רקמות עמילואיד מוכתמות באוליגותיופנים מצומדים זוהרים על ידי מיקרוסקופיה קונפוקלית היפרספקטרלית והדמיה פלואורסצנטית לכל החיים. J. Vis. Exp. (2017). סרטון זה מדגים ניתוח מבני עמילואיד עם מיקרוסקופ הדמיה פלואורסצנטי או FLIM, תוך שימוש בצבע hFTAA כדי לחשוף ליבות קומפקטיות ככחול/ירוק והיקפי לא יציב כמו אדום/צהוב בתמונות מקודדות צבע, המשקפות את ארגון העמילואיד.

מקור: בוסקו, א., . In vivo דינמיקה של הפעלת מיקרוגליה ברשתית במהלך ניוון עצבי: הדמיה אופטלמוסקופית קונפוקלית ומורפומטריית תאים בגלאוקומה של עכברים. J. Vis. Exp. (2015)} סרטון זה מדגים הדמיה in vivo של מיקרוגליה ברשתית במודל עכבר של גלאוקומה. עכבר טרנסגני עם מיקרוגליה ברשתית המבטאת חלבון פלואורסצנטי ממוקם מתחת לאופטלמוסקופ. תאורת אינפרא אדום משמשת לאיתור ראש עצב הראייה (ONH), ומישור המוקד נוצר באמצעות כלי דם ברשתית כציוני דרך. לאחר מכן משתמשים בהדמיה פלואורסצנטית כדי להמחיש את המיקרוגליה...

מקור: Maiti, P. et. al.,. תיוג והדמיה של פלאק עמילואיד ברקמת המוח באמצעות הפוליפנול כורכומין הטבעי. J. Vis. exp. (2019){{}}סרטון זה מדגים את הליך ההדמיה של פלאק עמילואיד-בטא במקטעי רקמת המוח באמצעות תיוג חיסוני וצביעה של כורכומין. תיוג חיסוני מספק ספציפיות לעמילואיד-בטא, בעוד כורכומין קושר באופן סלקטיבי סיבים עשירים ב-β יריעות, ומשפר את ההדמיה. הלוקליזציה המשותפת של הקרינה האדומה והירוקה מאשרת את נוכחותם של פלאקים.

מקם את ראשו של חולה עם טרשת נפוצה בתוך גלי הרדיו או סליל ה-RF של מכשיר MRI. התחל התאוששות היפוך מוחלשת בנוזל או הדמיית FLAIR. בחר פרוסת מוח המכילה נגעים ליד אזורים עשירים ב-CSF. המערכת מייצרת שדה מגנטי חזק, מיישרת פרוטונים ברקמת מוח בריאה ופגומה ו-CSF לכיוונה, ויוצרת מגנטיזציה נטו. הפעל פולס RF היפוך כדי להפוך את המגנטיזציה של כל הפרוטונים, וליישר אותם מול השדה המגנטי. אפשר זמן התאוששות היפוך, שבמהלכו פרוטוני CSF מגיעים לאפס מגנטיזציה, בעוד שפרוטוני רקמות שומרים על מגנטיזציה שיורית מסוימת.

מקור: Zaeck, L., et al.} הדמיה תלת-ממדית ברזולוציה גבוהה של זיהום בנגיף הכלבת ברקמת מוח מנוקה ממסים. J. Vis. exp. (2019). סרטון זה מדגים את תהליך ההכנה וההדמיה של רקמת מוח של עכברים שנדבקו בנגיף הכלבת (RABV) כדי להעריך את התקדמות ההדבקה. הוא מתאר שלבים מרכזיים, כולל צביעת רקמות עם סמנים פלואורסצנטיים, התייבשות, ניקוי והרכבה למיקרוסקופ סריקת לייזר קונפוקלי, ששיאו ביצירת ייצוג תלת מימדי.

מקור: Bisht, K., et. al. מיקרוסקופיה של אור ואלקטרונים בקורלציה לחקר אינטראקציות מיקרו-גליאליות עם פלאק β-עמילואיד. J. Vis. exp. (2016)} סרטון זה מדגים את ההדמיה והמיפוי של פלאק עמילואיד מתוקסי-X04 במוח עכבר של מחלת אלצהיימר חתכים באמצעות מיקרוסקופ פלואורסצנטי ושדה בהיר, המאפשרים מתאם מדויק של פלאק עם מבנים אנטומיים לחקר פתולוגיה של אלצהיימר.

מקור: Ouyang, Y., et al. הדמיית PET/MRI סימולטנית במהלך היפוקסיה מוחית של עכבר. J. Vis. Exp. (2015)סרטון זה מדגים טכניקה להערכת פגיעה בהיפוקסיה מוחית באמצעות טומוגרפיה סימולטנית של פליטת פוזיטרונים (PET) והדמיית תהודה מגנטית (MRI). עכבר מורדם עובר קשירת עורק הצוואר המשותף (CCA), מה שמפחית את זרימת הדם לחצי מוח אחד וגורם לו לפגיעה הנגרמת על ידי היפוקסיה. הדמיית PET ו-MRI מעריכה את חילוף החומרים של הגלוקוז ושינויים מבניים במהלך היפוקסיה. MRI מזהה דיפוזיה מוגבלת של מים, בעוד ש-PET חושף ספיגת...

מקור: Krishnamurthy, K. et al. מדידה פלואורסצנטית בזמן אמת של פונקציות סינפטיות במודלים של טרשת אמיוטרופית צידית. J. Vis. Exp. (2021)סרטון זה מדגים הדמיית סידן בזמן אמת כדי לנטר פעילות סינפטית בתאי עצב מוטנטיים של ALS המבטאים חיישן ביולוגי של סידן מקודד גנטית. הוא מתאר את השלבים להכנת הנוירונים להדמיה, גירוי דינמיקת סידן והקלטת פלואורסצנטיות כדי למדוד שינויים בזמן אמת ברמות הסידן התוך-תאי, המשקפות פעילות סינפטית עצבית.

מקור: Ciraku, L., et. al. מודל פרוסת מוח ex vivo לחקר ומיקוד צמיחת גידול גרורתי במוח של סרטן השד. J. Vis. exp. (2021). סרטון זה מדגים את ההדמיה של תאי גידול המבטאים לוציפראז בפרוסת מוח של עכבר אורגנוטיפי. לוציפרין מתווסף למדיום, והצלחת ממוקמת בתוך החדר של מערכת ההדמיה in vivo. פרמטרים ללכידת תמונה מותאמים, וצורת הגידול וגודלו מוגדרים. לאחר מכן נרשמים האותות הביולוגיים הנפלטים מתאי הגידול.

