הדמיית רפלקציה מפוזרת מולטי-ספקטרלית של זרימת הדם במוח של חולדה ומבנה הרקמות

תקציר

מקור: Nishidate, I., et al. הערכה סימולטנית של המודינמיקה מוחית ותכונות פיזור האור של מוח החולדה in vivo באמצעות הדמיית רפלקציה מפוזרת מולטי-ספקטרלית. J. Vis. Exp. (2017)

סרטון זה מדגים את השימוש בהדמיית רפלקציה מפוזרת מולטי-ספקטרלית כדי לנתח את זרימת הדם המוחית, רמות החמצן ושינויים במבנה הרקמה בחולדה מורדמת, ומספק תובנות לגבי המודינמיקה והמורפולוגיה של המוח בתנאים משתנים.

פרוטוקול

כל ההליכים הכוללים מודלים של בעלי חיים נבדקו על ידי הוועדה המוסדית המקומית לטיפול בבעלי חיים ומועצת הביקורת הווטרינרית של JoVE.

1. רכישת תמונות לדוגמה
   הערה: תמונות של עוצמת אור מפוזרת של מוח חולדה חשוף בתשעה אורכי גל נלכדות ונשמרות בכונן הקשיח של מחשב אישי תוך שימוש באותם תנאי רכישה.
   1. הניחו בעדינות את החולדה על הבמה והתאימו לאט את רמת הבמה כך שהמצלמה תוכל להתמקד על פני המוח של החולדה.
   2. בחר בפקודה "שמור" מתפריט הקובץ כדי לשמור תמונה בקובץ.
   3. שנה את מיקום המסנן על ידי סיבוב גלגל המסנן.
   4. שמור תמונה באורכי הגל האחרים בהתאם לתהליך שתואר לעיל. שם הקובץ צריך לזהות את הדגימה ואת אורך הגל ( למשל, R500, R520, R540 ... R760).
2. רכישת תמונות כהות
   הערה: מצלמת CCD (מכשיר מצמד טעון) יכולה לייצר עוצמת אור בתגובה לאות חשמלי. עם זאת, יש תפוקה מינורית כלשהי עקב רעש במעגלים החשמליים ובגלאים, גם אם האור לא נכנס לגלאי; זה נקרא רעש זרם כהה. כדי למדוד במדויק את העוצמה הספקטרלית של האור, יש לרשום את רכיב הזרם הכהה כתמונה כהה ולאחר מכן להפחית מהאות הנמדד. התמונה הכהה היא תמונה שצולמה עם נתיב האור חסום.
   1. כבה את הלוגן lamp מקור האור.
   2. חסום את נתיב האור למערכת מצלמות ה-CCD באמצעות לוחית מיגון.
   3. בחר בפקודה "שמור" מתפריט הקובץ כדי לשמור תמונה בקובץ. שם הקובץ צריך לזהות את הדגימה ( למשל, כהה).

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה

שם	חברה	מספר קטלוג	הערות
150-W הלוגן-מנורת מקור אור	Hayashi Watch Works Co., Ltd, טוקיו, יפן	LA-150SAE
מדריך אור	Hayashi Watch Works Co., Ltd, טוקיו, יפן	LGC1-5L1000
איסוף עדשה	Hayashi Watch Works Co., Ltd, טוקיו, יפן	SH-F16
מסנני הפרעות l@500nm	Edmund Optics Japan Ltd, טוקיו, יפן	#65088
מסנני הפרעות l@520nm	Edmund Optics Japan Ltd, טוקיו, יפן	#65093
מסנני הפרעות l@540nm	Edmund Optics Japan Ltd, Tokyo, Japan	#65096
מסנני הפרעות l@560nm	Edmund Optics Japan Ltd, טוקיו, יפן	#67766
מסנני הפרעות l@570nm	אופטיקה אדמונד יפן בע"מ, טוקיו, יפן	#67767
מסנני הפרעות l@580nm	אופטיקה אדמונד יפן בע"מ, טוקיו, יפן	#65646
מסנני הפרעות l@600nm	אופטיקה אדמונד יפן בע"מ, טוקיו, יפן	#65102
מסנני הפרעות l@730nm	אופטיקה אדמונד יפן בע"מ, טוקיו, יפן	#65115
מסנני הפרעות l@760nm	אופטיקה אדמונד יפן בע"מ, טוקיו, יפן	#67777
גלגל מסנן ממונע	Andover Corporation, NH, ארה"ב	FW-MOT-12.5
מצלמת CCD מקוררת 16 סיביות	Bitran, יפן	BS-40
עדשת זום וידאו	Edmund Optics Japan Ltd, טוקיו, יפן	VZMTM300i
Spectralon תקן לבן עם 99% השתקפות מפוזרת	Labsphere Incorporated, צפון סאטון, ניו המפשייר ארה"ב	SRS-99-020