הדמיה של מקלעת כורואיד במוח עכבר באמצעות מיקרוסקופ אלקטרונים סורק

In This Article

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

מקור: Van Wonterghem, E., et al. מיקרודיסקציה ומיקרוסקופ אלקטרונים סריקה שלמה הדמיה של מקלעת כורואיד עכבר. J. Vis. Exp. (2022)

סרטון זה מדגים את ההכנה וההדמיה של רקמת מקלעת כורואיד ממוח עכבר באמצעות מיקרוסקופ אלקטרונים סורק (SEM). התהליך כולל קיבוע רקמות, התייבשות וציפוי בשכבת פלטינה מוליכה לייצוב והכנת הדגימה להדמיה. SEM מצלם תמונות מפורטות של תאי אפיתל עם מיקרוווילי ומספק תובנות לגבי המאפיינים המבניים של הרקמה.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

כל ההליכים הכוללים דגימות של בעלי חיים נבדקו ואושרו על ידי ועדת הביקורת האתית המתאימה לבעלי חיים.

1. ניתוח מורפולוגי של רקמת מקלעת כורואיד (CP) באמצעות מיקרוסקופ אלקטרונים סורק (SEM)

זהירות: תמיסות רעילות משמשות בשלבי העיבוד הבאים. מומלץ לבצע את הכנת הדגימה במכסה אדים.

בצע הכנה לדוגמה עבור SEM כמתואר להלן.
1. העבירו את ה-CP המבודד הטרי לתמיסת קיבוע טרייה המכילה 2% פרפורמלדהיד ו-2.5% גלוטראלדהיד במאגר Na-cacodylate 0.1 M (pH 7.4). דגירה למשך הלילה בטמפרטורה של 4 מעלות צלזיוס.
  הערה: מכיוון שרקמת ה-CP שבירה ודקה מאוד, יש לשים את הרקמה בסלי דגימות קטנים (ראה טבלת חו....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
Name	Company	Catalog Number	Comments
תושבות דגימת אלומיניום EM	Sciences	75220
מאגר קקודילאט	EM Sciences	11652
לשוניות דבק פחמן -12 מ"מ	EM Sciences	77825-12
מייבש נקודה קריטית	Bal-Tec	CPD030
Crossbeam 540	Zeiss		SEM מערכת
מלקחיים	Fine Science Tools GmbH	91197-00
Glutaraldehyde	EM Sciences	16220
Osmium Tetroxide	EM Sciences	19170
Paraformaldehyde	Sigma-Aldrich	P6148
תמיסת מלח חוצצת פוספט (PBS)	Lonza	BE17-516F
מניין פלטינה		Q150T ES	PBS ללא Ca⁺⁺, Mg⁺⁺ או פנול אדום;
סל דגימה	EM Sciences	70190-01

מסונן סטרילי נירוסטה

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission