אפיון התכונות המכניות של רקמת מוח של עכבר באמצעות מיקרוסקופ כוח אטומי

In This Article

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

מקור: Canovic, E. P., et al. אפיון תכונות מכניות רב-ממדיות של רקמת המוח באמצעות מיקרוסקופ כוח אטומי, הזחת פגיעה וריאומטריה. J. Vis. Exp. (2016)

סרטון זה מדגים את השימוש במיקרוסקופ כוח אטומי (AFM) למדידת התכונות הויסקו-אלסטיות של רקמת המוח, כאשר שלוחה עם בדיקה כדורית מקיימת אינטראקציה עם הרקמה ומתכופפת תחת כוחות מופעלים. קרן לייזר המוסטת על גבי גלאי עוקבת אחר השלוחה כדי למדוד את עומק השקע והרפיית הכוח, מה שמאפשר לאפיין את התכונות המכניות של הרקמה.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

כל ההליכים הכוללים דגימות של בעלי חיים נבדקו ואושרו על ידי ועדת הביקורת האתית המתאימה לבעלי חיים.

1. כניסה התומכת במיקרוסקופ כוח אטומי (AFM)

הכן צלחות פטרי בקוטר 60 מ"מ (P60) עם דבק ביולוגי שמקורו במולים לפי הוראות היצרן.
1. הכן מלאי של תמיסת חיץ ניטרלית המורכבת מ-0.1 M נתרן ביקרבונט במים סטריליים עם pH אופטימלי של 8.0. יש לעקר מסנן (0.2 מיקרון) את מאגר הנתרן ביקרבונט ולאחסן אותו בטמפרטורה של 4 מעלות צלזיוס.
2. במכסה זרימה למינרית, מערבבים תמיסה של 6.25% דבק ביולוגי שמקורו במולים ו-3.125% נתרן הידרוקסיד (NaOH) במאגר הנתרן ביקרבונט.
3. פיפטה 100μl של תמיסת הדבק הביולוגי על צלחת פטרי בקוטר 60 מ"מ (P60) והשתמש ב....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
Name	Company	Catalog Number	Comments
Hibernate-A medium	Gibco	A1247501	CO_מדיום עצבי בלתי תלוי לרקמות בוגרות
מיקרוסקופ כוח אטומי, MFP-3D-BIO	Asylum Research	-
מחמם צלחות פטרי	מחקר מקלט	-
בדיקת AFM, 0.03 N/m, רדיוס 10 אום כדור בורוסיליקט	Novascan	PT.
Cell-Tak	Corning	354240	דבק ביולוגי שמקורו בצדפות
נתרן ביקרבונט	Sigma-Aldrich	S5761	ניתן להשתמש בספקים חלופיים
נתרן הידרוקסיד, 1N	Sigma-Aldrich	59223C	ניתן להשתמש בספקים חלופיים

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission