הדמיה של פקקת מוחית של עכבר באמצעות הדמיה פלואורסצנטית קרובה לאינפרא אדום

כל ההליכים הכוללים דגימות של בעלי חיים נבדקו ואושרו על ידי ועדת הביקורת האתית המתאימה לבעלי חיים.

1. הדמיית פקקת פלואורסצנטית קרובה לאינפרא אדום (NIRF) Ex Vivo של רקמת המוח

1. לאחר עריפת הראש, הסר את הקרקפת וחתך את הגולגולת במספריים מהנקב מגנום כלפי מעלה לכיוון התפר הסגיטלי. הסר את קמרון הגולגולת על ידי הגבהה זהירה של שולי הגולגולת החתוכה באמצעות מספריים תוך הימנעות מפגיעה במוח הבסיסי, ובכך לחשוף את חצאי הכדור.
2. חתכו את עצבי הראייה בבסיס המוח קרוב ככל האפשר לפני השטח של המוח מכיוון שהם יכולים לחפוף למעגל עורקי וויליס (COW) שיש לדמיין בהדמיה פלואורסצנטית קרובה לאינפרא אדום (NIRF). לאחר מכן, כדי לדמיין את 'עורק המוח האמצעי (MCA) / עורק המוח הקדמי (ACA) / עורק הצוואר הפנימי הדיסטלי (ICA) בצורת Y' עבור דימות פקקת NIRF, חתכו את ה-ICAs הדיסטליים רחוק ככל האפשר לפני השטח של המוח לאחר דחיסת בסיס המוח הקטן בעדינות כדי לחשוף את נקודות החיתוך (איור 1A).
3. בצעו דימות NIRF (עירור/פליטה, 675 / 690 ננומטר; חשיפה של שנייה אחת) של רקמת המוח שהוסרה כשהבסיס שלה פונה כלפי מעלה (איור 1B, C), אשר מדמה את הטרומבואמבול המסומן באופן פלואורסצנטי בעורקי ה-COW (איור 1D). לאחר מכן, בצע הדמיה נוספת כאשר קודקוד המוח מצביע כלפי מעלה, מה שמדמה פקקת קליפת המוח. הימנע מייבוש המוח על ידי הנחת כמה טיפות מי מלח על הרקמה.

איור 1: סקירה כללית של הדמיית Ex Vivo Near-Infrared Fluorescent (NIRF) של טרומבואמבול מוחי. (A ו-B) רקמת מוח מייצגת הוסרה מעכבר עם שבץ טרומבואמבולי. נקוט באמצעי זהירות כדי לא לאבד טרומבואמבולי (חץ אדום) בעורק המוח האמצעי (MCA) - אזור ההסתעפות של עורק המוח הקדמי (ACA) של עורק הצוואר הפנימי הדיסטלי (ICA, חיצים כחולים) בעת הסרת המוח. (ג ו-ד) אקס ויוו הדמיית פקקת NIRF. רקמת המוח ממוקמת בתוך החדר האטום לאור של הדמיית NIRF (C) להדמיה של הפקקת (חץ אדום ב-D) המסומן מראש עם סמן פלואורסצנטי Cyanine 5.5 (Cy5.5) C15 לפני חסימה תסחיפית של אזור ההסתעפות MCA-ACA.