RESEARCH
Peer reviewed scientific video journal
Video encyclopedia of advanced research methods
Visualizing science through experiment videos
EDUCATION
Video textbooks for undergraduate courses
Visual demonstrations of key scientific experiments
BUSINESS
Video textbooks for business education
OTHERS
Interactive video based quizzes for formative assessments
Products
RESEARCH
JoVE Journal
Peer reviewed scientific video journal
JoVE Encyclopedia of Experiments
Video encyclopedia of advanced research methods
EDUCATION
JoVE Core
Video textbooks for undergraduates
JoVE Science Education
Visual demonstrations of key scientific experiments
JoVE Lab Manual
Videos of experiments for undergraduate lab courses
BUSINESS
JoVE Business
Video textbooks for business education
Solutions
Language
he_IL
Menu
Menu
Menu
Menu
Research Article
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Erratum Notice
Important: There has been an erratum issued for this article. View Erratum Notice
Retraction Notice
The article Assisted Selection of Biomarkers by Linear Discriminant Analysis Effect Size (LEfSe) in Microbiome Data (10.3791/61715) has been retracted by the journal upon the authors' request due to a conflict regarding the data and methodology. View Retraction Notice
הפגנה של assay כמותית מהיר של עיכוב קרישת דם על ידי-הפרין נמוך משקל המולקולרי, enoxaparin. התרומה של enoxaparin מוערכת על ידי הסרת ההשפעה שלו דרך מערכת עיכול עם heparinase. תיאור מלא יותר של assay הוא מפורט במאמר שפורסם.
יש צורך בבדיקה קלינית כדי לקבוע את המידה שבה הדם של מטופל anticoagulated ביעילות על ידי---הפרין הנמוך משקל המולקולרי (LMWH), enoxaparin. ישנם גם מצבים קליניים דחופים שבו יהיו חשוב אם זה יכול להיקבע במהירות. הבדיקה הנוכחית נועדה להשיג את זה. אנו assayed דגימות דם אדם שתובלו בריכוזים ידועים של enoxaparin בלבד. המאפיין המהותי של assay הנוכחי הוא כימות של היעילות של enoxaparin בדגימת הדם של מטופל באמצעות השפלתו להשלים עם חוסר הפעילות heparinase. שתי דגימות דם נשאב לתוך Vacutainer צינורות (קיטון-דיקנסון; פרנקלין לייקס, ניו ג'רזי) שתובלו בenoxaparin; מדגם אחד היה מתעכל עם heparinase למשך 5 דקות על 37 מעלות צלזיוס, המדגם האחר ייצג מעמד anticoagulated הבסיסי של החולה. קיצור האחוזים מזמן קרישה במדגם heparinase טופל, לעומת במדינת aseline, הניבה תרומת הקרישה של enoxaparin. אנחנו השתמשנו במכשיר הנייד, הסוללה המופעל Hemochron 801 למדידות של זמני קרישה (הבינלאומי Technidyne קורפ, אדיסון, ניו ג'רזי). המנגנון יש 2 (37 ° C) בארות צינור assay מבוקרים תרמוסטטית. ערכנו את המבחנים בשני סוגים של מחסניות assay שזמינים מהיצרן של המכשיר. מחסנית אחת שונה כדי להגביר את הרגישות שלו. הוצאנו את קאולין מFTK-ACT המחסנית על ידי שטיפה נרחבת עם מים מזוקקים, ומשאיר רק את משטח הזכוכית של הצינור, ואולי מגנט זיהוי, כמפעילים. קראנו assay זה הופעל מינימאלי (מאא). השימוש בבדיקה הופעלה מינימאלי נחקר על ידינו ואחרים. 2-4 המחסנית השנייה שלמדה הייתה assay (A104) זמן thromboplastin חלקי פעיל (aPTT). זה היה בשימוש כפי שסופק מהיצרן. בארות thermostated של המכשיר werדואר משמש הוא לעיכול heparinase ומבחני קרישה. הבדיקה יכולה להסתיים בתוך 10 דקות. Assay מאא הראה שינויים חזקים בזמן קרישה לאחר עיכול heparinase של enoxaparin מעל טווח ריכוז קליני טיפוסי. ב0.2 אנטי Xa IU של enoxaparin למ"ל של דגימת דם, עיכול heparinase נגרם ירידה ממוצעת של 9.8% (20.4 שניות) בזמן קרישה; ב1.0 IU למ"ל של enoxaparin הייתה ירידת 41.4% (148.8 שניות). דוח זה מציג רק את היישום הניסיוני של assay; הערך שלו בסביבה קלינית עדיין צריך לקום.
1. כינון Heparinase
2. איסוף דגימות דם
3. עיכול Heparinase
4. מבחני קרישה
איור 1 מציג את התוצאות ליחסים בין הירידה באחוז זמן קרישה בעקבות חיסול enoxaparin עם heparinase לסדרת ריכוזים ממוסמרים של enoxaparin (0.2, 0.4 ו -1.0 אנטי Xa IU למ"ל). תוצאות מוצגות לשניהם מאא ומחסניות assay aPTT. הריכוזים המדודים של enoxaparin מassay chromogenic של פעילות אנטי Xa כלולים גם בabscissa של כל חלקה.
איור 2 מציג את החלקות של אותם הנתונים כירידה באחוז זמן קרישה לעומת מדד chromogenic של פעילות אנטי Xa.
מתאמים חזקים ליניארי, עם משמעויות סטטיסטיות גבוהות, נמצאו לכל הארבע מערכות היחסים.

האיור 1. נקודה של קביעות טיפוח של enoxaparin contr ibution לזמני קרישה של דם כל קוצים המבוססים על אחוז השינוי (קיצור) זמן קרישה לאחר דגירה עם heparinase. ריכוזי enoxaparin הממוסמרים הוסיפו לכל דם והריכוזים אנטי Xa הפלזמה נמדדו (ממוצע ± SE, בסוגריים) ממוקמים בabscissa של כל גרף. כל שיעורי השינוי בזמני קרישה מוצגים כאמצעי וSE, יחד עם קיצור זמן הממוצע קרישה בשניות. נתונים מאותו המטופל מחוברים על ידי קווים מקווקווים. הנתונים לארבעת החולים שזוהו עם כוכביות בעלילה (תוצאות מאא) זהים לארבעה החולים בחלקה ב '(מבחני aPTT). כל התוצאות מייצגים קביעות יחידות. מקדמי מתאם פירסון r = 0.869 (p = 1.9 x 10 -5) וr = 0.916 (p = 2.8 x 10 -5) למערכות היחסים עם מאא וaPTTassay, בהתאמה. לשכפל באישור Inchiosa et al. 1

המחברים אין לי מה לחשוף.
הפגנה של assay כמותית מהיר של עיכוב קרישת דם על ידי-הפרין נמוך משקל המולקולרי, enoxaparin. התרומה של enoxaparin מוערכת על ידי הסרת ההשפעה שלו דרך מערכת עיכול עם heparinase. תיאור מלא יותר של assay הוא מפורט במאמר שפורסם.
החקירות בוצעו אך ורק עם תמיכה ממשאבים מחלקתיים ומוסדיים. מנגנון הקרישה (Hemochron 801) הושאל ללא התחייבות מהיצרן. מחסניות assay נרכשו בעלויות הקמעונאי שלהם. הדמות המקדימה בוידאו שונה מSanderink, et al. 12 הדמות השנייה בסרטון (כמובן זמן עיכול heparinase) שוחזרה באישור Inchiosa et al. 1
| שם מגיב | חברה | מספר קטלוגים | תגובות |
| Hepzyme | סימנס | B4240 | אני heparinase |
| מחסנית "מאא" | Technidyne | FTK-ACT | שונה על ידי הסרת קאולין |
| aPTT מחסנית | Technidyne | A104 |