מקור: Arango-Lievano, M. et. al., הדמיה אורכית in vivo של כלי הדם במוח: רלוונטיות למחלות מערכת העצבים המרכזית. J. Vis. Exp. (2016)סרטון זה מדגים הדמיה דו-פוטונית in vivo כדי להמחיש פלאק עמילואיד וכלי דם מוחיים עם תווית פלואורסצנטית. פלואורסצנציה כחולה מסמנת פלאק, בעוד פלואורסצנציה ירוקה מדגישה את כלי הדם במוח. מפה תלת מימדית של אזור העניין והדמיית פסיפס ברזולוציה גבוהה חושפות אינטראקציות מפורטות של פלאק עמילואיד עם כלי מוח.

מקור: Clark, A.J., et al. הדמיית ביולומינסנציה של מודל בעלי חיים בעלי יכולת חיסונית לגליובלסטומה. J. Vis. Exp. (2016)סרטון זה מדגים הדמיית ביולומינסנציה כדי לעקוב אחר התקדמות גליובלסטומה במודל עכבר בעל יכולת חיסונית, תוך שימוש בתאי גידול המבטאים לוציפראז ולוציפרין כדי לכמת את צמיחת הגידול באופן לא פולשני.

מקור: Parker, J. J., et al. מודל תרבית פרוסות אורגנוטיפית של גליובלסטומה אנושית לחקר נדידת תאי גידול והשפעות ספציפיות לחולה של תרופות אנטי פולשניות. J. Vis. Exp. (2017)סרטון זה מציג הדמיה של פרוסות רקמת גליובלסטומה המבטאות חלבון פלואורסצנטי ירוק (GFP) באמצעות מיקרוסקופיה קונפוקלית. תמונות ברזולוציה גבוהה נלכדות במרווחי זמן עקביים כדי לעקוב אחר תנועת תאי הגידול וכיוונם.

מקור: Lutz, D., et.al. הערכת פרמטרים של נוירופלסטיות אולטרה-מבנית לאחר התמרה ברחם של מוח העכבר וחוט השדרה המתפתחים. J. Vis. Exp. (2019). סרטון זה מדגים את ניתוח ההכנה וההעברה של מיקרוסקופ אלקטרונים (TEM) של קטע מוח מגור עכבר. הפרוטוקול מתחיל ברקמה קבועה של אוסמיום טטרוקסיד המוטמעת בשרף, ואחריה זמירה מדויקת לבידוד אזור העניין ואולטרה-מיקרוטומיה לייצור קטעים דקים למחצה ואולטרה-דקים, המוצגים באמצעות מיקרוסקופ אור ו-TEM, בהתאמה.

מקור: Inal, M. A. et. al., מעקב לאחור אחר Drosophila נוירונים מוטוריים עובריים באמצעות צבעים פלואורסצנטיים ליפופיליים. J. Vis. Exp. (2020)סרטון זה מדגים את שיטת התיוג לאחור של נוירונים מוטוריים Drosophila באמצעות צבעים ליפופיליים. הצבע נכנס לאקסון, נע לאחור ומסמן את הנוירונים בירוק, מה שמאפשר הדמיה מפורטת של המורפולוגיה וההקרנות שלהם תחת מיקרוסקופ קונפוקלי.

מקור: <='background-color:transparent;color:#1155cc;'>Flatz, W. H. et al. in vivo ניתוח מורפומטרי של עצבי גולגולת אנושיים באמצעות הדמיית תהודה מגנטית באוזניים של מחלת מנייר ואוזני שמיעה רגילות. J. Vis. Exp. (2018).סרטון זה מדגים את השימוש ב-MRI לניתוח מורפולוגיה של עצב הגולגולת באוזניים של חולים הסובלים מהפרעה כרונית באוזן הפנימית. הוא מתאר את השלבים לביצוע סריקת MRI בשדה מגנטי גבוה על המטופל, שחזור תמונות חתך תלת מימד ברזולוציה גבוהה של עצבי הגולגולת, ומדידת ממדי העצבים כדי להעריך את...

מקור: Braeckman, K., ואחרים. al. הדמיית דיפוזיה מתקדמת בהיפוקמפוס של חולדות עם פגיעה מוחית טראומטית קלה. J. Vis. Exp.} (2019){{}}{{}}}סרטון זה מדגים את השימוש בהדמיה משוקללת דיפוזיה כדי להעריך שינויים מיקרו-מבניים בהיפוקמפוס של חולדה בעקבות פגיעה מוחית טראומטית קלה (mTBI), המדגישים פגיעה אקסונלית באמצעות סריקת MRI מדויקת וניתוח דיפוזיה.

מקור: Papadelis, C. , et al.,} תנודות בין-תדירות גבוהה שזוהו באמצעות מגנטואנצפלוגרפיה ואלקטרואנצפלוגרפיה בו-זמנית כסמן ביולוגי של אפילפסיה בילדים. J. Vis. exp.{{TAG_ 27}} (2016). סרטון זה מדגים את השיטה של שימוש בהקלטות אלקטרואנצפלוגרפיה (EEG) ומגנטואנצפלוגרפיה (MEG) כדי לזהות פריקות אפילפטיות בין-איקטליות (IED) ותנודות בתדר גבוה (HFOs) כדי לאתר אזורים מועדים להתקפים במוח.

מקור: }Huang, Y. et. al.,, ניטור מורפולוגי ופיזיולוגי אורכי של ספרואידים תלת-ממדיים של גידול באמצעות טומוגרפיה קוהרנטית אופטית. J. Exp. (2019)}{{}}} סרטון זה מדגים את השימוש בקוהרנטיות אופטית טומוגרפיה (OCT) לניטור ספרואידים של גידול בצלחת מרובת בארות על ידי לכידת תמונות חתך ברזולוציה גבוהה. על ידי ניתוח השתקפויות אור ממבנים תאיים, OCT בונה מודלים תלת מימדיים כדי להעריך תכונות מורפולוגיות כמו גודל וצורה תוך הבחנה בין תאים ברי קיימא לתאים שאינם ברי קיימא על סמך שינויים בפיזור האור לאורך זמן.

