סרטון זה מדגים הדמיה של פקקת מוחית בעכברים באמצעות הדמיית טומוגרפיה מיקרו-ממוחשבת (מיקרו-CT). מודל של עכבר פקקת מוח מוזרק עם ננו-חלקיקי זהב ממוקדי פיברין הפועלים כחומר מנוגד. העכבר מונח על מצע של מכונת מיקרו-CT, והתמונות מתקבלות מזוויות מרובות. באמצעות תוכנה מתאימה, התמונות משוחזרות ומעובדות.
כל ההליכים הכוללים מודלים של בעלי חיים נבדקו על ידי הוועדה המוסדית המקומית לטיפול בבעלי חיים ומועצת הביקורת הווטרינרית של JoVE.
1. הכנת קריש שנוצר באופן אקסוגני המסומן בסמן פלואורסצנטי (איור 1)
הרדמה של עכבר בתא אינדוקציה באמצעות 3% איזופלורן מעורבב עם 30% חמצן (1.5 ליטר/דקה 100% חמצן). הקפידו על עומק הרדמה הולם על ידי התבוננות בטונוס השרירים ואישור היעדר רפלקס צביטת הבוהן.
הניחו את החיה על וילון סטרילי במצב נוטה ושמרו אותה תחת הרדמה באמצעות מסכת אינהלציה ואיזופלורן 2% מעורבב עם 30% חמצן. בצע את ההליכים הבאים באמצעות טכניקות אספטיות וחלוקים/מסכות/כפפות/מכשירים סטריליים. שמור על תנאים סטריליים על ידי ניקוי וחיטוי אזור הניסוי ב-70% אלכוהול לפני וא....
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
איור 1: סקירה כללית של הכנת קריש דם עם תווית פלואורסצנטית. (A) ערבוב של דם מלא טרי עם בדיקה פלואורסצנטית קרובה לאינפרא אדום (NIRF) Cy5.5 (C15) המקושרת קוולנטית לגדילי הפיברין של הפקקת על ידי פעולה אנזימטית צולבת פיברין של גורם קרישה מופעל XI.......
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
Materials
List of materials used in this article
Name
Company
Catalog Number
Comments
מכונות
microCT
NanoFocusRay, JeonJu, Korea
NFR Polaris-G90
מד זרימה לייזר דופלר
Perimed, שטוקהולם, שוודיה
מערכת PeriFlux 5000
מיקרוסקופ כירורגי
Leica Microsystems, סיאול, קוריאה
אינהלציה EZ4HD
PerkinElmer, מסצ'וסטס, ארה"ב
XGI-8
תוכנה
בקרת NFR
NanoFocusRay, JeonJu, קוריאה
NFR Polaris-G90
תוכנת בקרת מיקרו-CT
לוסיון
אינפיניט, סיאול, קוריאה
תוכנת הדמיית עיבוד תלת מימד
של Lucion
תרשים מעבדה 7
ADInstruments, קולורדו, ארה"ב
תרשים מעבדה 7
rCBF
Image J תוכנה
Wanye Rasband, NIH, ארה"ב
1.49d
ניתוח הדמיה
התקנים/מכשירים
משאבת עירוי
הרווארד, מסצ'וסטס, ארה"ב
משאבה 22( 55-2226)
שמיכה הומותרמית
Panlab, ברצלונה, ספרד
HB101
צריבת כיס
Daejong, סיאול, קוריאה
DJE-39
מטריצת מוח
טד פלה, קליפורניה, ארה"ב
15003
חתך קורונלי
PE-50 צינורות
Natsume, טוקיו, יפן
SP-45 (PE-50)
מזהה 0.58 מ"מ OD 0.96 מ"מ
צינורות
PE-10Natsume, טוקיו, יפן
SP-10 (PE-10)
I.D. 0.28 מ"מ OD 0.61 מ"מ
30 מד מחט
sungshim-medical, סיאול, קוריאה
מזרק
CPL-רפואי, אנסאן, קוריאה
1 ו-3 סמ"ק
גזה
Panamedic, צ'אונן, קוריאה
קלטת
סקוטש, סיאול, קוריאה
3M-810
מיקרו מלקחיים
Fine Science Tools, ונקובר, קנדה
11253-27
Dumont #L5
Micro Scissor
Fine Science Tools, ונקובר, קנדה
15000-03
Vannas spring
Scissor
Fine Science Tools, ונקובר, קנדה
14084-08
8.5 ס"מ
תפר משי שחור
Ailee, בוסאן, קוריאה
SK6071, SK728
6-0 ו-7-0
ריאגנטים
מלוקסיקם
יוהאן, סיאול, קוריאה
משחה וטרינרית
נוברטיס, באזל, שוויץ
10% פובידון-יוד (בטאדין)
פירסון, צ'און-אן, קוריאה
כלוריד ברזל
סיגמא, מיזורי, ארצות הברית
157740-5G
TTC
אמרסקו, אוהיוארה"ב
0765-100 גרם
איזופלורן
האנה-פאם, גיונגי, קוריאה
איפראן
100 מ"ל
PBS
Welgene, דאגו, קוריאה
LB001-02
500 מ"ל
ננו-חלקיקי
סינתזה
מי מלח רגילים
Daihan Pham, סיאול, קוריאה
48N3AF3
20 מ"ל
מכונת הרדמה זהב
Reprints and Permissions
Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article