מתן תוך ורידי של וקטורים רקומביננטיים של וירוסים הקשורים לאדנו במודל חולדה

תקציר

מקור: Grames, M. S., et al. שיטות וטיפים למתן תוך ורידי של נגיף הקשור לאדנו לחולדות והערכת התמרה של מערכת העצבים המרכזית. J. Vis. Exp. (2017)

סרטון זה מדגים את הזרקת וריד הזנב של נגיף אדנו-קשור רקומביננטי (AAV) בחולדות. לאחר ההזרקה לווריד הזנב הרוחבי, הנגיף נכנס לזרם הדם, מסתובב דרך הלב ומגיע למוח, שם הוא נכנס לתאי עצב ומקל על ייצור חלבון מטרה ליישומים נוירותרפיים.

פרוטוקול

כל ההליכים הכוללים מודלים של בעלי חיים נבדקו על ידי הוועדה המוסדית המקומית לטיפול בבעלי חיים ומועצת הביקורת הווטרינרית של JoVE.

1. הכן את ה-rat

1. הפוך את החמצן עד 1 ליטר לדקה והגדר את הרדמת האיזופלורן ל-5%. ודא שהרדמת הגז זורמת לתא האינדוקציה על ידי בדיקת כל צינורות החיבור וכיווני תא העצירה.
2. הנח את החולדה בתא האינדוקציה של הרדמת גז למשך כ-3 דקות עד שהחולדה אינה מגיבה.
3. הקפידו על עומק הרדמה הולם על ידי צביטה של הבוהן. לא אמורה להיות תנועה בכף הרגל או ברגל לאחר צביטת הבוהן.
4. צמצם את הרדמת האיזופלורן ל-2% לצורך תחזוקה והתאם את תא העצירה כך שההרדמה תזרום למסכת ההרדמה.
5. הניחו את האף של החולדה במסכת הה....

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה

שם	חברה	מספר קטלוג	הערות
-1-mL מזרק	BD	309626	מגיע עם מחט 25 גרם מחוברת. החלף במחט 27-30 גרם להזרקה
30 גרם מחט	BD	305106
Isoflurane	Piramal Healthcare	66794-013-25	Isoflurane USP 250 מ"ל
מסכת הרדמה	Kopf Instruments	906
גזה	הנרי שיין	100-2524	2 אינץ' x 2 אינץ' (5 ס"מ x 5 ס"מ)
וופורייזר הרדמה בגז	SurgiVet	4214322	T3 קלאסי
נבלות הרדמה בגז	SurgiVet	32373B10	Enviro-PURE
כרית חימום	Sears	17280
70% אתנול	Decon Laboratories, Inc.	2401	140 הוכחה
70% איזופרופנול	VWR	89108-160