מקור: Lahne, M., et.al. תרבית של צמחי רשתית של דג זברה טרנסגני בוגר להדמיית תאים חיים על ידי מיקרוסקופ מולטיפוטון. J. Vis. Exp. (2017)סרטון זה מדגים הדמיה של תא חי של נדידת גרעין גליה של מולר באקספלנטים של רשתית דג הזברה המשובץ באגרוז בעקבות נזק לקולטני אור המושרה על ידי אור. גורם נמק גידול-אלפא (TNF-α) המשתחרר על ידי קולטני אור פגומים מפעיל תאי גליה של מולר, ומפעיל נדידה גרעינית דרך השכבות הגרעיניות הפנימיות והחיצוניות למיטוזה ויצירת אבות עצביים. התמונות שצולמו חושפות את הדינמיקה של הגירה...

מקור: Bénard, M., et al. ex vivo הדמיה של נדידת תאי גרגיר מוח לאחר לידה באמצעות מקרוסקופיה קונפוקלית. J. Vis. Exp. (2015)סרטון זה מדגים שיטה מקרוסקופית קונפוקלית למעקב אחר נדידת ex vivo של תאי גרגיר בפרוסות מוח קטן ממוחות של חולדות לאחר לידה.

מקור: Daynac, M., et. al. מיון תאים של תאי גזע עצביים ותאי אב מהאזור התת-חדרי של העכבר הבוגר והדמיה חיה של דינמיקת מחזור התא שלהם. J. Vis. Exp. (2015)סרטון זה מדגים הדמיה בהילוך מהיר של תאי גזע עצביים (NSCs) ממוח של עכבר טרנסגני באמצעות מיקרוסקופ סריקת לייזר קונפוקלי. תאי גזע עצביים זוהרים באדום במהלך שלב G1 ואינם פלואורסצנטיים בשלבים אחרים של מחזור התא. תרבית NSC מודבקת מונחת בתא ההדמיה, נקבעים פרמטרי הדמיה, והתמונות נלכדות במרווחי זמן קבועים למשך הזמן הרצוי.

מקור: Williams, A. L., et al. הדמיית זמן-lapse מרובת פוטונים כדי להמחיש התפתחות בזמן אמת: הדמיה של תאי פסגה עצבית נודדים בעוברי דג זברה. J. Vis. Exp. (2017)סרטון זה מציג פרוטוקול הדמיה מרובה פוטונים כדי לדמיין את הנדידה של תאי פסגה עצבית בעובר דג זברה בזמן אמת ברזולוציה גבוהה.

מקור: Jeong, S. הדמיה של דפוס ההקרנה האקסונלי של נוירונים מוטוריים עובריים ב-Drosophila. J. Vis. Exp. (2017)סרטון זה מדגים את ההדמיה של הקרנות אקסונליות בעוברים Drosophila. תיוג חיסוני של נוירונים מוטוריים, דיסקציה מדויקת לחשיפת מבנים עצביים ומיקרוסקופ ניגודיות של הפרעות דיפרנציאליות חושפים ביחד ארכיטקטורה עצבית מפורטת, תוך שימת דגש על דפוסי ההקרנה האקסונלית.

מקור: Canovic, E. P., et. al., אפיון תכונות מכניות רב-ממדיות של רקמת המוח באמצעות מיקרוסקופ כוח אטומי, הזחת פגיעה וריאומטריה. J. Vis. Exp. (2016)הסרטון מדגים שימוש בהזחת פגיעה כדי למדוד את התכונות המכניות של רקמת מוח של עכבר מיובש, כולל נוקשות, פיזור אנרגיה ושיכוך, באמצעות תזוזה של בדיקה וניתוח מהירות.

מקור: Portela-Lomba, M., et. al. קוקולטורה של נוירונים של גנגליון רשתית של חולדה עם גליה מעטפת ריח, כמודל במבחנה של התחדשות אקסונלית בוגרת. J. Vis. exp. (2020). סרטון זה מדגים הדמיה וכימות של התחדשות אקסונלית בתאי עצב גנגליון רשתית של חולדות אקסוטומיות (RGNs) בתרבית משותפת עם תאי גליה עוטפים ריח אנושיים אימורטליים. RGNs הם בעלי תווית חיסונית, עם סומות אדומות ואקסונים ירוקים. התמונות צולמו באמצעות מיקרוסקופ אפיפלואורסצנטי, ואחוז הנוירונים עם אינדקס התחדשות אקסוני ואקסונלי כומת באמצעות תוכנת...

מקור: Changou, C. A., et. al. תמונות חיות של סחר בחלבון GLUT4 בנוירונים היפותלמוסיים ראשוניים של עכברים באמצעות מיקרוסקופ דה-קונבולוציה. J. Vis. Exp. (2017). סרטון זה מציג את ההדמיה של טרנסלוקציה של GLUT4 המושרה על ידי אינסולין בנוירונים היפותלמוסיים, תוך שימוש במיקרוסקופ דה-קונבולוציה כדי ללכוד ולנתח דינמיקת סחר ב-GFP-GLUT4 ברזולוציה גבוהה.

מקור: Kennedy, L. H., et. al. הדמיה והדמיה חיה של אברוני אוליגודנדרוציטים בפרוסות מוח אורגנוטיפיות באמצעות וירוס הקשור לאדנו ומיקרוסקופיה קונפוקלית. J. Vis. Exp. (2017)סרטון זה מדגים את ההדמיה של מיטוכונדריה אוליגודנדרוציטים בפרוסות מוח אורגנוטיפיות של עכבר. הפרוסה מונחת בתוך תא אמבטיה עם זרימת נוזלים רציפה וטמפרטורה מבוקרת. לאחר הגדרת פרמטרים שונים של המיקרוסקופ הקונפוקלי, נלכדות תמונות זמן-lapse של מיטוכונדריה עם פלואורסצנטיות אדומה, ואחריהן תמונות Z-stack של האוליגודנדרוציטים עם...

מקור: Etienne, F. et al. הדמיה דו-פוטונית של משיכת תהליכים מיקרו-גליאליים ל-ATP או סרוטונין בפרוסות מוח חריפות J. Vis. Exp. (2019)} סרטון זה מדגים את השימוש במיקרוסקופיה דו-פוטונית כדי לחקור את המשיכה של תהליכי מיקרוגליה לעבר תרכובת מוזרקת בפרוסות מוח. הוא מספק סקירה כללית של הכנת פרוסות מוח של עכברים, הזרקת תרכובת בדיקה כימואטרקנטית והדמיית מיקרוגליה עם תווית פלואורסצנטית כדי לדמיין את תגובותיהם.

