Method Article

הדמיה של נדידת תאי פסגה עצבית בעובר דג זברה באמצעות הדמיית זמן-lapse מרובת פוטונים

June 17th, 2025

In This Article

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

מקור: Williams, A. L., et al. הדמיית זמן-lapse מרובת פוטונים כדי להמחיש התפתחות בזמן אמת: הדמיה של תאי פסגה עצבית נודדים בעוברי דג זברה. J. Vis. Exp. (2017)

סרטון זה מציג פרוטוקול הדמיה מרובה פוטונים כדי לדמיין את הנדידה של תאי פסגה עצבית בעובר דג זברה בזמן אמת ברזולוציה גבוהה.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

כל ההליכים הכוללים מודלים של בעלי חיים נבדקו על ידי הוועדה המוסדית המקומית לטיפול בבעלי חיים ומועצת הביקורת הווטרינרית של JoVE.

1. הגדרת מיקרוסקופ להדמיית זמן-lapse

1. קביעת הגדרות לייזר

1. קביעת אורך גל לייזר לשימוש. השתמש באורך גל שהוא כפול מאורך גל העירור של הפלואורופור המעניין (למשל אורך גל בין 880 ל-940 ננומטר עבור חלבון פלואורסצנטי ירוק (GFP).
הערה: במחקר הנוכחי, הגדרת אורך הגל עבור GFP הייתה בין 880 ל-940 ננומטר. ככל שאורך הגל גבוה יותר, כך הספק המוצא של הלייזר נמוך יותר.

2. קבע שידור לייזר. אחוז גבוה של העברת....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
figure-results-1

איור 1. ההתקנה. A. כל רכיב במנגנון ההרכבה של העובר, כולל תא האמבטיה הפתוח, פלטפורמת ההחלפה המהירה ומתאם הבמה. ב. הרכבת תא האמבטיה הפתוח. C. תוספת של תמיסת אגרוז 2% (60-70 מעלות צלזיוס) לתא ה.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
TC SP5 MP מיקרוסקופ רב-פוטוניLeica Microsystems CMS GmbH
Mai Tai DeepSee Ti-Sapphire LaserSpectraPhysics
Laser Safety BoxLeica Microsystems CMS GmbH
Leica Application Suite X (LAS X) SOFTWARELeica Microsystems CMS GmbH
Photoshop CS 6 גרסה 13.0 x64 תוכנהAdobe
iMovie גרסה 10.1.4 תוכנהApple
Open Bath ChamberWarner InstrumentsRC-40HPHigh Profile
מהיר פלטפורמת החלפהוורנר אינסטרומנטסQE-135 מ"מ
מתאם במהוורנר אינסטרומנטסSA-20LZ-AL16.5 x 10 ס"מ
נמס נמוך AgaroseISC BioexpressE-3112-25GeneMate מסננת GQA Low MeltAgarose, 25 גרם
כיסויי זכוכיתפישר סיינטיפיק12-545-102זכוכית כיסוי מעגל. קוטר 25 מ"מ
שומן ואקום גבוהפישר מדעי14-635-5C2.0 פאונד. דאו CORNINGCORPORATION1658832

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Neural Crest CellsZebrafish EmbryoMulti Photon ImagingTime Lapse ImagingEGFP LabelingZ Stack AcquisitionWater Immersion ObjectiveFluorescence VisualizationEmbryo Media Refill3D Deconvolution

Related Articles