מקור: Wang, Z., et al. Transpupillary Two-Photon In Vivo Imaging of the Mouse Retina. J. Vis. Exp. (2021). סרטון זה מדגים טכניקה להדמיית רשתית in vivo באמצעות מיקרוסקופ דו-פוטוני. עכברים מורדמים מוכנים להדמיה על ידי אבטחת ראשם, מריחת חומר סיכה לעיניים והנחת כיסוי על העין. תאי גנגליון רשתית (RGCs) המבטאים חלבונים פלואורסצנטיים מוצגים לראשונה באמצעות אפיפלואורסצנציה ליישור. לבסוף, נעשה שימוש בהדמיה דו-פוטונית, המאפשרת הדמיה ברזולוציה גבוהה של RGCs.

מקור: Bisht, K., et al. מיפוי מוח מדויק לביצוע הדמיה חוזרת של דינמיקה נוירו-אימונית בעכברים. J. Vis. Exp. (2020)סרטון זה מדגים הדמיה פלואורסצנטית של דינמיקה נוירו-אימונית בעכבר טרנסגני עם שתל גולגולת. יציבות כלי הדם והעצבים מצולמת לצד שינויים דינמיים במיקרוגליה, המשקפים תגובות חיסוניות לפעילות עצבית.

מקור: Shannonhouse, J., et al. In vivo הדמיית סידן של הרכבים עצביים ברשתות של נוירונים חושיים ראשוניים בגרעיני שורש גב שלמים. J. Vis. Exp. (2023). הסרטון מדגים טכניקת הדמיית סידן in vivo לניטור פעילות עצבית בגרעיני השורש הגבי (DRG) של עכבר טרנסגני. נוירונים DRG מבטאים אינדיקטור סידן המגביר את עוצמת הקרינה בעת הקישור לסידן. גירויים מכניים או תרמיים המופעלים על כפה אחורית מייצרים פוטנציאל פעולה המתפשט ל-DRG, גורם לזרימת סידן בתאי העצב וכתוצאה מכך פליטת פלואורסצנטיות מוגברת.

מקור: Hellerman, M. B., et al. Live-imaging of the Drosophila Pupal Eye. J. Vis. Exp. (2015)הסרטון מדגים טכניקת הדמיה חיה לחקר דפוסי עיניים בגולם Drosophila melanogaster. סמנים מתויגים בחלבון פלואורסצנטי ירוק (GFP) מאפשרים הדמיה של ארגון התאים והתמיינות במהלך היווצרות מבנה העין המתפתח.

מקור: }Ulivi, A. F., et. al. הדמיה אורכית דו-פוטונית של ההיפוקמפוס הגבי CA1 בעכברים חיים. J. Vis. exp. (2019)} }סרטון זה מדגים הדמיה אורכית של שני פוטונים של נוירונים פירמידליים בעלי תווית פלואורסצנטית בעכבר חי, הצגת ההכנה, יישור הצינורית וההדמיה של דנדריטים ועמוד שדרה דנדריטי כדי לחקור את המבנה העצבי באזור CA1 בהיפוקמפוס.

מקור: Gómez-Villafuertes, R., et. al., הדמיה חיה ואחריה מעקב אחר תא בודד כדי לנטר את הביולוגיה של התא ואת התקדמות השושלת של אוכלוסיות עצביות מרובות. J. Vis. exp. (2017)} } וידאו מדגים את תהליך ההכנה, ההדמיה והמעקב אחר תאי גזע עצביים בוגרים בזמן אמת כדי לחקור התנהגויות תאיות, כולל חלוקה והתמיינות.

מקור: Volpe, B. A., , ואחרים בדיקת אבלציה והתחדשות לייזר מבוססת מיקרוסקופ קונפוקלי בתאים בין-נוירומאסטים של דג הזברה. J. Vis. exp.{{TAG_ 31}} (2020) } סרטון זה מדגים ניטור התאוששות תאים בין-עצביים בדגי זברה באמצעות מיקרוסקופיה קונפוקלית, מעקב אחר מוות ותיקון תאים באמצעות הדמיה פלואורסצנטית בזמן-lapse.

מקור: Fried, D. E., Gulbransen, B. D. באתרו ca2+{{}} הדמיה של מערכת העצבים המעי. J. Vis. exp., (2015){סרטון זה מדגים סידן הדמיה כדי להמחיש ולנתח את הפעילות של נוירונים מעיים וגליה בתכשירי מקלעת מיאנטרית של המעי הגס בעכבר.

מקור: Jagodzinska, J., et. al., טומוגרפיה קוהרנטית אופטית: הדמיית תאי גנגליון רשתית של עכבר ב-Vivo. J. Vis. Exp. (2017) בסרטון זה, אנו מדגימים את השימוש בטומוגרפיה קוהרנטית אופטית בתחום ספקטרלי (SD-OCT) כדי לדמות שכבות רשתית ולהעריך שינויים מבניים במודל עכבר מהונדס גנטית עם נוירופתיה אופטית.

מקור: Chaney, A. M., et.al. הדמיית PET של דלקת עצבית באמצעות [11C]DPA-713 במודל עכבר של שבץ איסכמי. J. Vis. exp. (2018). סרטון זה מדגים טכניקה להדמיה in vivo של דלקת עצבית במודל עכבר של שבץ איסכמי באמצעות רדיו-טרייסר ספציפי ל-TSPO. לאחר ההזרקה, הרדיואקסר נקשר ל-TSPO, חלבון הממוקם על הממברנה המיטוכונדריאלית החיצונית ומתבטא יתר על המידה בתאי חיסון פעילים. סורק PET/CT מזהה את התפלגות הרדיואקסר ומייצר תמונה שנרשמה במשותף עם נתוני CT, ומאפשר לוקליזציה מדויקת של אזורים נוירו-דלקתיים במוח.

מקור: Choi, J. P. ואחרים. אינדוקציה והדמיית מיקרו-CT של מומים במערות המוח במודל עכבר. J. Vis. exp. ( 2017)} סרטון זה מדגים את השימוש בהדמיית מיקרו-CT כדי להמחיש נגעים של מום מערות מוחי (CCM) במוח של עכבר. הוא מפרט את השלבים להכנת דגימה, הדמיה ושחזור תמונה תלת מימדית כדי להעריך את הצפיפות והמיקום של נגעי CCM ברקמת המוח.

מקור: Schmitz, K., et al., bioluminescence והדמיה קרובה לאינפרא אדום של דלקת עצב הראייה ודלקת מוחית במודל EAE של טרשת נפוצה בעכברים. J. Vis. Exp. (2017).סרטון זה מדגים את השיטה להמחשה וניטור של דלקת מוח אוטואימונית ניסיונית או דלקת הנגרמת על ידי EAE בעצב הראייה באמצעות הדמיית ביולומינסנציה. זה כולל מיקום העכבר, הזרקת ריאגנטים ולכידת תמונות עוקבות כדי לנטר שינויים בביולומינסנציה לאורך זמן.

מקור: Ishimoto, H. et. al., הדמיית סידן ex vivo להמחשת תגובות המוח לאיתות אנדוקריני בדרוזופילה. J. Vis. exp. (2018)}{{}}} {{}}} סרטון זה מדגים הדמיית סידן למחקרDrosophila תגובות מוח לנוירופפטידים. נוירונים המבטאים אינדיקטור סידן פלואורסצנטי חושפים דינמיקת סידן תוך תאית ותגובות תפקודיות למולקולות איתות.

מקור: Al Omran, A. J., et al. הדמיה חיה של הריסים האפנדימליים בחדרים הצדדיים של מוח העכבר. {{}}J. Vis. exp. (2015). }סרטון זה מדגים טכניקת הדמיה חיה באמצעות מיקרוסקופ ניגודיות הפרעה דיפרנציאלית (DIC) כדי לצפות בפעימות של ריסים אפנדימליים במקטעי מוח של עכבר סגיטלי. ריסים אפנדימליים מניעים נוזל מוחי שדרתי (CSF), ופעילותם נרשמת בחלקי מוח הנשמרים בתווך עשיר בחומרים מזינים ומצולמים בתא מבוקר אקלים. סרטונים בעלי ניגודיות גבוהה מאפשרים לזהות ריסים פונקציונליים ולכמת את תדירות הפעימות שלהם.

מקור: Pigazzini, M. L., et. al. אפיון של מבני עמילואיד בהזדקנות C. Elegans שימוש בהדמיה לכל החיים של הקרינה. J. Vis. Exp. (2020).סרטון זה מדגים את השימוש במיקרוסקופ הדמיה פלואורסצנטי (FLIM) כדי להעריך צבירת חלבון polyQ ב C. elegans נוירונים, השוואה בין תולעים בקרה ותולעים חסרות חלבון מלווה. צבירה מוגברת בתולעים חסרות מלווה מקדמת העברת אנרגיה בין פלואורופורים מקובצים, ומקטינה את חיי הקרינה. מפות מקודדות בצבע שנוצרו על ידי FLIM מתארות את ההבדלים הללו, ומדגישות את רמות הצבירה בין קבוצות הניסוי.

מקור: Landeira, B. S.,et al., הדמיה חיה של תאי קליפת המוח הראשונית באמצעות מערכת תרבית דו-ממדית. J. Vis. Exp. (2017)הסרטון מדגים את השימוש בהדמיית זמן-lapse כדי לעקוב אחר אבות קליפת המוח המסומנים פלואורסצנטית, לנטר את החלוקה וההתמיינות שלהם, ולחקור את התפתחות השושלת בתאי קליפת המוח...

מקור: Lee, H. et. al., הדמיית סידן מוצלחת in vivo עם מיקרוסקופ ממוזער המותקן על הראש באמיגדלה של עכבר שמתנהג בחופשיות. J. Vis. Exp. (2020)סרטון זה מדגים הדמיית סידן in vivo בעכבר באמצעות מקדם שבירה שיפוע, או עדשת GRIN, ומיקרוסקופ ממוזער. המערך משלב קיבוע ראש בתוך מערכת כלובים ניידת ללא חיכוך, מגרה נוירונים ומעורר זרם יוני סידן. עדשת GRIN לוכדת איתות סידן במוח, ומאפשרת הדמיה בזמן אמת של פעילות עצבית.

מקור: Thapa, R., et. al., הזרקה ויראלית סטריאוטקסית והשתלת עדשות אינדקס שיפוע למוח עמוק In Vivo הדמיית סידן. J. Vis. Exp. (2021)הסרטון מדגים הדמיית סידן בזמן אמת באמצעות מיניסקופ בעכבר שעבר התמרה, ומתאם בין פעילות עצבית להתנהגות.

מקור: Moore, J. D., et al. ניטור ולוקליזציה של נוירונים בודדים בתוך מבני מוח תת-קורטיקליים של חולדות ערניות ומרוסנות ראש. J. Vis. Exp. (2015)סרטון זה מדגים את השיטה של רישום וצביעה בחולדה מאופקת וערה ההליך כולל הקלטת אותות מנוירונים והזרקת צבע כדי למקם במדויק את אתר ההקלטה. טכניקה זו מאפשרת מיפוי מדויק של הפעילות העצבית למבנה האנטומי של המוח.

מקור: Schramm, P. et al. הדמיה in vivo של רקמת מוח פעילה לחלוטין בזחלים וצעירים של דג זברה ער על ידי הסרת גולגולת ועור. J. Vis. Exp. (2021)סרטון זה מדגים את ההדמיה in vivo של נוירונים במוח הקטן בזחלי דג זברה טרנסגניים, המבטאים חלבונים פלואורסצנטיים בנוירונים של פורקיניה. התהליך כולל הרדמת הזחלים, שיתוקם באגרוז והסרה זהירה של העור הפיגמנטי כדי לשפר את חדירת האור ועוצמת הקרינה. לבסוף, הדגימות המוכנות מצולמות תחת מיקרוסקופ קונפוקלי כדי לדמיין את הנוירונים המסומנים בבירור.

מקור: Ing-Esteves, S. & Lefebvre, J. L. הדמיית זמן-lapse של ארבוריזציה עצבית באמצעות תיוג דליל של וירוסים הקשורים לאדנו. J. Vis. Exp. (2021)סרטון זה מדגים את השימוש במיקרוסקופיה קונפוקלית כדי להמחיש דינמיקה דנדריטית בצמחי רשתית של עכבר חי. הוא מתאר את השלבים לייצוב הרשתית תחת מיקרוסקופ קונפוקלי, ביצוע הדמיה אפיפלואורסצנטית כדי לדמיין אינטרנוירונים אמקריניים של התפרצות כוכבים, ולכידת תמונות תלת מימד בהילוך מהיר כדי לנטר שינויים במורפולוגיה דנדריטית אמקרינית.

מקור: Kamei, R., et. al., In vivo Chronic Two-Photon Imaging of Microglia in the Mouse Hippocampus. J. Vis. Exp. (2022)הסרטון מדגים את תהליך ההתקנה וההדמיה של מיקרוסקופיה דו-פוטונית in vivo של דינמיקת מיקרוגליה בהיפוקמפוס CA1 (Cornu ammonis 1) ובפיתול המשונן, מה שמבטיח יישור אופטי אופטי והערכת שלמות מבנית.

מקור: Lukasz, D., et al. הדמיית סידן in vivo של תאי שיער בקו הרוחב בדג זברה זחל. J. Vis. Exp. (2018)סרטון זה מדגים הדמיה חיה של זרם סידן בתאי השיער בקו הצדדי של זחל דג זברה טרנסגני משותק באמצעות מיקרוסקופ קונפוקלי. גירוי מכני של צרורות שיער באמצעות פולסים נוזליים גורם לכניסת סידן דרך תעלות מכניות ותעלות מגודרות מתח, אשר מוצגות בזמן אמת באמצעות מחווני פלואורסצנטיות. השיטה מדגישה את הדינמיקה של סידן אפיקלי ובסיסי בתאי שיער נוירומסטים, ומבהירה את תפקידם בזיהוי תנועת מים.

מקור: Louth, E. L., et al. הדמיית נוירונים בתוך מקטעי מוח עבים בשיטת גולגי-קוקס. J. Vis. Exp. (2017)סרטון זה מדגים הדמיית נוירונים בקטע מוח עבה מוכתם גולגי-קוקס על ידי הגדרת גבולות מיקוד עליונים ותחתונים ולכידת תמונות חופפות. מיקומים מרובים מצולמים כדי להבטיח הקרנות עצביות מפורטות, המשולבות ליצירת ייצוג תלת מימדי.

מקור: } Heredia, D. J., et. al. הדמיה ex vivo של איתות סידן ספציפי לתא בסינפסה המשולשת של דיאפרגמת העכבר. J. Vis. exp. (2018)} } סרטון זה מדגים הדמיה פלואורסצנטית של דינמיקת סידן בצמתים עצביים-שריריים (NMJs) בעכבר טרנסגני המבטא מדדי סידן מקודדים גנטית. NJM מזוהה על ידי קולטני אצטילכולין מתויגים פלואורסצנטית בסרעפת עם העצב הפרני. מפצל תמונה משמש להמחשת אותות מרובים בו זמנית. גירוי חשמלי מועבר, ונרשם השינוי בקרינה ב-NMJ בתגובה לזרם הסידן.

מקור: } Pekarek, B. T., et. al., הדמיה וכימות של דנדריטים עצביים שלמים באמצעות ניקוי רקמות CLARITY. J. Vis. Exp. (2021)} בסרטון זה, אנו מדגימים את ההכנה, ההדמיה והניתוח של מוח עכבר מנוקה כדי לבחון סוכות דנדריטיות, מורפולוגיה של עמוד השדרה והתפלגות עצבית באמצעות מיקרוסקופיה קונפוקלית וטכניקות שחזור תלת מימד.

מקור: }Refaeli, R., et al.}, חקירת אינטראקציה מרחבית בין אסטרוציטים ונוירונים במוח נקי. J. Vis. exp. (2022)} }הסרטון מדגים את ההכנה של תא והדמיה מוחית של רקמת היפוקמפוס של עכבר מנוקה באמצעות מיקרוסקופ דו-פוטוני כדי להמחיש את האינטראקציות המרחביות בין אסטרוציטים המסומנים פלואורסצנטית ונוירונים מעוררים.

מקור: ChanU., et al., שימוש באלקטרופורציה שלאחר הלידה in vivo כדי לחקור את המורפולוגיה של נוירוני גרגיר המוח הקטן והתפתחות סינפסות. J. Vis. Exp. (2021).סרטון זה מדגים את הניתוח של התפתחות נוירונים של גרגירי המוח הקטן על ידי הדמיית פרוסות רקמת מוח קבועות מראש מעכברים המסומנים בחלבון פלואורסצנטי, לכידת תמונות z-stack ברזולוציה גבוהה עם מיקרוסקופ קונפוקלי, ומדידת פרמטרים מבניים כולל אורך נויריט, היווצרות טפרים דנדריטיים, שטח פנים ונפח לחקר סינפטוגנזה.

מקור: Maruoka, H., et. al. {{}}הדמיה סימולטנית של דינמיקת מיקרוגליה ופעילות עצבית בעכברים ערים. J. Vis. exp. (2022) סרטון זה מציג הליך מיקרוסקופיה דו-פוטוני להדמיית פעילות עצבית ודינמיקה של מיקרוגליה בעכבר ער במהלך גירוי חזותי, תוך הדגשת מעברי סידן ואינטראקציות תאיות.

מקור: Moye, S. L., et.al. ויזואליזציה של מורפולוגיה של אסטרוציטים באמצעות יונטופורזיס צהוב של לוציפר. J. Vis. exp. (2019). סרטון זה מדגים את השימוש ביונטופורזיס בצבע פלואורסצנטי כדי לחקור מורפולוגיה של אסטרוציטים בפרוסות מוח קבועות. הוא מפרט את הניקוב של סומה האסטרוציטים עם אלקטרודה כדי להעביר צבע אניוני, הידרופילי לתוך הציטופלזמה תחת זרם מתח נמוך, מה שמאפשר לצבע לפזר ולתייג את הסומה והענפים. לאחר מכן משתמשים במיקרוסקופיה קונפוקלית כדי להמחיש את האסטרוציטים המסומנים ולספק תובנות מורפולוגיות.

מקור: Jongbloets, B. C., et al. הדמיית חלבון קינאז פעילות בעכברים המתנהגים קבועים בראש באמצעות מיקרוסקופ הדמיה פלואורסצנטי דו-פוטוני in vivo. J. Vis. Exp. (2019)} סרטון זה מדגים הליך מיקרוסקופ הדמיה לכל החיים של פלואורסצנטי דו-פוטוני להדמיית פעילות חלבון קינאז A בעכברים קבועי ראש ומתנהגים במהלך תנועה כפויה.

מקור: Kwon, J., et al., מיקרוסקופיה רפלקטומטרית ספקטרלית על אקסונים מיאליניים באתרם. J. Vis. Exp. (2018)} סרטון זה מדגים את השימוש ברפלקטומטריה ספקטרלית עם מיקרוסקופ קונפוקלי היפרספקטרלי כדי לנתח דפוסי התאבכות ולקבוע קוטר אקסונים מיאליניים בפרוסות רקמת מוח קבועות.

התחל עם חולה עם מנינגיומה, או גידול במוח, הממוקם בסורק MRI להדמיית מוח לא פולשנית. כוונן את הסורק כדי לקבל תמונות מבניות של פרוסות בודדות של המוח. שפר את הניגודיות כדי לשפר את התמיינות הרקמות. השתמש בהדמיית יחס העברת מגנטיזציה בין פרוסות על פרוסות מוח באמצעות פולסים בתדר רדיו המוסטים מעט מאות ה-MRI. הפולסים מספקים אנרגיה למאגר הפרוטונים במקרומולקולות ומולקולות מים קשורות. אנרגיה זו עוברת לפרוטוני מים חופשיים ויוצרת אותות יחס העברת מגנטיזציה על פני הפרוסות הסרוקות. רקמות מוח בריאות מייצרות אותות...

source: Liau, E. S. et al. הדמיה של ניווט אקסון מוטורי וכימות של ארבוריזציה של אקסונים בעוברי עכברים באמצעות מיקרוסקופיה פלואורסצנטית של גיליון אור. J. Vis. Exp. (2018). סרטון זה מדגים את השימוש במיקרוסקופיה פלואורסצנטית של גיליון אור כדי להמחיש הקרנות נוירונים מוטוריים והסתעפות אקסונים ב עוברי עכברים טרנסגניים. הוא מתאר את השלבים הכרוכים בהכנת דגימה, הדמיה ושחזור תלת מימד של הסתעפות אקסונלית להערכת צמיחה וקישוריות של נוירונים מוטוריים.

מיפוי רגישות כמותי, או QSM, מכמת את הרגישות המגנטית של רקמת המוח, המשקפת את ההרכב התאי שלה, כמו תכולת המיאלין. התחל ברכישת הדמיית תהודה מגנטית ex-vivo או נתוני MRI של חצי מוח אנושי קבוע. השתמש בשדות מגנטיים של שיפוע תלת מימד כדי למגנט את הרקמה ולאסוף אותות במספר נקודות זמן או הדים כדי להפחית רעשי רקע וחפצים ולשפר את האותות. צור מפות פאזה עבור כל ההדים, כדי להבטיח הסרה של כל חפצים הנגרמים על ידי אוויר כלוא בתוך רקמת המוח. באמצעות כלי עיבוד נתוני MRI מתאימים, צור מפת שדה כוללת של חצי הכדור. הסר...

מקור: }Feng, Y., et al. אפיון ויסקו-אלסטי של פנטומים ג'לטין המחקים רקמות רכות באמצעות הזחה ואלסטוגרפיה של תהודה מגנטית. J. Vis. exp. (2022)} }סרטון זה מדגים את השיטה של אלסטוגרפיה בתהודה מגנטית (MRE) להערכת תכונות ויסקו-אלסטיות של רקמות על ידי ניתוח התפשטות גלי גזירה דרך פנטום ג'לטין, המחקה רקמת מוח. התהליך כולל יצירה ולכידה של גלי גזירה באמצעות הדמיית תהודה מגנטית או MRI וניתוח דפוסי גלים כדי להבדיל בין נוקשות הרקמות.

מקור: Boyer, N. P. et. al., הדמיה וניתוח של הובלת נוירופילמנטים בעצב השוק של עכבר שנכרת. J. Vis. exp.} (2020)}{{}}}סרטון זה מדגים את שיטת הפוטו-אקטיבציה הפלואורסצנטית לניתוח הובלת נוירופילמנטים באקסונים מיאליניים של עצבים היקפיים. על ידי מעקב אחר נוירופילמנטים ירוקים מתויגים בפלואורופור, הטכניקה מספקת תובנות לגבי הובלה אקסונלית במחלות ניווניות.

מקור: Kulkarni, M. et al. הדמיה Ca2+ דינמיקה במסופי אקסון קולטני אור חרוטים של רשתית העכבר. J. Vis. Exp. (2015)סרטון זה מדגים את השימוש במיקרוסקופ דו-פוטוני לניטור דינמיקת סידן בקולטני אור חרוטים של רשתית עכבר טרנסגנית. הוא מתאר את השלבים להכנת פרוסות רשתית, הדמיית חיישני סידן מבוססי FRET וניתוח שינויים פלואורסצנטיים כדי לכמת את רמות הסידן תחת תאורת רקע וגירוי אור.

מקור: Nishidate, I., et al. הערכה סימולטנית של המודינמיקה מוחית ותכונות פיזור האור של מוח החולדה in vivo באמצעות הדמיית רפלקציה מפוזרת מולטי-ספקטרלית. J. Vis. Exp. (2017)סרטון זה מדגים את השימוש בהדמיית רפלקציה מפוזרת מולטי-ספקטרלית כדי לנתח את זרימת הדם המוחית, רמות החמצן ושינויים במבנה הרקמה בחולדה מורדמת, ומספק תובנות לגבי המודינמיקה והמורפולוגיה של המוח בתנאים משתנים.

מקור: Van Wonterghem, E., et al. מיקרודיסקציה ומיקרוסקופ אלקטרונים סריקה שלמה הדמיה של מקלעת כורואיד עכבר. J. Vis. Exp. (2022)סרטון זה מדגים את ההכנה וההדמיה של רקמת מקלעת כורואיד ממוח עכבר באמצעות מיקרוסקופ אלקטרונים סורק (SEM). התהליך כולל קיבוע רקמות, התייבשות וציפוי בשכבת פלטינה מוליכה לייצוב והכנת הדגימה להדמיה. SEM מצלם תמונות מפורטות של תאי אפיתל עם מיקרוווילי ומספק תובנות לגבי המאפיינים המבניים של הרקמה.

מקור: Kato, D. et. al., הערכה ומניפולציה של פעילות עצבית באמצעות מיקרוסקופיה הולוגרפית דו-פוטונית. J. Vis. Exp. (2022)סרטון זה מדגים את טכניקת ההדמיה של שני פוטונים בשילוב עם אופטוגנטיקה באמצעות מיקרוסקופיה הולוגרפית. באמצעות מודולטור אור מרחבי, טכניקה זו מאפשרת גירוי עצבי מדויק המבטא את החלבון הרגיש לאור אדום והדמיית סידן עם נזק אור מינימלי. גישה זו מספקת תובנות לגבי הקישוריות והארגון התפקודי של רשתות עצביות.

מקור: Canovic, E. P., et al. אפיון תכונות מכניות רב-ממדיות של רקמת המוח באמצעות מיקרוסקופ כוח אטומי, הזחת פגיעה וריאומטריה. J. Vis. Exp. (2016)סרטון זה מדגים את השימוש במיקרוסקופ כוח אטומי (AFM) למדידת התכונות הויסקו-אלסטיות של רקמת המוח, כאשר שלוחה עם בדיקה כדורית מקיימת אינטראקציה עם הרקמה ומתכופפת תחת כוחות מופעלים. קרן לייזר המוסטת על גבי גלאי עוקבת אחר השלוחה כדי למדוד את עומק השקע והרפיית הכוח, מה שמאפשר לאפיין את התכונות המכניות של הרקמה.

מקור: Canovic, E. P., et al. אפיון תכונות מכניות רב-ממדיות של רקמת המוח באמצעות מיקרוסקופ כוח אטומי, הזחת פגיעה וריאומטריה. J. Vis. Exp. (2016)בסרטון זה, נעשה שימוש בריאומטר כדי להחיל תנועה סיבובית תנודתית מבוקרת על רקמת המוח כדי ליצור מתח גזירה ולהעריך את התכונות הצמיגות והאלסטיות של הרקמה. הריאומטר, ככלי פונקציונלי, הוא מספק תובנות לגבי מכניקת המוח במהלך פציעה או מחלות ניווניות.

מקור: Hare, D. J., et.al. הדמיית מתכות ברקמת המוח על ידי אבלציה בלייזר - פלזמה בצימוד אינדוקטיבי - ספקטרומטריית מסה (LA-ICP-MS). J. Vis. Exp. (2017)סרטון זה מדגים את השימוש בספקטרומטריית פלזמה-מסה בצימוד אינדוקטיבי של אבלציה בלייזר (LA-ICP-MS) כדי להמחיש ולכמת התפלגות מתכות ברקמת מוח של עכבר. הפרוטוקול כולל אבלציה בלייזר ליצירת תרסיס של חלקיקי דגימה, יינון של החלקיקים בפלזמה בטמפרטורה גבוהה וספקטרומטריית מסה כדי להפריד את היונים לפי יחסי המסה למטען שלהם. לאחר מכן משתמשים בתוכנה מיוחדת ליצירת...

מקור: Piazza, V., et al., אופטיקה לא ליניארית ללא תוויות לחקר פגמים תלויי טובולין במיאלין המרכזי. J. Vis. Exp. (2023)סרטון זה מדגים את ההליך להדמיית חריגות מיקרו-צינוריות בפרוסת רקמת מוח של חולדה באמצעות מיקרוסקופ עירור של שני פוטונים. הוא משתמש באותות דור הרמוני שני (SHG) כדי לזהות פגמים בטובולין וייצור מיאלין מופחת.

מקור: Daniele, F., et. al בדיקות GFP רגישות ל-TIRFM ו-pH להערכת דינמיקת שלפוחית נוירוטרנסמיטר בתאי נוירובלסטומה SH-SY5Y: הדמיית תאים וניתוח נתונים. J. Vis. exp. (2015). סרטון זה מדגים את ההדמיה של תאי נוירובלסטומה אנושיים באמצעות מיקרוסקופ פלואורסצנטי השתקפות פנימית כוללת (TIRF) כדי להמחיש שלפוחיות סינפטיות מתויגות פלואורופור. התאים מתמקדים תחילה במצב אפיפלואורסצנטי. לאחר מכן נעשות התאמות כדי להשיג השתקפות פנימית מוחלטת, וליצור גלים חולפים המעוררים באופן סלקטיבי פלואורופורים ליד הממברנה. לפני...

מקור: Winkle, C. C., et al. שימוש במתודולוגיות משולבות להגדרת תפקיד אספקת קרום הפלזמה במהלך הסתעפות אקסון ומורפוגנזה עצבית. J. Vis. Exp. (2016)סרטון זה מדגים מיקרוסקופיה פלואורסצנטית של השתקפות פנימית כוללת (TIRF) להמחשת אירועים אקסוציטיים בנוירונים בקליפת המוח. סמן חלבון פלואורסצנטי ירוק רגיש ל-pH (GFP) זוהר עם איחוי שלפוחית, עם עירור TIRF סלקטיבי הלוכד אקסוציטוזיס קרום-פרוקסימלי בהדמיית זמן-lapse.

מקור: McCullagh, E. A., et al. יישום קוהרנטי של ספקטרוסקופיית רמאן אנטי-סטוקס (CARS) להדמיית מיאלינציה בפרוסות מוח. J. Vis. Exp. (2022)הסרטון מדגים הדמיה פלואורסצנטית וספקטרוסקופיה קוהרנטית של רמאן אנטי-סטוקס (CARS) כדי להמחיש ארכיטקטורה עצבית ברקמת מוח של מכרסמים. צביעת Nissl מסמנת גופי תאים על ידי קשירה ל-RNA ריבוזומלי, בעוד שהדמיית CARS מכוונת למיאלין עשיר בשומנים באמצעות אותות המושרים בלייזר. שכבת תמונות הקרינה וה-CARS מספקת תצוגה מפורטת של גופי תאים ואקסונים מיאליניים.

מקור: Hontani, Y., et al. מיקרוסקופ פלואורסצנטי תלת-פוטוני ברקמות עמוקות במוח שלם של עכבר ודגי זברה. J. Vis. Exp. (2022)סרטון זה מדגים את ההגדרה והביצוע של הדמיית שלושה פוטונים במוח של דג זברה מורדם. הפרוטוקול מאפשר הדמיה של רקמות עמוקות של נוירונים המסומנים פלואורסצנטית, וחושף פעילות עצבית ומבנים בזמן אמת ליישומי מחקר במדעי המוח.